Inżynieria Genetyczna Egzamin 2015

Publikacja objęta jest prawem autorskim. Wszelkie prawa zastrzeżone. Kopiowanie i rozpowszechnianie zabronione. Publikacja przeznaczona jedynie dla klientów indywidualnych.
Zakaz rozpowszechniania i udostępniania w serwisach bibliotecznych

INŻYNIERIA GENETYCZNA - EGZAMIN

TWÓJ BIOTECHNOLOG

https://www.facebook.com/twoj.biotechnolog

Uczelnia: Politechnika Wrocławska Wydział: Chemiczny Kierunek: Biotechnologia

Kurs: Inżynieria Genetyczna – Wykład Semestr: 6 prowadzący: prof.dr hab.inż. Andrzej
Ożyhar
Opracowanie zawiera: szkice rozwiązań zadań (44 strony A4) ze wszystkich egzaminów z
ostatnich lat.

Opracował: Twój Biotechnolog.

Więcej zadań na stronie:

https://www.facebook.com/twoj.biotechnolog

Uwaga: Notatka może zawierać błędy lub być niekompletna. Każdy korzysta z niej na
własną odpowiedzialność. Notatka objęta jest prawem autorskim. Wszelkie prawa
zastrzeżone. Kopiowanie i rozpowszechnianie zabronione. Publikacja przeznaczona jedynie
dla klientów indywidualnych. Zakaz rozpowszechniania i udostępniania we wszystkich
serwisach bibliotecznych.

Więcej opracowań na stronie:

http://chomikuj.pl/twoj.biotechnolog

INŻYNIERIA GENETYCZNA TERMIN 1 2014

1. Który z podanych niżej związków jest odpowiednim substratem do radioaktywnego

znakowania 5’ końca startera, który zostanie wykorzystany do PCR, mającego na celu
otrzymanie fragmentu DNA zawierającego znacznik 32P na jednym z 5’ końców:
a) dATP, znakowany 32P w pozycji gamma
b) ATP, znakowany w pozycji alfa
c) DTP, znakowany w pozycji alfa
d) [alfa-32P]-dATP
e)[gamma-32P]-ATP

2. Aby komórki E.Coli uległy transformacji cząsteczkami rekombinowanych plazmidów

komórki te muszą być:

a) Komórkami szczepu patogennego
b) W fazie stacjonarnej
c) Kompetentne
d) Zróżnicowane
e) Poddane szokowi termicznemu, tj. umieszczone w temperaturze 40 st. C

3. Które z poniższych elementów są konieczne do przeprowadzenia ekspresji sekwencji

kodującej genu eukariotycznego w komórce bakteryjnej:
a) sekwencja wiążąca rybosomy
b) silny i jednocześnie regulowany promotor prokariotyczny
c) prokariotyczna sekwencja terminacji transkrypcji
d) sekwencje intronowi
e) eukariotyczna polimeraza RNA

GRUPA E EGZAMIN POPRAWKOWY - TERMIN 3

1. Wektor plazmidowy poddany linearyzacji enzymem EcoRI został, bezpośrednio po

inaktywacji enzymu, użyty do ligacji z ds. DNA powstałym w wyniku hybrydyzacji dwóch
syntetycznych oligonukleotydów (insert); syntetyczny ds. DNA został tak zaprojektowany,
iż posiada końce identyczne z końcami wektora (EcoRI). Mieszaniną koligacyjną poddano
transformacji komórki bakteryjne i wysiano je na podłoże zawierające odpowiedni dla
wektora antybiotyk. Które z podanych poniżej twierdzeń są prawdziwe ( zakładamy, że
analizie poddano odpowiednio dużą ilość klonów):

zadanie to wystąpiło również na jednym z terminów w takiej samej formie, ale należało

NIEPRAWDZIWE

zaznaczyć odpowiedzi

a. Pośród powstałych klonów można było zaobserwować klony zawierające wektor
pozbawiony insertu

Generalnie w tym wypadku to nie insert, a wektor jest odpowiedzalny

za przeżycie komórki na podłożu, wektor może być poddany samoligacji i taka komórka
przeżyje na antybiotyku. W warunkach zadania jest mowa tylko o jednym antybiotyku, na
który odporność nadaje wektor. Na podłożu więc wyrosną komórki które przyjeły wektor i
nie ma znaczenia czy zawierają one insert, czy go nie zawierają. W tym wypadku insert nie
nadaje odporności na antybiotyk.

b. Pośród powstałych klonów można było zaobserwować klony zawierające
rekombinowany wektor z wbudowanym jednym insertem

Zacznijmy od tego że na podłożu

mogą wyrosnąć komórki z wbudowanym jednym insertem. Jest to naturalną konsekwencją
przyjęcia przez komórkę wektora z insertem. Na podłożu mogą również pojawić się
komórki z samym wektorem, a pozbawione insertu. Tak dobrane są warunki zadania.
Wszystko rozbija się o słówko mogą. “Mogą” nie nawiązuje do wszystkich możliwości,
dotyczy tylko tej stricte jednej sytuacji. I dlatego, wg. mnie ta odpowiedź aczkolwiek
bezsensowna, jest prawdziwa.

c. pośród powstałych klonów można było zaobserwowac wektor zawierajacy wiecej niż
jeden fragment / wśród powstałych klonów można było zaobserwować klony zawierające
wektor z wbudowanymi kilkoma fragmentami

nie jest to (raczej) możliwe aby doszło do

wstawienia w miejsce kilku insertów.

d. Ligacji insertu i cząsteczki wektora towarzyszyło powstanie 4 wiązań fosfodiestrowych

Ligaza wymaga dwuniciowego DNAnastępuje ligacja ds. DNA (2 nici) po obu stronach (2

końce), sumarycznie daje to 4 wiązania.

e. Ligacji insertu i cząsteczki wektora towarzyszyło powstanie 2 wiązań fosfodiestrowych

2. Które z twierdzeń dotyczących reakcji łańcuchowej polimeryzacji (PCR) są prawdziwe?

a. Cykl PCR obejmuje trzy etapy: denaturację w temperaturze 95 st. C, hybrydyzację w
temperaturze zależnej od długości startera oraz elongację, którą zwykle prowadzi się w
temperaturze 72 st. C

wykład Ożyhara, Wykład VI 19.04.2013, wykład o PCR

“Hybrydyzacja starterów (3-065 st. C), temperatura zależy od długości starterów”; 72 st. C
dla polimerazy Taq.

b. Mieszanina reakcyjna PCR zawiera m. in. trifosforany czterech rybonukleotydów i
polimerazę DNA

deoksyrybonukleotydów oraz termostabilną polimerazę DNA Taq

(pochodzi z bakterii termofilnych Thermus aquaticus), plus 2 startery!

c. Może być wykorzystana do wykrywania rearanżacji chromosomalnych powodujących
niektóre formy białaczek

PCR jest doskonałą metodą do wykrywania białaczek

spowodowanych rearanżacją chromosomów Stryer str 142.

d. PCR może być wykorzystywany podczas mutagenezy ukierunkowanej sterowanej przez
oligonukleotydy

strona 204 GC, może być, ale wtedy tylko jedna mutacja na eksperyment

e. W przeciwieństwie do reakcji sekwencjonowania DNA metodą dideoksy, PCR wymaga
dwóch starterów, które są do siebie komplementarne

startery nie mogą byc do siebie

komplementarne.

3. Wektor kosmidowy został poddany ligacji z fragmentami DNA o przypadkowej

(różnej)długości w celu przygotowania biblioteki genomowej człowieka. Maksymalna
długość insertów składających się na bibliotekę będzie najprawdopodobniej wynosić:
a. 15 kb
b. 40 kb

Kosmid- wektor do klonowania składający się z miejsca cos λ wklejonego w

plazmid. Używany do klonowania fragmentów DNA o wiekości do 40.000 par zasad (40kb).

c. 150 kb
d. 23 kb
e. 8 kb

Spodobało ci się?

Chcesz więcej?

Zamów Opracowanie!

1. Polub i udostępnij nasz fanpage -

https://www.facebook.com/twoj.biotechnolog

2. Napisz do nas na facebook.com lub chomikuj.pl -

http://chomikuj.pl/twoj.biotechnolog

3. Zamów Opracowanie!