Czynniki warunkujące
toksyczność
substancji chemicznych
Działanie toksyczne
substancji chemicznych na
organizm żywy, uzależniony
jest od
właściwości
fizykochemicznych
substancji
oraz
czynników biologicznych
uzależnionych od czynników
(determinant) ustrojowych.
CZYNNIKI WPŁYWAJĄCE
NA TOKSYCZNOŚĆ
• właściwości fizykochemiczne
• budowa chemiczna związku
• czynniki biologiczne
• czynniki genetyczne
• czynniki osobnicze, choroby
• czynniki środowiskowe
WŁAŚCIWOŚCI
FIZYKOCHEMICZNE
• ROZPUSZCZALNOŚĆ
Zjawisko rozpuszczalności określa się
wartością
współczynnika podziału „ R”.
Przez
współczynnik podziału „R”
rozumie się
iloraz stężeń substancji w dwu nie
mieszających się fazach w chwili ustalenia się
stanu równowagi stężeń w badanych fazach.
Ze względu na procesy zachodzące w
żywym organizmie najczęściej wyznacza się
następujące współczynniki podziału „R”:
- olej (oktanol) : woda
Wraz ze wzrostem współczynnika podziału,
wzrasta np.; farmakodynamiczne i
toksyczne działanie środków odurzających
(etanolu, glikolu etylenowego,
barbituranów) co łączy się ze zdolnością
przechodzenia tych związków przez barierę
lipidową neuronów i kumulacją ich w mózgu
i tkance tłuszczowej.
Współczynniki podziału olej :
woda
Substancja organiczna Współczynnik
podziału „R”
- Alkohol etylowy 0,03 -
0,108
- fenol 0,4
- anilina 0,6
- chloroform 75
- benzen 120
-trichloroetylen 409
- ksylen 6000
woda : powietrze
Im większa wartość, tym
substancja
łatwiej przechodzi z
pęcherzyków płuc
do krwi.
- olej (oktanol) : powietrze
Im większa wartość, tym
substancja
łatwiej przenika przez wszystkie
warstwy skóry.
Dysocjacja
Podstawy teorii dysocjacji elektrolitycznej
opracował Arrchenius pod koniec XIX wieku.
Polega ona na tym, że kwasy, zasady i sole po
rozpuszczeniu w wodzie ulegają dysocjacji z
wytworzeniem jonów dodatnich i ujemnych np:
CH
3
COOH → H
+
+
CH
3
COO
-
Związki, które po rozpuszczeniu w wodzie nie
wykazują przewodności elektrycznej noszą nazwę
nieelektrolitów
(większość substancji
organicznych).
Większość jednak substancji chemicznych po
rozpuszczeniu w wodzie zwiększają przewodność
elektryczną, a tym samym zwiększają swoją
aktywność biologiczną i noszą nazwę
elektrolitów
.
Elektrolity w roztworze mogą być
całkowicie lub częściowo
zdysocjowane, a stała dysocjacji
wyraża stosunek liczby cząsteczek
niezdysocjowanych do ogólnej liczby
cząstek.
Substancje niezdysocjowane
(pozbawione ładunku) łatwiej
przenikają barierę błon komókowych.
Temperatura wrzenia i
parowania
Temperatura wrzenia i parowania jest
charakterystyczna dla każdego związku
chemicznego.
Niska temperatura wrzenia, a zatem duża prężność
par jest istotnym czynnikiem fizykochemicznym
przyspieszającym zatrucia, zwłaszcza truciznami
przemysłowymi.
benzen > toluen > ksylen
Benzen jest ok. 2 – krotnie bardziej lotny niż toluen
i
ok. 4,5 – krotnie od ksylenu i etylobenzenu.
Wartości DL
50
homologów benzenu są zbliżone,
jednak ryzyko zatrucia benzenem jest największe
właśnie z uwagi na najniższą temperaturę wrzenia
tego związku.
Wielkość cząsteczek
(rozdrobnienie)
Stan rozdrobnienia w istotny sposób
wpływa na wchłanianie ksenobiotyków, a
szczególnie przy wchłanianiu przez płuca:
-
aerozoli
(
mgły i dymy
),
-
pyłów
.
Pary i gazy
mają cząstki o wielkości 1µm i
dlatego praktycznie zawsze są wchłaniane w
oskrzelikach płucnych.
Istnieje ścisła zależność między wielkością
cząsteczki trucizny, a jej działaniem toksycznym,
co wiąże się z ich bezpośrednim wchłanianiem w
oskrzelikach płucnych do krwi. Zjawisko to ma
szczególne znaczenie w przypadku narażenia na
tlenki metali, które mają zróżnicowany stopień
rozdrobnienia.
Budowa chemiczna
• Toksyczne działanie substancji chemicznych
wynikających z ich właściwości chemicznych,
odznacza się znacznie większą swoistością
niż ma to miejsce w przypadku ich
właściwości fizycznych.
• Działanie takie może być zahamowane lub
zintensyfikowane już po nieznacznych
zmianach w budowie. Można tu mówić o
powinowactwie substancji chemicznej do
wiązania ( nie tylko kowalencyjnego) ze
swoistym receptorem.
Wprowadzenie następnie do koncepcji
receptorowej pojęcia enzymu rozszerzyło tę
interpretację o reakcję enzymu z substratem,
koenzymem (agonistą) i inhibitorem
( antagonistą).
Substancje o budowie zbliżonej do substratu
mogą hamować aktywność enzymów, tworząc
ważny pomost od farmakologii do toksykologii,
wyjaśniając zależność budowy analogów
substratów do ich aktywności biologicznej.
Przykładem tego spostrzeżenia jest działanie
przeciwbakteryjne
sulfonamidu
i znoszenie tego
działania przez kwas
p-aminobenzoesowy
( strukturalne podobieństwo) w stosunku do
enzymu-
syntetazy dihydrofolianowej
- enzymu
katalizującego wbudowywanie kwasu
p-aminobenzoesowego
do
kwasu foliowego
.
Biorąc pod uwagę budowę chemiczną
związków, można dopatrzyć się wiele
cech, które zdecydowanie wpływają
na ich toksyczność.
Toksyczność węglowodorów
alifatycznych rośnie wraz ze
wzrostem liczby atomów węgla w
łańcuchu oraz jego rozgałęzienie.
Poza tym węglowodory nienasycone
są bardziej toksyczne od ich
odpowiedników nasyconych.
OBECNOŚĆ WIĄZANIA NIENASYCONEGO
w
cząsteczce związku alifatycznego jak i
cyklicznego nie tylko wpływa na zwiększenie
reaktywności chemicznej i hydrofilności
związku, lecz przede wszystkim zwiększa
toksyczność związku, gdyż charakteryzują się
one dużym potencjałem oksydacyjnym, np.:
Związki alifatyczne
• CH
3
- CH
3
- ETAN
• CH
2
= CH
2
- ETYLEN
• CH ≡ CH - ACETYLEN
Nienasycone związki
cykliczne
wykazują większą toksyczność
niż nasycone
BENZEN
>
CYKLOHEKSAN
Wiązania nienasycone
, ułatwiają
wchłanianie związku przez płuca oraz
zwiększają jego działanie narkotyczne,
jak to ma miejsce w zatruciu
acetylenem
i
benzenem
.
Długość łańcucha i jego
rozgałęzienie
Wzrost węgli w łańcuchu związków
alifatycznych oraz rozbudowanie jego
rozgałęzień, zwiększa toksyczność tych
związków dla człowieka i innych saków.
Wydłużenie łańcucha w grupie
aminokwasów , zwiększa ich
rozpuszczalność, a tym samym zwiększa
ich dostępność biologiczną np.:
Kwas α - aminopropionowy (CH
3
- CH(NH
2
) - COOH
jest
gorzej
rozpuszczalny niż
Kwas α –aminomasłowy (CH
3
- CH
2
- CH(NH
2
)- COOH
alkohol n-amylowy I rzedowy
(pentanol 1)
CH
3
CH
2
CH
2
CH
2
CH
2
OH
alkohol n-amylowy II rzedowy
(pentanol 2)
CH
3
CH
2
CH
2
CH
OH
CH
3
alkohol izo-amylowy III rzedowy
CH
3
CH
2
CH
3
CH
3
OH
alkohol izo-butylowy III rzedowy
CH
3
CH
3
OH
CH
3
IZOMERIA
STRUKTURALNA
orto < meta < para
o - ksylen < m – ksylen < p
– ksylen
CH
3
CH
3
CH
3
CH
3
CH
3
CH
3
IZOMERIA OPTYCZNA
izomery lewoskrętne (L) są zwykle bardziej
toksyczne niż prawoskrętne (D)
L – epinefryna > D – epinefryna
L – nikotyna > D – nikotyna
40x
L – amfetamina > D – amfetamina
15 x na serce
L – hyoscjamina > D – hyoscjamina
18x
Ale:
L – amfetamina < D – amfetamina
3 - 4 x OUN
• Lewoskrętne izomery optyczne
związków są bardziej toksyczne dla
człowieka i ssaków niż prawoskrętne
co jest wykorzystywane do syntezy
leków.
• Prawidłowość ta związana jest z
tym, że aminokwasy i białka u
człowieka są
lewoskrętne
w
przeciwieństwie do bakterii u
których aminokwasy i białka są
prawoskrętne
i dlatego antybiotyki
D-izomery
wykazują u nich większą
aktywność.
Podstawniki:
Grupa hydroksylowa (-OH) w
związkach alifatycznych
CH
3
CH
3
CH
3
CH
2
OH
CH
2
CH
2
OH
C
H
3
CH
CH
2
OH
C
H
3
OH
CH
CH
2
OH
CH
2
OH
OH
etan
alkohol etylowy
alkohol propylowy
glikol propylowy
glicerol
Grupa hydroksylowa (-OH)
w związkach aromatycznym
BENZEN
< toksyczny 2X<
OH
OH
OH
<
HYDROCHINON
FENOL
Grupa karboksylowa
(COOH)
- Wpływa przede wszystkim na
zmianę właściwości
fizykochemiczne
związku.
- Zmniejsza jej toksyczność
przez
zwiększenie rozpuszczalności,
a tym
samym łatwiejsze wydalanie
przez
nerki np.:
C
6
H
5
– OH HO- C
6
H
4
–
COOH
(fenol) (kwas salicylowy)
Grupa sulhydrylowa
(tiolowa,-SH
)
-
Wyraźnie zmniejsza toksyczność
związków.
- Wykazuje dużą reaktywność, tworząc
odwracalne układy utleniająco-
redukujące,
np.:
cysteina – cystyna w glutationie.
Podstawniki:
- CH
3
CO-
(acetylowy),
-
-N=N-
(diazowy),
-
CH
3
O-
(metoksylowy),
-
C
2
H
5
O-
(etoksylowy).
-
Wprowadzone do związku osłabiają
działanie
toksyczne.
- Te podstawniki często wykorzystywane są do
produkcji mało toksycznych cytostatyków.
Grupa metylowa
(CH
3
-)
Zwiększa toksyczność zarówno związków
alifatycznych jak i aromatycznych.
CH
3
CH
3
CH
3
<
<
benzen
toluen
ksylen
Inne grupy:
-
H
2
N-
(aminowa),
-
-NO
2
(nitrowa),
-
-NO
(nitrozowa)
- Wprowadzone do związków alifatycznych
i aromatycznych zwiększa ich
toksyczność.
- Nadają związkom właściwości
methemoglobinotwórcze.
- Aminy alifatyczne w czasie
biotransformacji uwalniają amoniak
(NH
3
), który jest dodatkowym źródłem
zagrożenia dla organizmu.
Grupa cyjanowa (nitrylowa,
-
CN
):
• należy do wyjątkowo toksycznych
podstawników,
• związki posiadające tę grupę w
cząsteczce są bardzo toksyczne,
• jest bardzo aktywna chemicznie i
łatwo wchodzi w reakcje z ważnymi
dla życia układami oddechowymi
blokując ich działanie ( cytochromy,
hemoglobina),
• łączy się z grupami –SH
aminokwasów, blokując zależne od
nich procesy enzymatyczne,
• toksyczność związków zależy od siły
wiązania tej grupy,
Fluorowce:
• w związkach alifatycznych i aromatycznych
zwiększają ich toksyczność,
• toksyczność wzrasta wraz ze wzrostem liczby
podstawionych atomów wodoru.
Kwas octowy -
CH
3
COOH
Kwas trichlorootowy -
CCL
3
COOH
(trucizna
protoplazmatyczna,
Kwas fluorooctowy -
CH
2
FCOOH
(trucizna metaboliczna),
Benzen (
C
6
H
6
) < 2x chlorobenzen (
C
6
H
5
CL
),
Cykloheksan (
C
6
H
12
) < heksachlorocykloheksan (
C
6
H
6
CL
6
)
Chloroform (
CHCL3
) < 7x Jodoform (
CHJ3
)
PODSTAWNIKI ZMNIEJSZAJĄCE
TOKSYCZNOŚĆ SUBSTANCJI
CHEMICZNYCH
- OH
( w związkach alifatycznych),
- COOH
( karboksylowa ),
- SH
( sulfhydrylowa ),
- CH
3
O
( metoksylowa ),
- CH
3
CO
( acetylowy ),
- C
2
H
5
O
( etoksylowa ),
− N = N −
( diazowy ).
PODSTAWNIKI ZWIĘKSZAJĄCE
TOKSYCZNOŚĆ SUBSTANCJI
CHEMICZNYCH:
− OH
(w związkach aromatycznych),
− CH
3
( metylowy ),
− NH
2
( aminowy ),
− NO
2
( nitrowy
– działanie utleniające
),
− NO
( nitrozowy
– działanie utleniające
),
− CN
( nitrylowy lub cyjanowy ),
− F, − Cl, − Br, − J
( chlorowce).
CZYNNIKI BIOLOGICZNE
• WRAŻLIWOŚĆ GATUNKOWA , RASOWA I OSOBNICZA
• WIEK I PŁEĆ
• BUDOWA CIAŁA
• CHOROBY
• ALERGIA I IDIOSYNKRAZJA
• HORMONY
• MECHANIZM GENETYCZNY
• WYSIŁEK FIZYCZNY
• DIETA
• CZYNNIKI ŚRODOWISKOWE
Różnice gatunkowe, rasowe i
osobnicze:
- króliki są mniej wrażliwe niż koty,
- człowiek jest bardziej wrażliwy niż koty
na
morfinę
,
- u chińczyków i ludzi rasy białej morfina
wywołuje wizje i stan przygnębienia, a u
japończyków i malajów atak szału,
- kozy zjadają
Zimowit Jesienny
, który jest
trujący dla człowieka,
- populacja ludzka jest genetycznie
heterogenna, co powoduje, że ten sam
związek podany różnym osobnikom
inaczej na nich działa.
Płeć i wiek
- Szybkość biotransformacji substancji obcych w
organizmie zależy od płci.
- Różnice te ujawniają się w okresie dojrzewania i
utrzymują się przez cały okres dojrzałego człowieka
i pozostałych ssaków.
- Kobiety są bardziej wrażliwe od mężczyzn.
- Biotransformacja ksenobiotyków u dojrzałych
samców jest większa niż u samic, szczególnie jeśli
chodzi o substancje , które ulegają biotransformacji
przy udziale enzymów zależnych od cytochromu P
450
.
- Kobiety są bardziej wrażliwe na leki psychotropowe,
środki nasenne oraz pestycydy niż mężczyźni.
- Dzieci i osoby w wieku podeszłym są bardziej
wrażliwi od osób w wieku produktywnym.
Budowa ciała
Osoby o budowie astenicznej, niedożywione,
wyczerpane fizycznie są bardziej podatni na
zatrucia.
Alergia i idiosynkrazja (nadwrażliwość)
Są przyczyną zwiększonego ryzyka na działanie
leków i substancji chemicznych w porównaniu
osobnikami zdrowymi.
Ciąża
W czasie ciąży wiele enzymów zmniejsza swoją
aktywność jak:
oksydaza aminowa,
metylotransfersza katecholowa
. Sprzęganie
metabolitów z
kwasem glukuronowym
jest
obniżone. Stężenie
cytochromu P450
zmniejsza się
do 25 %.
Choroby wątroby i nerek
• Wątroba
jest głównym narządem, gdzie
zachodzi biotransformacja ksenobiotyków i
dlatego jej choroby lub uszkodzenia bardzo
istotnie wpływają na procesy biotransformacji.
• Choroby nerek
lub ich
uszkodzenie
wpływają
na proces wydalania. Chorzy z ograniczoną
czynnością nerek znacznie wolniej wydalają
ksenobiotyki lub ich metabolity z moczem.
Choroby serca
Choroby serca
mogą pośrednio ograniczyć
biotransformację ksenobiotyków w wątrobie
lub ich wydalanie z organizmu z powodu
obniżonego przepływu krwi przez te narządy.
Hormony
Hormony stanowią nadrzędne piętro
regulacji przemian fizjologicznych przez
bezpośredni lub pośredni wpływ na układy
enzymatyczne. Dotyczy to przede wszystkim
wpływu na biotransformację ksenobiotyków
na drodze aktywacji lub hamowania
enzymów biorących udział w
utlenianiu,
redukcji, hydrolizy i w procesie sprzęgania
metabolitów z
substancjami endogennymi
.
Zarówno nadmiar jak niedobór mogą w
sposób zasadniczy zmienić biotransformację
ksenobiotyków.
Dieta
• Dla prawidłowego funkcjonowania organizm
potrzebne jest dostarczenie odpowiedniej
ilości materiału energetycznego w formie:
tłuszczy
( 30 %),
białek
(10-15 %, śr. 12 %) ora
węglowodanów
( 50-65 %, śr. 58 %).
• W czasie głodzenia występuje kwasica
organizmu oraz zwiększone wytwarzanie
związków ketonowych (zaburzenie aktywności
enzymów).
• Dieta ubogo białkowa lub bez białkowa
wpływa na zmniejszenie poziomu cytochromu
P450, dehydrogenazy NADPH i reduktazy
NADPH -cytochrom P450
Mechanizm genetyczny
Podstawowymi jednostkami dziedziczenia są geny i
wraz z nimi są dziedziczone pewne zachowania
organizmu.
Mutacja kodu genetycznego odpowiedzialnego za
syntezę określonego systemu enzymatycznego może
ujawnić się w dwóch postaciach:
- zmniejszonego wytwarzania enzymów (przeżycie),
- całkowitym brakiem enzymu lub syntezą enzymu
nieaktywnego (doprowadza to do szybkiej śmierci).
Wysiłek fizyczny
Zwiększa częstość oddechu. Zwiększenie wchłaniania
substancji chemicznych w płucach.
Czynniki środowiskowe
• Zmiana ciśnienia atmosferycznego
–
wpływają na zaburzenia przepływu krwi przez
ważniejsze narządy jak: wątroba, nerki, serce,
co powoduje niedotlenienie oraz niedożywienie
tych narządów, co za tym idzie zmniejsza się
metabolizm ksenobiotyków w wątrobie oraz
następuje ograniczenie czynności nerek.
• Światło
– wpływa na rytm biologiczny
organizmów żywych. Cytochrom P450 i
mikrosomalny układ utleniający wykazują np.: u
szczurów największą aktywność pod koniec dnia
i w nocy, podczas gdy człowiek w tym czasie
odpoczywa i śpi.
• Temperatura otoczenia
–
a zwłaszcza
zimno jest czynnikiem, który bezpośrednio
wpływa na zmianę hemodynamiki krwi i
uważany jest za czynnik stresogenny.
Wzrost ciśnienia krwi w warunkach
ochłodzenia organizmu prowadzi do wzrostu
oporów naczyniowych, gorszego ukrwienia i
utlenowania ważnych narządów, a tym
samym prowadzi do zmniejszania
aktywności enzymów mikrosomalnych.
Podwyższenie jak i obniżenie temperatury
powoduje zwiększenie toksyczności
substancji chemicznych, np.: u myszy
zmiany temperatury powodują
podwyższenie
toksyczności
kofeiny
.
• Promieniownie
– Jako czynnik środowiskowy
przyjmuje się wartość 10 – 20 Bq/m
3
powietrza
jako nieprzekraczalna aktywność. To
promieniowanie może powodować radiolizę wody
w organizmie, a tym samym zwiększać pulę
wolnych rodników
, które są bardzo aktywne,
mimo, że czas trwania jest krótki, to działanie jest
b.toksyczne. Wolne rodniki reagują z różnymi
makrocząsteczkami komórkowymi jak:
lipidy,
białka, kwasy nukleinowe, polisacharydy
.
Reakcje z białkami i polisacharydami prowadzą do
inaktywacji licznych enzymów.
Uszkodzenie struktury
DNA
wywołuje działanie
mutagenne, rakotwórcze i teratogenne
.
Oddziaływanie na nienasycone kwasy
zapoczątkowuje
proces peroksydacji lipidów
,
który prowadzi do zniszczenia błon biologicznych i
uszkodzenia organelli komórkowych.
• Węglowodory chlorowane,
nikotyna, węglowodory
policykliczne, alkohol
wyraźnie
zwiększają aktywność układu
mikrosomalnego. Zjawisko to jest
korzystne w przypadku
przyzwyczajenia lub nałogu (zwiększa
się biotransformacja ksenobiotyków.
• Nikotyna
– szybciej ulega
biotransformacji u palaczy niż u
niepalących, a więc wywiera mniejszy
skutek toksyczny.
• Etanol
– zwiększa aktywność dehydrognazy
alkoholowej przyśpieszając biotransformację
etanolu. Alkohol stosowany jest jako odtrutka
w przypadku zatrucia
metanolem
.
• Metale
– które występują w małych ilościach
w powietrzu, wodzie ipokarmach, indukują
enzymatyczny układ wątrobowy związany z
redukowanym glutationem. Towarzyszy temu
zmnijszenie stężenia cytochromu P450.
• Kadm
– zwiększa syntezę białka zw.
metalotioneiną
.
• Ołów
-
w stężeniach dopuszczalnych (DSB) – 20
µg/cm
3
krwi powoduje indukcję niektórych układw
enzymatycznych p.: acetycholinoesterazy i
cholinoesterazy. Równocześnie doprowadza do
niedokrwistości (blok syntezy hemoglobiny), co
wpływa na pogłębienie toksyczności szeregu
substancji chemicznych i leków powodujących
niedokrwistość.
• Ditlenek siarki (SO
2
)
– powoduje powstawanie
sulfhemoglobiny, a tym samym pogłębia toksyczność
substancji chemicznych.
• Dym tytoniowy
– oprócz nikotyny zawiera
cała
grupę policyklicznych węglowodorów indukujących
aktywność
hydroksylaz
, które warunkują
powstawanie z benzo(α)pirenu zawartego w
powietrzu
dihydroksypochodnych benzopirenów
,
substancji o działaniu rakotwórczym.
• Tlenki azotu, azotany, azotyny
–
należą do czynników methemoglobinotwórczych,
jednak w małych stężeniach indukują
aktywność układu redukującego w organizmie
(reduktazy methemoglobiny), który zabezpiecza
hemoglobinę (Hb)
przed jej dalszym
sukcesywnym utlenianiem.
Obserwuje się
istotne zwiększenie zredukowanego glutationu
w krwinkach czerwonych, dehydrogenazy
glukozo-6-fosforanowej oraz reduktazy
methemogloginy. Można uznać, że małe ilości
tlenków azotu w środowisku indukują
mechanizmy redukujące i stabilizujące
hemoglobinę , chroniąc ją zarazem przed
innymi związkami lub lekami utleniającymi.