KOMORA THOMA/BÜRKERA
Szkiełko nakrywkowe
Głębokość komory 0,1 mm
KOMORA BÜRKERA
3 mm
Morfologia
krwi liczenie
leukocytów,
erytrocytów,
1 mm
trombocytów
3 mm
1 mm
3 mm x 3 mm x 0,1 mm = 0,9 mm3
KOMORA THOMA liczenie komórek w
hodowlach in vitro
1 mm
1 mm
1 mm x 1 mm x 0,1 mm = 0,1 mm3 = 0,1 ml
Reguła dwóch boków Burkera
Komórki liczone Komórki nie liczone
Liczenie komórek
X = a/2 x b (komórek /0,1 ml)
X ilość komórek
a suma komórek na obu siatkach
b rozcieńczenie komórek
np.:
Sporządz 10 ml zawiesiny komórek o gęstości 3 x 104 kom./ml, gdy hodowle do liczenia
rozcieńczono dziesięciokrotnie.
1. Liczymy 10 krotnie rozcieńczoną zawiesinę komórek. Na pierwszej siatce otrzymujemy 40 a
na drugiej 38 komórek.
2. Ze wzoru obliczamy ilość komórek w komorze: X = 78/2 x 10 = 390 (kom./0,1 ml)
1 ml 1000 ul
X = 390 x 104 kom./ml
3. SporzÄ…dzanie zawiesiny: X =390x104 kom./ml, V=10 ml zawiesiny, g = 3x104 kom./ml
V x g / X = Y ilość zawiesiny komórek liczonych na komorze w 10 ml płynu hodowlanego
V - Y = ilość płynu hodowlanego
10 ml x 3x104 / 390x104 = 0,077 ml (zawiesiny komórek policzonych na komorze)
10 ml - 0,077 ml = 9,923 ml (płynu hodowlanego)
Barwienie błękitem trypanu
Proste barwienie dające możliwość oceny żywotności populacji komórek. Barwnik
przenika do komórek przez uszkodzoną błoną komórkową, barwiąc je na niebiesko.
Nie pozwala rozróżnić komórek nekrotycznych i apoptotycznych.
Martwe neurony wybarwione błękitem trypany i żywe - fuksyną
Wyszukiwarka
Podobne podstrony:
Ćw 03c Izolacja limfocytów ze śledziony oraz określanie żywotności komórekOkreślanie żywotności i proliferacji komórek metodami spektrofotometrycznymiliczenie komorek w komorze brkera lab all comOznaczanie żywotności komórek metodą MTTGrajnert Józef Dzielny Komorek E bookPROGRAMOWANIE KOMOREK SZPIPrzegląd komórekĆw 03a Centralny i obwodowy układ limfatyczny Izolowanie komórek z narządów limfatycznychBarwienie komórek Analiza mikroskopowa obrazuSeryjny zabójca komórek nowotworowychPOROWNANIE KOMÓREK06 Formatowanie komórekIzolacja mitochondriów z komórek eukariotycznychWymagania wzrostowe komórek Podłoża hodowlanewięcej podobnych podstron