obecność i rodzaj p/c : ELISA

o

Materiał:

§

Surowica

§

płyn mózgowo-rdzeniowy

o

Przeciwciała klasy IgM wykrywane testem ELISA, pojawiają się w pierwszych dwóch
tygodniach inwazji, osiągają szczyt w ciągu 4-8 tygodni i obniżają się do poziomu
normalnego w ciągu 6-9 miesięcy. Nierzadko jednak utrzymują się do 2-3 lat.

o

Miano przeciwciał klasy IgG rośnie wolniej, osiągając szczyt w ciągu 1-2 miesięcy i
może utrzymywać się na wysokim poziomie przez wiele miesięcy.

o

W toksoplazmozie wrodzonej staje się też czasami konieczne ustalenie obciążenia

immunologicznego w momencie porodu i w 3-4 miesiące później w celu oceny
udziału przeciwciał toksoplazmowych klasy IgG w całkowitej puli surowiczych IgG
matki i dziecka.

§

Jeżeli wskaźnik obciążenia u dziecka podnosi się, świadczy to o wrodzonej
toksoplazmozie.

o

W ostatnich latach w diagnostyce okołoporodowej toksoplazmozy oznacza się
poziom swoistych IgA uznawanych jako marker wrodzonej toksoplazmozy.

§

Stwierdzenie u noworodków obecności IgM ; IgA lub miano IgG powyżej
1:3200 - świadczy o toksoplazmozie wrodzonej

o

Interpretacja wyników przed planowaną ciążą

§

IgG + : przeciwciała chronią, ale przed zajściem w ciążę należałoby
sprawdzić awidność, żeby wykluczyć przebycie zakażenia w ciągu
ostatnich 6 miesięcy

§

IgM + : należy zgłosić się do lekarza (ostra infekcja, albo niedawne
zakażenie, albo tzw. przetrwałe IgM – wykonać test na awidność )

§

IgM - / IgG - : konieczne okresowe badania w trakcie ciąży

o

Interpetacja wyników w trakcie ciąży:

§

IgM +, IgA +, serokonwersja IgG (po raz pierwszy wykryte IgG, wcześniej
wynik ujemny), wysoko dodatnie IgG à koniecznie należy zgłosić się do
lekarza

test awidności: ELISA

o

Test na awidność (mocznik rozbija słabsze wiązania IgG, ilość silnych wiązań określa
się metodą immunoenzymatyczną):

§

do 40 % - niska widność

§

40-60 % graniczna awidność

§

powyżej 60 % - wysoka awidność (wyklucza zakażenie w ciągu 5-6
miesięcy) świadczy, że przeciwciała silnie wiążą się z antygenem („stare”
zakażenie)

dynamika miana p/c: metoda Sabina-Feldmana (OSF)(modyfikacja odczynu wiązania
dopełniacza)

o

odczyn Sabina – Feldmana pozwala określić zmiany (dynamikę) miana
przeciwciał (dwie próbki surowicy w odstępie 2-3 tygodni, min. 2 miesiące po
leczeniu)

o

W OSF ustala się globalny poziom immunoglobulin przeciwko Toxplasma.

§

OSF jest próbą barwną z wykorzystaniem dopełniacza, w której dochodzi
do cytolizy tachyzoitów T. gondii w obecności swoistych przeciwciał.

·

PRZECIWCIAŁA – DOPEŁNIACZ – TROFOZOITY : trofozoity nie barwią
się błękitem metylenowym (WYNIK DODATNI)

·

BRAK przeciwciał - DOPEŁNIACZ – TROFOZITY : trofozoity barwią
się (WYNIK UJEMNY)

·

MIANO: rozcieńczenie, przy którym widać 50 : 50 trofozoitów
wybarwionych i niewybarwionych

§

Dodatni wynik badania, wskazujący na ostrą postać inwazji, mamy
wówczas jeżeli miano badanej surowicy jest powyżej 1:1000 (>300 j.m.)
wówczas uważa się, że pacjent ma aktywną postać toksoplazmozy.

Obecnie, próbą biologiczną zastępuje się oznaczaniem antygenu krążącego w teście

aglutynacji lateksowej (LAT), dot-ELISA lub metodą PCR, w której określane są powtarzające
się fragmenty DNA pasożyta T. gondii

o

antygen krążący (test lateksowy) – wykrywa T. gondii we krwi

§

Materiały do badania:

·

Surowica

·

Płyn mózgowo-rdzeniowy

·

Płyn z przedniej komory oka

§

Intensywność reakcji zlepnej odczytuje się wg trzystopniowej skali:

·

++ à drobnogrudkowa aglutynacja, aglutynaty równomiernie
rozmieszczone w całej kropli

o

świadczy o obecności antygenu T. gondii i wskazuje na
aktywną postać toksoplazmozy

·

+ à drobnogrudkowa aglutynacja, aglutynaty z tendencją
skupiania się w centrum kropli

o

muszą być potwierdzone obecnością swoistych

przeciwciał IgM i/lub IgA, zaś w przypadku płynu
mózgowo-rdzeniowego muszą być potwierdzone
obecnością przeciwciał IgE

·

- à brak aglutynacji, lateks jednolicie mętny