mgr Joanna Kądzielska WNOZ –PIELĘGNIARSTWO
23.02.2009
ĆWICZENIE 2
RODZAJE MIKROSKOPÓW
METODY BARWIENIA DROBNOUSTROJÓW
ROLA PREPARATU BEZPOŚREDNIEGO
1. Budowa komórki bakteryjnej 2. Podstawowe kształty i układy komórek bakteryjnych 3. Rodzaje mikroskopów i ich zastosowanie 4. Metody barwienia bakterii 5. Bakterie Gram-dodatnie i Gram-ujemne Do wykonania :
1. Mikroskopowanie oraz wykonanie rysunków z gotowych preparatów:
− pałeczek Gram-ujemnych ( E. coli)
− ziarniaków Gram-dodatnich (gronkowce)
− ziarniaków Gram-dodatnich (paciorkowce)
− laseczek ( C. perfringens)
− drożdżaków ( Candida albicans) 2. Samodzielne przygotowanie i zabarwienie preparatu mikroskopowego z hodowli
bakterii
mgr Joanna Kądzielska ROLA PREPARATU BEZPOŚREDNIEGO W
DIAGNOSTYCE MIKROBIOLOGICZNEJ
I.
Preparat bezpośredni wykonujemy z następujących materiałów:
RODZAJ
MATERIAŁ BADANY
BARWIENIE
ZAKAŻE
W PREPARACIE
NIA
BEZPOŚREDNIM
Duże znaczenie w przypadku
zmian skórnych zamkniętych.
W zaka
Skóra i
żeniach o etiologii
GRAM
tkanka
mieszanej ukierunkowuje
podskórna badanie i ułatwia dobór
pożywek.
* Obecność komórek zapalnych
(właściwy materiał z miejsca
toczącego się zakażenia),
* Obecność komórek
nabłonkowych (materiał
pobrany powierzchownie, może
zawierać bakterie ze skóry, nie
będące przyczyną zakażenia).
Narząd Ropna wydzielina
GRAM
wzroku
Plwocina
* ocena mikroskopowa w
małym powiększeniu (obiektyw 10 x):
GRAM
Układ
- komórki nabłonkowe < 10
oddechowy w polu widzenia
- granulocyty > 25 w polu
widzenia
Powyższy materiał zostaje
oceniony jako prawidłowo
pobrany i zostaje
zakwalifikowany do dalszego
badania.
Ślina natomiast:
- komórki nabłonkowe > 25 w
polu widzenia
- granulocyty < 10 w polu
mgr Joanna Kądzielska widzenia
....................................................
Popłuczyny pęcherzykowo-
oskrzelowe
Aspirat z oskrzeli i płuc
Płyn z jamy opłucnej
Bioptaty
Plwocina
Popłuczyny p
ZIEHL-
Gru
ęcherzykowo-
źlica oskrzelowe
NEELSEN
Bronchoaspirat
Popłuczyny żołądkowe
IMMUNOFLUO
Płyn z opłucnej
RESCENCJA
BEZPOŚREDNIA
Płyn mózgowo-rdzeniowy
inne
Osad płynu mózgowo-
Ośrodko rdzeniowego
GRAM
wy układ - granulocyty (etiologia
nerwowy bakteryjna)
BŁĘKIT
- komórki bakteryjne np.
METYLENO
dwoinki Gram-ujemne
WY
(Neisseria meningitidis) lub Gram-dodatnie (Streptococcus
pneumoniae)
Mocz
Układ
- z osadu: granulocyty
moczowo - z pełnego moczu: 1 komórka GRAM
-płciowy
bakteryjna w każdym polu
widzenia świadczy o obecności
ponad 105 jednostek
wzrostowych (CFU) bakterii w
1mL
Pochwa: ocena stopnia
czystości
Ropna wydzielina z cewki
GRAM
Rzeżączka moczowej, z szyjki macicy, BŁĘKIT
ropień gruczołu Bartholina
METYLENO
WY
Zakażenia Aspiraty, bioptaty, materiały bakteriami sródoperacyjne, przetoki, GRAM
beztlenowy punktaty, płyn z otrzewnej, płyn mi
z opłucnej, głębokie odleżyny
II. Preparatu bezpośredniego nie wykonuje się z:
• kału (bardzo liczna mikroflora) z wyjątkiem zakażenia u noworodków i małych dzieci oraz badania w kierunku kampylobakteriozy (Campylobacter spp .) i Vibrio spp.
• gardła (bogata mikroflora) z wyjątkiem błonicy (Metoda Grama:
obecność
maczugowców
Corynebacterium
diphtheriae Gram-dodatnich
w układzie X, V, L
i metoda Neissera: poszukiwanie ziarnistości Ernsta-Babesa) oraz Anginy Plauta-Vincenta (Gram-ujemne polimorficzne pałeczki Fusobacterium Gram-ujemne wrzecionowce i krętki), a także w zakażeniu grzybiczym (pleśniawki).