HIGIENA MLEKA

(2 nieobecności- do odrobienia 2 albo 3 zaliczenia)

ĆW 1

BADANIE ORGANOLEPTYCZNE I CHEMICZNE MLEKA

Rozporządzenie 853/2004: (z neta)

Mleko surowe- (z neta)

Pobieranie próbek

- sprzęt nie może zmieniać właściwości mleka (skład chemiczny, smak, zapach, konsystencja)

- ma być czysty i suchy

- wykonany z materiałów obojętnych (szkło, stal nierdzewna, polipropylen), mogą też być jednorazowe z tworzyw sztucznych np. torebki

- najlepiej z tworzyw nieprzezroczystych, jak są przezroczyste to przechowujemy w ciemnym miejscu

- do badań mikrobiologicznych muszą być jałowe pojemniki

- potem dopiero wykonuje się badania chemiczne, fizyczne, organoleptyczne.

- konserwanty mogą być dodane do badania chemicznego i fizycznego, nie mogą do organoleptycznego i mikrobiologicznego

- konserwanty mogą być dodawane tylko do niektórych przetworów pod warunkiem że:

- laboratorium badające wyda takie zalecenie

- użyta substancja nie zakłuci analiz

- nie będzie przeprowadzane badanie konsystencji, smaku i zapachu

- charakter i ilość substancji konserwującej będzie podana w protokole pobierania próbki

- czas transportu do laboratorium max 24h

- temperatura: tak jak w przepisach i zaleceniach producenta

Badanie organoleptyczne: zapach, wygląd, barwa, smak

ZAPACH

- natychmiast po otworzeniu naczynia

- możliwie najbliżej powierzchni

- potem znowu po wymieszaniu

WYGLĄD

- na powierzchni: zanieczyszczenia? (źdźbła słomy, siana, grudki tłuszczu)

- przy przelewani: ciągliwość

BARWA

- po przelaniu do probówki oceniamy na czarnym tle

biała z odcieniem kremowym

SMAK

- po przegotowaniu. Przy badaniu powinno mieć 18-20*C

BADANIE CHEMICZNE

- skład, świeżość, skuteczność pasteryzacji, stopień zanieczyszczeń mechanicznych, zafałszowania

• przygotowanie próbki:

- podgrzać do 20*C i wymieszać

- jeśli stwierdzę grudki masła albo śmietany to podgrzać do 40*, wymieszać i oziębić do 20*

- przed każdym pobraniem należy dokładnie wymieszać

milkoscan- metoda do znaczania składu mleka

• oznaczanie białka ogólnego

• zawartość tłuszczu

Metoda ekstrakcyjna Rose-Gottlieba

Metoda techniczna w tłuszczomierzu Gerbera

Metoda Siegfelda- metoda techniczna dla mleka odtłuszczonego

• oznaczanie suchej masy

suszenie w 102*C do suchej masy (4h)

metoda obliczeniowa wg wzoru Fleichmana

KWASOWOŚĆ

- kwasowość czynna: oznaczanie wolnych jonów H+ w danej chwili

- kwasowość potencjalna: oznaczanie wolnych H+ oraz możliwości ich tworzenia przy pozostawieniu w tych samych warunkach- służy do oceny trwałości mleka

Oznaczanie:

- kalorymetryczne, pomiar pH (kwasowość czynna) pH mleka: 6,6-6,8

- miareczkowanie (kwasowość potencjalna):

- do kolby odmierzamy 50ml mleka

- dodajemy 2 krople fenoloftaleiny

- miareczkujemy 0,25M NaOH do otrzymania lekko różowego zabarwienia

utrzymującego się przez 30s

- kwasowość wyrażamy w *SH (stopnie Sershleda). Obliczamy wg wzoru:

X= a* 2

a- ilość NaOH (w ml) zużytego do 50ml mleka

*SH- to ilość (w ml) 0,25M NaOH zużytego do zmiareczkowania 100ml mleka wobez fenoloftaleiny

- powinna wyjść kwasowość 6,0-6,8*SH

Oznaczenie skuteczności pasteryzacji:

- wykrycie obecności/stwierdzenie braku pewnych enzymów (białek) w badanym mleku (fosfataza, peroksydaza)

- pasteryzacja krótkotrwała: 71,7*C przez 15sek

- wysoka: 80-95* przez 15-20sek

- momentalna: 80-95* przez 2-3 sek

Test w niskiej: szukam aktywności fosfatazy. W wysokiej szukam aktywności peroksydazy

- próbę wykonujemy bezpośrednio po pasteryzacji (możliwość reaktywacji enzymu)

- inaktywacja peroksydazy zależy od: wysokości temperatury, czasu jej działania

- w 75* po 30sek

- w 80* po 30sek

- w 88* po 8 sek

(po takim czasie nastąpi inaktywacja)

Wykonanie:

- do probówki odmierzyć 5ml mleka

- dodać 1 kroplę 3% wody utlenionej

- dodać 2 krople wodnego roztworu parafenylenodwuaminy

- wymieszać i po kilku sekundach obserwować zabarwienie.

- brak zabarwienia- skutecznie przeprowadzona pasteryzacja

- jasno lub ciemnoniebieskie- nieskuteczna pasteryzacja lub domieszka mleka surowego

ĆW 2

Badanie fizyczne

- oznaczanie gęstości, temperatury, punktu zamarzania, zawartości suchej masy, oznaczanie refrakcji, pomiary kalorymetryczne i fotometryczne

Pobieranie próbek

- minimalna wielkość próbki- 100ml lub 100g

- przechowywać w temperaturze do 5*C nie dłużej niż 24h

Oznaczanie gęstości mleka

D= m/V [g/cm³] (zależy od ciśnienia i temperatury)

- gęstość względna- porównanie gęstości mleka z gęstością wody (dt mleka/ dt wody)

- oznacza się za pomocą laktodensymetru

• Soxhleta (22-38* Ld)

• Quevenne'a (15-30*)

- pomiaru dokonujemy w 15-20*

- mleko wykazuje największą gęstość w -0,3*C

- po udoju ma nieustabilizowaną gęstość która później się ustala (do skupu nie niższa niż 1,028)

Po co to badamy?

- żeby wykluczyć rozwodnienia- dodatek wody zmniejsza gęstość

- zakwaszenie- podwyższenie gęstości

- dodanie odtłuszczonego lub zebranie śmietany- wzrost gęstości

Temperatura

- wykonujemy termometrem lub czujnikiem

- w przypadku codziennego odbioru temperatura mleka nie może być wyższa niż 8*

- gdy odbiór jest co 2 dni to max 6*

- podczas transportu nie wyższa niż 10*

- nie musi być schładzane jeżeli:

- poddane jest przetwarzaniu w ciągu 24h

- konieczne jest zastosowanie wyższych temperatur z przyczyn technologicznych

związanych z wyrobem określonych produktów mleczarskich

- próbka do badania musi być reprezentatywna

- próbki próbki muszą być przechowywane w temperaturze 0-6* max przez 48h

- temperatura zamarzania mleka (-0,55*C)

- punkt zamarzania nie może być wyższy niż (-0,512*)

- dodatek wody podwyższa punkt zamarzania

- stan nadkwaszenia: spadek punktu zamarzania

- przy neutralizacji i konserwacji- spadek punktu zamarzania

Współczynnik załamania światła

- oznaczamy refraktometrem Abbego

- oznaczamy zawartość laktozy, tłuszczu, identyfikacja tłuszczu, wykrywanie zakwaszeń, rozwodnienia, zobojętnienia mleka nadkwaszonego

- Oznaczanie tłuszczu w tłuszczomierzu Gerbera

- 10ml stężonego kwasu siarkowego

- 11ml mleka

- 1ml alkoholu izoamylowego

- mleko nalewamy po ściankach- reakcja silnie egzotermiczna

Oznaczanie masy

- metoda suszenia (metoda odwoławcza) odwodnienie w 102*C do stałej masy

- metoda obliczeniowa wg wzoru Fleischmana

X= 1,2 * t + 2,665 * (100d- 100/ d)

t- % tłuszczu

d- gęstośc mleka w temperaturze 20*C

1,2 oraz 2,665- stałe liczbowe

BADANIE MIKROBIOLOGICZNE MLEKA

Cel :

* określanie higienicznej jakości mleka

* przydatności do przerobu

* jakości i trwałości produktów otrzymywanych z tego mleka

o jakości mikrobiologicznej mleka decyduje obecność drobnoustrojów chorobotwórczych i saprofitycznych.

FLORA MLEKA :

* dominują saprofity ( przedostają się do mleka podczas udoju z powierzchni skóry, naczyń, stryków )

Zanieczyszczenie ilościowe mleka oraz charakter jakościowy mikroflory odgrywają decydującą rolę w jakości i trwałości mleka ( bakterie termoodporne, przetrwalnikujące, psychotropowe, z grupy Coli są nie pożądane ??????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????

????????dzenie Ministra Rolnictwa i Rozwoju Wsi z dn. 05.07.2002 w sprawie szczegółowych warunków weterynaryjnych wymaganych przy pozyskiwaniu, przetwórstwie, składowaniu, transporcie mleka oraz przetworów mlecznych.

1) mleko surowe pochodzące od krów nie powinno zawierać w 1 ml więcej niż 100.000 drobnoustrojów oznaczonych metodą płytkową w temp. 30 C i nie więcej niż 400.000 komórek somatycznych oznaczonych metodą ilościową

2) mleko surowe pochodzące od owiec, kóz, bawolic jeżeli przeznaczone jest do produkcji mleka spożywczego mleka poddawanego obróbce cieplnej lub przetworów mlecznych mleka poddawanego obróbce cieplnej nie powinno zawierać w 1ml więcej niż 1.500.000 drobnoustrojów oznaczonych metodą płytkową w temperaturze 30 C

3) liczbę drobnoustrojów oznacza się dla okresu 2 - óch m - cy na podstawie średniej geometrycznej wyników badań co najmniej 2 - óch próbek pobranych w ciągu m - ca

WYMAGANIA MIKROBIOLOGICZNE MLEKA SUROWEGO

1) pochodzącego od krów i przeznaczonego do spożycia po zapakowaniu

* ogólna liczba drobnoustrojów w temp. 30 C w 1 ml < 50.000

* Staphylococcus aureus w 1 ml : n = 5, c = 2, m = 100, M = 500

* Salmonella : brak w 25g n = 5, c = 0

2) pochodzącego od krów i przeznaczonego do produkcji przetworów mlecznych, których proces technologiczny nie przewiduje obróbki cieplnej

* Staphylococcus aureus w 1 ml : n = 5, c = 2, m = 500, M = 2000

3) pochodzące od owiec, kóz, bawolic przeznaczonego do produkcji przetworów mlecznych, których proces technologiczny nie przewiduje obróbki cieplnej

* ogólna liczba drobnoustrojów oznaczonych metoda płytkową w temp. 30 C w 1 ml poniżej 500.000

WYMAGANIA DOTYCZĄCE MLEKA SPOŻYWCZEGO

1) dla pasteryzowanego

* drobnoustroje chorobotwórcze ( Salmonella, Listeria monocytogenes ) : brak w 25g n = 5, c = 0, n = 0, M = 0

* liczba bakterii z grupy Coli w 1 ml n = 5, c = 1, m = 0, M = 5

* po przetrzymaniu próbki w temp. 6 C przez 5 dni - ogólna liczba drobnoustrojów w temp. 21 C w 1 ml n = 5, c = 1, m = 5x10(4), M = 5x10(5)

2) mleko pasteryzowane i mleko UHT po przetrzymaniu próbki w temp. 30 C przez 15 dni

* ogólna liczba drobnoustrojów temp. 30 C w 0.1 ml < 10

* badanie organoleptyczne bez zmian

* substancje czynne farmakologicznie - zgodne z wymaganiami określonymi odrębnymi przepisami

n - liczba badanych próbek

m - wartość graniczna drobnoustrojów, wynik uznaje się za zadowalający, jeżeli we wszystkich badanych próbkach liczba drobnoustrojów nie przekracza wartości m

M - wartość max., liczby drobnoustrojów , wynik nie zadowalający jeżeli w 1 ml lub kilku badanych próbkach ma wartość M lub ją przekracza

METODY ILOŚCIOWE

1) metoda płytkowa ( odwoławcza ) PN - 93 - A / 86034 ( 04 )

2) metoda płytkowa uproszczona PN - 98 - A - / 86036

* posiew 1 ml mleka wykonuje się z rozcieńczenia 1 : 10.000 i na jedna płytkę Petriego. Liczba koloni wyrosła na płytce mnoży się przez 10.000

3) test petryfilm

4) metody instrumentalne

METODY ORIENTACYJNE

* z użyciem chlorku trójfenylotetrazolowego ( TTC ). Oparta na zdolności bakterii do redukcji TTC. Mierzy się czas po jakim następuje zaróżowienie mleka. Niższe zanieczyszczenie mleka tym dłuższy czas zaróżowienia mleka.

Klasa mleka

Ogólna liczba drobnoustrojów w 1 ml mleka ( jtk / ml )

Czas redukcji TTC ( h )

extra

< 100.000

> 23h

I

< 400.000

< 23hOcena wyników próby TTC

(r) Edyta Ziółkowska

Do 31.12.2006 r do produkcji mleka spożywczego przetworów mlecznych może być używane mleko surowe pochodzące od krów zawierające w 1 ml nie więcej niż 400.000 drobnoustrojów oznaczonych metodą płytkową w temp. 30 C

Do liczenia wybieramy kolonie gdzie na płytce jest od 10 - 300 koloni

Liczbę drobnoustrojów 1 ml oblicza się ze wzoru :

? C

L = ----------------------------------------

( n1 + 0,1 n2 ) x d

?C - suma koloni na wszystkich płytkach wybranych do liczenia

n1 - liczba płytek branych pod uwagę przy pierwszym niższym rozcieńczeniu

n2 - - liczba płytek branych pod uwagę przy drugim wyższym rozcieńczeniu

d - wskaźnik rozcieńczeń, odpowiada pierwszym ( niższym ) liczonym rozcieńczeniem

08 / 03 / 2004 HIGIENA MLEKA - ( ĆWICZENIA 4 )

BADANIE MIKROBIOLOGICZNE CZ. II

Grupa Coli określa się bakterie należące do rodzajów :

- Escherichia

- Enterobacter składnik mikroflory jelita grubego, powietrza, wody

- Clebsiella

Są wskaźnikiem sanitarnym uzyskiwania i przetwarzania mleka oraz żywności

( 05 / 07 / 02 - wymagania dotyczące grupy Coli )

WYKONANIE OZNACZENIA :

Do 3 próbówek z płynną pożywką z siarczanem sodowo - laurylowym przenieść po 1 ml produktu płynnego lub odważonego. Wymieszać. Inkubować w 30 C przez 24h a w przypadku braku wzrostu ( zmętnienie lub gaz ), inkubację przedłużyć do 48h. Przesiew do pożywki z zielenią brylantową ( jeden, dwa okna pobieramy ezą ). Inkubujemy w 30 C przez 24h

ODCZYTYWANIE WYNIKÓW

Po inkubacji zapisać wynik każdej z 3 - ch próbek z posiewem próbki lub ich rozcieńczeniem

INTERPRETACJA WYNIKÓW

Wynik posiewów w 3 - ch równoległych próbówkach

interpretacja

1

2

3

Nieobecne

Nieobecne

Obecne

obecne -

+

+

+ -

-

+

+ -

-

-

+

WYKRYWANIE OBECNOŚCI ENTEROCOCCÓW

- są to paciorkowce kałowe : Str., fecalis,, Str., fecium,

- bytują w przewodzie pokarmowym zwierząt i ludzi, błonach śluzowych, na powierzchni roślin

- zostały uznane za wskaźnik sanitarny produkcji żywności

- w przypadku mleka oznaczamy ich obecność w mleku w proszku i mieszankach mlecznych

- ciepłooporne

wykonanie oznaczenia :

próbkę lub jej kolejne rozcieńczenia należy posiać do 3 - ch równoległych próbówek z azydkiem sodowym i fioletem krystalicznym. Inkubacja w temperaturze 37 C przez 48h. Wynik dodatni - zmiana barwy pożywki z fioletowej na żółtą. Określamy zmianę barwy w 3 - ch równoległych próbówkach i interpretujemy ( patrz tabela ). Wynik wątpliwy - brak ogromnej zmiany zabarwienia, należy wykonać testy potwierdzające. z wynikiem wątpliwym należy przesiać na bulion odżywczy z glukozą, inkubować w 37 C przez 18 - 20h. Po uzyskaniu wzrostu bakterii ( zmętnienie ) wykonać testy :

* barwienie metodą Grama

* wytwarzanie katalazy ( nie wytwarzają )

* sprawdzenie ciepłooporności ( hodowlę ogrzewamy w temperaturze 63 C przez 30' w łaźni wodnej. Ochładzamy w wodzie i inkubujemy w temperaturze 37 C przez 18h. Wynikiem potwierdzającym jest zmętnienie hodowli.

PRÓBA FERMENTACYJNA

- służy do oceny mikrobiologicznej mleka pod kątem jego przydatności serowarskiej

- przeprowadzamy ją w temperaturze 35 - 37 C

- pod wpływem bakterii fermentacji mlekowej mleko zwykle się ścina

- jakość utworzonego skrzepu, jego konsystencja i wygląd zależą od dominującej mikroflory mleka

- temperatura 35 - 37 C jest optymalną dla wzrostu niepożądanych w mleku drobnoustrojów ( np., bakterie z grupy Coli, gnilne )

- w tej temperaturze są niejako faworyzowane w celu łatwiejszego ich wykrycia

- w tej temperaturze bakterie fermentacji mlekowej źle się rozwijają

- gdy w tej temperaturze bakterie fermentacji mlekowej występują w większej ilości mleko należy uważać za dobrej jakości, nadające się do przetwórstwa

wykonanie :

do jałowych próbówek wlać po 20 cm3 mleka. Inkubujemy w 35 - 37 C, pierwszą obserwację przeprowadzamy po 12h, dobre mleko w tym czasie pozostaje nie ścięte, po 24h przeprowadzamy ocenę powstałych skrzepów przyjmując oznaczenie :

- pł - brak skrzepu, mleko płynne

- gl - galaretowaty

(r)Edyta Ziółkowska

- s - serowaty

- z - ziarnisty

- w - wzdymający

TYPY SKRZEPÓW SZCZEGÓŁOWO

1

pł 1

mleko zupełnie płynne, słodkie lub lekko kwaskowate

gl 1

Skrzep równy,??????????????????????????????????????????????????????

???

????????????????????????????????????????????????

gl 2

w galaretowatym skrzepie trochę smug lub pęcherzyków gazu bez wydzielonej serwatkiS 2

Serek skurczony, serwatka zielonaZ 2

Skrzep gruboziarnisty, wydzielanie serwatkiW 2

Skrzep poszarpany, wzdymający, serwatka mętna

3pł 3

mleko zaczyna krzepnąćgl3

w galaretowatym skrzepie smugi, pęcherzyki gazu i pęknięcia, trochę serwatkiS 3

Skrzep bardzo skurczony, serwatka mętnaZ 3

Skrzep w postaci grubych kłaczków, poszarpany serwatka mętnaW 3

Skrzep silnie poszarpany, wzdymwjący, często podnosi się do góry pod wpływem gazowania, serwatka mętna

Mleko niepewne dla przerobu serowarskiego :pł 3, s 2, z 2, w 1 mleko nie nadaje się na sery : z 2, w 2, w 3,

Substancje hamujace w mleku

Pozostałości w mleku antybiotykow , w tym srodkow myjacychi dezynfekcyjnych oraz innych związków które hamuja wzrost szczepow.

Substancje komorkowe w mleku:

PN-A 86033/2002- mleko i przetwory mleczne, wykrywanie sulfonoamidow(metoda odwolawcza)

PN-EN ISO 13969/2006- przetwory mleczne-wytyczne dotyczące znormalizowanego opisu mikrobiologicznych metod wykrywania subst hamujących

PN-EN ISO183330/2005-wytyczne dotyczące znormalizowanego opisu immunologicznych lub !!! metod wykrywania pozostałości subst hamujących.

Konsekwencje obecności subst ham w mleku:

1. Alergia, anemia hemolityczna, zatrucia

2. Wzrost lekooporności bakterii chorobotwórczych

3. Zafałszowanie obrazu jakości mleka poprzez hamowanie rozwoju i wzrostu bakterii

4. Uniemożliwienie lub utrudnienie procesow produkcji serow dojrzewających, twarogow mlecznych napojow fermentowanych

Metody wykrywania subst ham: mikrobiologiczne(dyfuzyjne), enzymatyczne, inne( chromatografia, testy radioimmunologiczne, elektroforeza, spektrofotometria)

Metody mikrobiologiczne:

Polegaja na zahamowaniu wzrostu szczepu testowego czyli:

- bacillus stearothermophilus

- geobacillus stearothermophilus

- streptococcus thermophilus

Podloze do oznaczania subs ham zawieraja: skladniki odzywcze, agar, wskaznik brawny, przetrwalniki szczepow bakterii testowych, przewaznie 2x10 do szostej w ml

Metoda plytkowa- dyfuzyjna:1. metoda studzienkowa,2. krazkowa, 3.cylinderkowa

Mleko musi być swieze, normalnej kwasowości. Plytki po uwodnieniu można przeinkubowac. Poddaje się jej wstepnej inkubacji aby skrocic czas oczekiwania na wynik(64stopnie przez 24 h). czas inkubacji bez preinkubacji trwa 4 h.

1. Technika studzienkowa- wycina się studzienki probowka i tam wkrapla się badane mleko, nie wiecej niż 6 badanych probowek.

2. Krazkowa- jalowe krazki nasacza się badanym mlekiem i przykleja je na plytce

3. Cylinderkowa- stawia się na plytkach cylinderki i do nich wlewa się mleko.

Na każdej plytce trzeba zrobic probe kontrolna

Obecność subst hamujących uwidacznia się przezroczysta, sinoniebieska strefa zahamowania wzrostu, gdy podloze poza strefa wykazuje zmętnienie(wzrost bakterii) i zmiane zabarwienia na zolte. Wokół powierzchni kontrolnej normalny wzrost szczepu testowego i zmiana barwy podloza na zolte.

Minimalne wykrywalne stężenia w mikrogramach/ml lub j/ml

Neomycyna 0,2

Streptomycyna 1,0

Syntarpen 0,1

Tetracyklina 0,6

Szybki test dyfuzyjny- …

- Dyfuzja plytkowa: inkubacja 2,5 h, niezmieniona barwa podloza - obecność subst ham. Przy wątpliwym wyniku przedłużamy inkubacje

-…test…- zmiana barwy podloza z purpurowego na zoltokremowa swiadczy o nieobecności subst ham. Test wykrywa stężenia 0,003- 0,004 jm?/ml. Bacytracyny i pozostale antybiotyki w ilości od o,1 do 1 mikrogram-ml

- BR test- test redukcyjny z czerwienia brylantowa. Wykrywanie 0,003 jm/ml penicyliny. Innych od 0,005 do 16,0 mikrog/ml. Barwa granatowo niebieska na zolta.

- Deluotest

a. delvutest P do wykrywania sulfonoamidow

b.delvutest SP penicylina 0,003-0,005 jm/ml, reszta 0,008-20mikrog/ml, sulfonamidy 50-100mikrog/ml

- enterotest I i II

Mikrola-test?

Valiw T 101- S+T101

Do wykrywania pozostałości antybiotykow i sulfonoamidow. Jest on skladowa kultur startowych do produktow jogurtow. Zmiana zmiana z niebieskiego na zolty pod wpływem kw. Mlekowego produkowanego przez Streptococcus termophilus. Ujemny to barwa jasnozolta, dodatni to niebieska, zielona to sladowe ilości antybiotykow

Metody enzymatyczne:1.test PENZYM, 2.enzym test farmerski, 3.enzym 100 wersja tabletkowa.

1. Test penzym- do wykrywania antybiotykow betalaktomowych: penicyliny( naturalne, polsyntetyczne, syntetyczne), cefalosporyny, karbopenemy, monibaktemy. Mleko powinno być swieze lub przechowywane w 4 stopniach. Klaniki tego testu:

- fiolka a: DD-karboksypeptydaza(penicylinaza)

- fiolka b: substrat (polipeptyd zawierajacy D-akinine) i wskaźnik(ortocostam)

- fioka c: peroksydaza, dwunukleotyd flawinoadeninowy i oksydaza alfa aminokwasowa

- kwas siarkowy 50%

Wywoluje się tu reakcje barwna. Gdy brak antybiotyku wtedy dd karboksypeptydaza uwalnia Daknine? Z substratu syntetycznego. Uwalania D alanine , ulega utlenieniu przez oksydazy od aminokwasu do kwasu pirogronowego z powstanie odpowiedniej ilości nadtlenku wodoru.utlenia on wskaźnik a po dodaniu kwasu siarkowego mleko zmienia zabarwienie na rozowa.

Gdy jest antybiotyk DD karboksypeptydaza ulega inaktywacji i nie dochodzi do powyższej reakcji. Robi się tez probe kontrolna i slepa.

Do ependorfa dodaje się 10 mikrol penicylinazy, 50 mikrolitrow mleka, i po wymieszaniu inkubuje się w 47 stopniach przez 5 min. Odmierza się do probowki 10 mikrol fiolki b w 10 mikrol fiolki c i po wymieszaniu inkubacja przez 15 min w 47 stopniach. Po tym dodaje się 100 mikrol roztworu kw. Siarkowego, odczytujemy wynik. Rozowe zabarwienie- brak antybiotykow betalaktomowych, bialozolte zabarwienie- obecność antybiotykow wiecej niż 0,017 jm/ml. Barwa posrednia czesciowo utlenione dwusiarczany-antybiotykow od 0-0,017

2. Penzym test farmerski- do warunkow terenowych

3. Penzym 100 wersje tabletkowe: fiolka b i c i kwas siarkowy zastapiono jedna tabl. Wynik odczytywany ze skali barwnej

Inne testy:

1. Testy ELISA- stosowane sa do poszczególnych grup antybiotykow np., betalakt. Sa stosowane w laboratoriach.

2. P-star 25-

I etap: inkubacja specyficznego receptora z mlekiem. Test zawiera specyficzny receptor beta lak. Zwaizany z odrobina zlota. Wstepna intubacja powoduje interakcje antybiotyku z receptorem.

II etap: przeniesienie badanego roztworu na podloze immunochromatograficzne w formie paska. Odczyn na podstawie obecności zabarwienia 2 lini na podlozu.pierwsza linia wiaze wszystkie receptory które nie zetknęły się z antybiotykiem, druga to referencyjna. Interpretacja wynikow: jeżeli nie pojawia się druga linia, test jest niewazny- mleko kwasne,skrzep. Wynik ujemny jeżeli jedna linia jest zabarwiona intensywniej niż druga, wynik dodatni-obie linie zabarwione podobnie. Jeżeli brak 1 lini wynik jest wysoce pozytywny-duzo antybiotykow betalakt.

3. Chromatografia- wysoka czułość oznaczania: bibulowa, cienkowarstwowa, cieczowa, gazowa

4. Testy radioimmunologiczne: np. Cherma z wykorzystaniem znacznikow izotopowych. zasada to reakcja wiazania funkcjonalnych grup antybiotykow prtzezspecjalne receptory lub dodawanie do mleka kom. Bakteryjne. Kompleksy rec- antybiotyki … sa z probki i poddawane pomiarowi promieniowania w scyntylatorze. Wynik porownuje się z probka dla mleka wolnego od subs. Ham.

Rozp. 853 w zał 3, sekcja IX dotyczy mleka surowego, produktow mlecznych. Wymogi dotyczące zdrowia w odniesieniu do produkcji mleka surowego . mleko surowe musi pochodzic od zwierzat które nie otrzymaly zadnych niedozwolonych substancji lub produktow i które nie były poddawane nielegalnemu leczeniu. Musi być zachowany okres karencji.

Higiena w gospodarstwie produkującym mleko: uduj-identyfikacja zwierzat poddanych opiece vet w przypadku gdy istnieje podejrzenie obecności w mleku pozostałości.

Kontrola dezynfekcji srodkow udojowych aby resztki srodkow nie dostawaly się do mleka.

---