Wykład
6
3. Kwasy nukleinowe - budowa i
funkcje
3.1. Zasady nukleinowe,
nukleozydy, nukleotydy
3.2. Budowa i funkcje DNA i RNA
http://www.republika.pl/biochemia2004/kwasy-nukleinowe.htm
http://zguw.ibb.waw.pl/~knbm/bmwi/podrek/dna_bia/dna_bia1.html
http://pl.wikipedia.org/wiki/Kwas_nukleinowy
http://www.sciaga.pl/tekst/25653-26-kwasy_nukleinowe_budowa_i_znaczenie
http://www.mlyniec.gda.pl/~chemia/organiczna/biochemia.htm
http://www.chem.uw.edu.pl/people/SFilipek/monograf/4/monog4.htm
http://chemia.organiczna.webpark.pl/nukleo/nukleo.htm
Informacja o budowie białek oraz
instrukcja o ich syntezie (jakie
białko, kiedy, gdzie) jest
przechowywana i uruchomiana w
cząsteczkach dużych związków, nie
przypominających budową białek.
Związki te nazywają się kwasami
nukleinowymi (nukleus – jądro),
występującymi głównie w jądrach
komórek. Związki te również są
długimi polimerami składającymi
się z zaledwie 4 monomerów
(jednostek).
Informacja o budowie białek (i całego
organizmu) jest przechowywana w
cząsteczce kwasu
deoksyrybonukleinowego
(
DNA
), który
jest instrukcją (zapisem) o całym
organizmie.
Instukcja syntezy białek jest zapisana
w cząsteczkach kwasu
rybonukleinowego
(
RNA
).
Gdy w organizmie potrzebne jest dane
białko (do wzrostu organizmu) to
wtedy jest syntezowany RNA na
podstawie instrukcji zapisanej w DNA.
Proces ten nazywa się
transkrypcją
Nośnikiem informacji genetycznej są
zasady nukleinowe zawarte w
cząsteczkach DNA (kwasu
dezoksyrybonukleinowego,
D
eoxyribo
N
ucleic
A
cid). Reszty 2’-
deoksyrybozy i reszty fosforanowe
pełnią rolę strukturalną. DNA składa
się z dwóch helikalnych nici
polimeru, nawiniętych na siebie.
Rzuty przestrzenne tych polimerów
są przedstawione na następnych
przezroczach.
N
N
N
N
NH
2
N
N
N
N
O
NH
2
H
N
N
O
O
C
H
3
H
N
N
O
NH
2
ZASADY PURYNOWE
ZASADY PIRYMIDYNOWE
ADENINA A
GUANINA G
TYMINA T
CYTOZYNA C
N
N
N
N
NH
2
O
OH
OH
H
H
H
H
HO
NH
N
N
O
NH
2
N
O
OH
OH
H
H
H
H
HO
O
OH
OH
H
H
H
H
HO
N
N
NH
2
O
O
OH
OH
H
H
H
H
HO
HN
N
O
O
ADENOZYNA Ado
GUANOZYNA Guo
CYTYDYNA Cyd
URYDYNA Urd
NUKLEOZYDY –
NUKLEOZYDY –
połączenia zasad
połączenia zasad
z cukrem:
z cukrem:
Tutaj –
Tutaj –
nukleozydy
nukleozydy
występujące w
występujące w
RNA; cukrem jest
RNA; cukrem jest
ryboza.
ryboza.
W DNA jej
W DNA jej
miejsce zajmuje
miejsce zajmuje
deoksyryboza, a
deoksyryboza, a
zamiast urydyny
zamiast urydyny
występuje
występuje
tymidyna
tymidyna
N
N
N
N
NH
2
O
OH
OH
H
H
H
H
O
P
-O
O-
O
ADENOZYNOMONOFOSFORAN (AMP)
N
N
N
N
NH
2
O
OH
OH
H
H
H
H
O
P
O
O-
O
ADENOZYNODIFOSFORAN (ADP)
P
O
O
O
-
-
N
N
N
N
NH
2
O
OH
OH
H
H
H
H
O
P
O
O-
O
ADENOZYNOTRIFOSFORAN (ATP)
P
O
O
O
P
O
O
O
-
-
-
N
N
N
N
NH
2
O
H
OH
H
H
H
H
O
P
-O
O-
O
2'deoksyADENOZYNOMONOFOSFORAN
(AMP)
NUKLEOTYDY i DEOKSYNUKLEOTYDY
(na przykładzie nukleotydów adeninowych)
O
OH
H
H
H
H
N
N
NH
2
O
O
P
O
O
O
O-
N
N
N
N
NH
2
O
OH
O
H
H
H
H
P
O
O
O-
O
OH
H
H
H
H
HN
N
O
O
O
P
O
O
O-
O
P
O
O
O-
O
Fragment łańcucha
Fragment łańcucha
cząsteczki RNA –
cząsteczki RNA –
pojedyncza nić.
pojedyncza nić.
Łańcuch główny
Łańcuch główny
stanowią: grupa
stanowią: grupa
fosforanowa i dwa
fosforanowa i dwa
atomy węgla rybozy.
atomy węgla rybozy.
Zasady nukleinowe:
Zasady nukleinowe:
adenina, guanina,
adenina, guanina,
cytozyna i uracyl.
cytozyna i uracyl.
O
H
H
H
H
H
O
P
O
O
O
O-
N
N
N
N
NH
2
O
H
O
H
H
H
H
P
O
O
O-
O
H
H
H
H
H
HN
N
O
O
O
P
O
O
O-
O
P
O
O
O-
O
A
NH
N
N
N
O
NH
2
G
C
Fragment łańcucha
Fragment łańcucha
cząsteczki DNA –
cząsteczki DNA –
pojedyncza nić – jedna z
pojedyncza nić – jedna z
dwóch nici
dwóch nici
(przeciwbieżnych),
(przeciwbieżnych),
nawiniętych na siebie.
nawiniętych na siebie.
Łańcuch główny
Łańcuch główny
stanowią: grupa
stanowią: grupa
fosforanowa i dwa atomy
fosforanowa i dwa atomy
węgla deoksyrybozy.
węgla deoksyrybozy.
Zasady nukleinowe:
Zasady nukleinowe:
adenina, guanina,
adenina, guanina,
cytozyna i tymina.
cytozyna i tymina.
Dwie nici DNA są połączone wiązaniami wodorowymi
Dwie nici DNA są połączone wiązaniami wodorowymi
pomiędzy zasadami tych dwóch przeciwbieżnych
pomiędzy zasadami tych dwóch przeciwbieżnych
nici. Dobre
nici. Dobre
dopasowanie strukturalne zachodzi pomiędzy adeniną i
dopasowanie strukturalne zachodzi pomiędzy adeniną i
tyminą oraz
tyminą oraz
pomiędzy guaniną i cytozyną. Na rysunku poniżej
pomiędzy guaniną i cytozyną. Na rysunku poniżej
zaznaczone są wiązania wodorowe pomiędzy tymi
zaznaczone są wiązania wodorowe pomiędzy tymi
zasadami. Łańcuszkiem zaznaczono łańcuchy główne dwóch
zasadami. Łańcuszkiem zaznaczono łańcuchy główne dwóch
nici.
nici.
N
N
N
N
NH
2
HN
N
O
O
NH
N
N
N
O
NH
2
N
N
H
2
N
O
G C
A T
Para
Para
Dwie nici DNA mają określoną kolejność
Dwie nici DNA mają określoną kolejność
(sekwencję) zasad.
(sekwencję) zasad.
Sekwencje te są w dwóch niciach
Sekwencje te są w dwóch niciach
KOMPLEMENTARNE, tzn. tam, gdzie w
KOMPLEMENTARNE, tzn. tam, gdzie w
jednej nici jest A, tam w drugiej jest T, a
jednej nici jest A, tam w drugiej jest T, a
tam, gdzie w jednej nici jest G, to w
tam, gdzie w jednej nici jest G, to w
drugiej jest C i na odwrót.
drugiej jest C i na odwrót.
Przykład sekwencji dwóch nici DNA:
Przykład sekwencji dwóch nici DNA:
ATGGCCATCGTAAATTGCGGATTACGGC
TACCGGTAGCATTTAACGCCTAATGCCG
Przekazanie informacji o strukturze białka od instrukcji
Przekazanie informacji o strukturze białka od instrukcji
(DNA) do syntezowanego białka jest procesem
(DNA) do syntezowanego białka jest procesem
dwuetapowym.
dwuetapowym.
W pierwszym etapie na DNA jest syntezowany RNA.
W pierwszym etapie na DNA jest syntezowany RNA.
Proces ten nazywa się
Proces ten nazywa się
transkrypcją
transkrypcją
. Ten RNA nazywa się
. Ten RNA nazywa się
messengerRNA
messengerRNA
( w skrócie mRNA) – w polskim języku
( w skrócie mRNA) – w polskim języku
przyjęto termin informacyjny RNA (ale skrót jest ten sam
przyjęto termin informacyjny RNA (ale skrót jest ten sam
– mRNA).
– mRNA).
Następnie na tej makrocząsteczce, której struktura jest
Następnie na tej makrocząsteczce, której struktura jest
odwzorowaniem sekwencji w DNA, na którym została
odwzorowaniem sekwencji w DNA, na którym została
zsyntezowana, odbywa się synteza białka, której
zsyntezowana, odbywa się synteza białka, której
struktura jest zakodowana w tym mRNA.
struktura jest zakodowana w tym mRNA.
Ten proces nosi nazwę
Ten proces nosi nazwę
translacji
translacji
.
.
PRZEPŁYW INFORMACJI
PRZEPŁYW INFORMACJI
GENETYCZNEJ
GENETYCZNEJ
DNA
transkrypcja
RNA
translacja
białko
Wykład
7
3. Kwasy nukleinowe - budowa i
funkcje
3.3. Kod genetyczny
http://www.republika.pl/biochemia2004/kwasy-nukleinowe.htm
http://zguw.ibb.waw.pl/~knbm/bmwi/podrek/dna_bia/dna_bia1.html
http://pl.wikipedia.org/wiki/Kwas_nukleinowy
http://www.sciaga.pl/tekst/25653-26-kwasy_nukleinowe_budowa_i_znaczenie
http://www.mlyniec.gda.pl/~chemia/organiczna/biochemia.htm
http://www.chem.uw.edu.pl/people/SFilipek/monograf/4/monog4.htm
http://chemia.organiczna.webpark.pl/nukleo/nukleo.htm
Dwie nici DNA mają określoną kolejność
Dwie nici DNA mają określoną kolejność
(sekwencję) zasad.
(sekwencję) zasad.
Sekwencje te są w dwóch niciach
Sekwencje te są w dwóch niciach
KOMPLEMENTARNE, tzn. tam, gdzie w jednej nici
KOMPLEMENTARNE, tzn. tam, gdzie w jednej nici
jest A, tam w drugiej jest T, a tam, gdzie w jednej
jest A, tam w drugiej jest T, a tam, gdzie w jednej
nici jest G, to w drugiej jest C i na odwrót.
nici jest G, to w drugiej jest C i na odwrót.
Przykład sekwencji dwóch nici DNA:
Przykład sekwencji dwóch nici DNA:
ATGGCCATCGTAAATTGCGGATTACGGC
TACCGGTAGCATTTAACGCCTAATGCCG
Ten kod jest kodem trójkowym, tzn w trzech
kolejnych znaczkach zapisana jest informacja o
tym, jaki aminokwas białka ma być w danym
miejscu sekwencji polipeptydu. Ta trójka nazywa
się kodonem. Każdy aminokwas ma swój kodon.
T
C
C
G
A
A
G
T
C
C
A
G
G
C
T
T
C
A
G
G
Fragment DNA
Transkrypcja
Fragment mRNA
po replikacji nici+ DNA
(+)
(-)
U
C
C
G
A
A
G
U
C
C
Translacja
Fragment polipeptydu zbudowanego
na podstawie instrukcji przechowywanej
w DNA, skopiowanej jako mRNA i odczytanej
przez zespoly enzymow
kodon UCC
kodon GAA
kodon GUC
Ser
Glu
Val
3.4.
Replikacja
Gdy z jednej komórki powstaje następna
Gdy z jednej komórki powstaje następna
– przez podział, wówczas w jądrze nowej
– przez podział, wówczas w jądrze nowej
komórki jest DNA z komórki
komórki jest DNA z komórki
macierzystej.
macierzystej.
Jest on taki sam, jak w komórce
Jest on taki sam, jak w komórce
macierzystej, bo powstaje przez
macierzystej, bo powstaje przez
rozszczepienie DNA na dwie nici i
rozszczepienie DNA na dwie nici i
„dobudowanie” drugiej,
„dobudowanie” drugiej,
komplementarnej nici.
komplementarnej nici.
Proces ten nazywa się replikacją.
Proces ten nazywa się replikacją.
Chemicznie jest dość skomplikowany, ale
Chemicznie jest dość skomplikowany, ale
efektem jest powstanie wiernej kopii.
efektem jest powstanie wiernej kopii.
http://www.johnkyrk.com/DNAreplication.html
http://mpancz.webpark.pl/biomolreplikacja.php
http://library.thinkquest.org/C005044/polski/m2-3.html
Do powstania kopii DNA potrzebne są:
• Nukleotydy, ściślej 2’-deoksynukleotydy:
dATP, dTTP, dGTP, dCTP,
• Enzym Polimeraza DNA (białko
katalityczne)
• Jony Mg(II) i Ca(II)
• Oryginalna cząsteczka DNA, która działa
w tym procesie jak matryca, na której
syntezowane są dwie następne nici DNA.
3.5.
Transkrypcja
Cząsteczka DNA jest bardzo długa –
Cząsteczka DNA jest bardzo długa –
zawiera pełną informację o strukturze
zawiera pełną informację o strukturze
białek. Kawałek DNA, przechowujący
białek. Kawałek DNA, przechowujący
informację o strukturze białka nazywa
informację o strukturze białka nazywa
się genem. Ten gen może ulec
się genem. Ten gen może ulec
„przeczytaniu” a jego sekwencja jest
„przeczytaniu” a jego sekwencja jest
„przetworzona” w nową
„przetworzona” w nową
makrocząsteczkę – informacyjny RNA –
makrocząsteczkę – informacyjny RNA –
mRNA. Ten proces nazywa się
mRNA. Ten proces nazywa się
transkrypcją.
transkrypcją.
http://www.wiw.pl/Biologia/genetyka/JezykGenow/Esej.asp?base=r&cp=1&ce=12
http://zguw.ibb.waw.pl/~knbm/bmwi/podrek/gen_eu/gen_eu4.html
Do powstania mRNA potrzebne są:
• Nukleotydy:
ATP, UTP, GTP, CTP,
• Enzym Polimeraza RNA (białko
katalityczne)
• Jony Mg(II) i Ca(II)
• Oryginalna cząsteczka DNA, która
działa w tym procesie jak matryca,
na której syntezowane jest mRNA.
T
C
C
G
A
A
G
T
C
C
A
G
G
C
T
T
C
A
G
G
Fragment DNA
Transkrypcja
Fragment mRNA
po replikacji nici+ DNA
(+)
(-)
U
C
C
G
A
A
G
U
C
C
Translacja
Fragment polipeptydu zbudowanego
na podstawie instrukcji przechowywanej
w DNA, skopiowanej jako mRNA i odczytanej
przez zespoly enzymow
kodon UCC
kodon GAA
kodon GUC
Ser
Glu
Val
3.6. Translacja
Cząsteczka mRNA jest polinukleotydem –
Cząsteczka mRNA jest polinukleotydem –
kwasem nukleinowym. Ten kwas
kwasem nukleinowym. Ten kwas
nukleinowy jest na tyle długi, że zawiera
nukleinowy jest na tyle długi, że zawiera
pełną informację o strukturze
pełną informację o strukturze
pojedynczego białka. Jest to matryca
pojedynczego białka. Jest to matryca
(informacja), na której sekwencja
(informacja), na której sekwencja
polinukleotydowa jest „przetworzona” w
polinukleotydowa jest „przetworzona” w
nową makrocząsteczkę – białko. Ten
nową makrocząsteczkę – białko. Ten
proces nazywa się translacją.
proces nazywa się translacją.
http://www.wiw.pl/biologia/genetyka/JezykGenow/Esej.asp?base=r&cp=1&ce=14
http://www.wiw.pl/biologia/Genetyka/Slownik/Haslo.asp?haslo_id=124
http://www.ids.edu.pl/wwwbio/genetyka/mm_32.html
W procesie translacji syntezowany
jest łańcuch białka.
Bierze w nim udział:
• informacyjny RNA (mRNA) –
stanowi on matrycę, na
której syntezowany jest łańcuch
• aminokwasy (wszystkie 20)
przywiązane każdy do swojego
nośnika, którym jest cząsteczka
tRNA – transportującego RNA
• zespół enzymów, katalizujących
reakcję tworzenia wiązania
peptydowego
aminokwas
trzy zasady
stanowi antykodon -
komplementarny do kodonu
tRNA
Transferowe (transportujące) RNA to są małe
Transferowe (transportujące) RNA to są małe
polinukleotydy składające się z pojedynczej nici, tworzącej
polinukleotydy składające się z pojedynczej nici, tworzącej
kształt trójlistnej koniczynki. W głównej pętli znajdują się
kształt trójlistnej koniczynki. W głównej pętli znajdują się
trzy zasady stanowiące
trzy zasady stanowiące
antykodon
antykodon
, których sekwencja jest
, których sekwencja jest
komplementarna do trójki zasad w kodonie. Ten kodon
komplementarna do trójki zasad w kodonie. Ten kodon
koduje rodzaj aminokwasu, który ma być przyczepiony do
koduje rodzaj aminokwasu, który ma być przyczepiony do
rosnącego łańcucha polipeptydu. Do tRNA z tym
rosnącego łańcucha polipeptydu. Do tRNA z tym
antykodonem związany jest aminokwas, który ma być
antykodonem związany jest aminokwas, który ma być
wbudowany.
wbudowany.
Każdy aminokwas ma swój
Każdy aminokwas ma swój
t
t
RNA. Tak więc istnieje 20
RNA. Tak więc istnieje 20
różnych cząsteczek tRNA – tyle, ile jest aminokwasów
różnych cząsteczek tRNA – tyle, ile jest aminokwasów
Proces, w którym sekwencja kodonów mRNA jest
tłumaczona na sekwencję aminokwasów w łańcuchu
polipeptydowym, jest skomplikowany i składa się z bardzo
wielu powtarzających się kroków. Przeprowadzają go
struktury cytoplazmatyczne widoczne pod mikroskopem
elektronowym jako drobne obiekty. Są to rybosomy, a
każdy z nich składa się z ponad pięćdziesięciu różnych
białek i trzech lub czterech różnych rodzajów cząsteczek
rRNA. Rybosomy wraz z tRNA tworzą maszynerię, która
zamienia sekwencje nukleotydów mRNA na sekwencje
aminokwasowe białek. Potrzeba do tego także
różnorodnych enzymów i innych białek.
Zauważmy, że w mRNA mogą wystąpić trzy różne
serie trójek nukleotydowych, tak zwane ramki odczytu, w
zależności od tego, który triplet zostanie wybrany jako
pierwszy kodon. W tym przykładzie, tak jak w większości
przypadków, dwie ramki (oznaczone jako B i C) są
przerwane kodonami stop i nie mogą ulegać translacji.
Tylko ramka A jest „otwarta” od początku do końca.
W jaki sposób wybierana jest właściwa
ramka? Najpierw rybosom i specjalny
tRNA niosący cząsteczkę metioniny,
którego antykodon może
komplementarnie łączyć się z AUG,
przyłącza się do mRNA w początkowej
pozycji AUG. Są dwa tRNA, które mogą
łączyć się z AUG: jeden rozpoczyna
wszystkie łańcuchy białkowe od
metioniny, drugi zaś służy do
wprowadzania metioniny w odpowiedzi
na kodony AUG pojawiające się wewnątrz
ramki, podczas gdy mRNA ulega
translacji.
Ten specjalny, inicjatorowy tRNA, niosąc
cząsteczkę metioniny, przyłącza się razem z
rybosomem do kodonu AUG w miejscu startu
translacji. Następny aminokwas łańcucha
polipeptydowego jest dostarczany do
miejsca translacyjnego rybosomu przez
tRNA, którego antykodon pasuje do drugiego
kodonu mRNA. Pierwsze wiązanie peptydowe
powstaje zatem między metioniną a
następnym w kolejności aminokwasem:
rozpoczyna się synteza łańcucha
polipeptydowego. Podczas tłumaczenia
każdego kodonu do wydłużającego się
łańcucha polipeptydowego dodawany jest
jeden aminokwas. Proces ten powtarza się
aż do momentu, gdy wszystkie kodony
sekwencji kodującej ulegają translacji.
Gotowy łańcuch polipeptydowy uwalniany
jest z chwilą, gdy aparat translacyjny dotrze
do sygnału końca translacji, czyli do jednego
z trzech kodonów stop (UAA, UAG lub UGA).
Są dwie ważne reguły dotyczące kierunku
translacji: po pierwsze translacja postępuje
od 5' do 3' końca mRNA, po drugie białko
rośnie od końca aminowego do
karboksylowego. Warto pamiętać, że
kierunek ważny jest również przy czytaniu
zdań. W różnych językach tekst pisze się w
różnych kierunkach. Genetycy przyjęli
konwencję zgodną z językami europejskimi.
Początek „zdania” – 5' koniec mRNA i
aminowy koniec polipeptydu – zapisuje się z
lewej strony. Zakończenie – 3' koniec mRNA i
karboksylowy koniec polipeptydu – są wtedy
z prawej strony. Zatem zgodnie z taką
konwencją, mRNA jest czytany od lewej ku
prawej.