ĆWICZENIE III
I.
METODY OZNACZANIA OGÓLNEJ LICZBY DROBNOUSTROJÓW:
1. Metody bezpośrednie  mikroskopowo w komorze Thoma, metodą Breeda oraz przy
pomocy filtrów membranowych.
2. Metody pośrednie  posiew i liczenie kolonii metodą zalewową, posiew powierzchniowy,
oznaczenie najbardziej prawdopodobniej liczby drobnoustrojów (NPL).
II.
MORFOLOGIA GRZYBÓW STRZ
PKOWYCH
Zygomycota
Cechy charakterystyczne:
·ð Grzybnia (mycelium) jednokomórkowa, zawierajÄ…ca wiele jÄ…der
·ð Rozmnażanie wegetatywne - w zarodni powstajÄ… jednokomórkowe zarodniki -
endospory (okrągłe lub owalne)
·ð Rozmnażanie generatywne  zlanie siÄ™ dwóch odcinków różnych nitek tej
samej grzybni (gamentangia), po ich połączeniu powstaje zygospora, która
kiełkuje w sporangiofor, na końcu którego znajduje się zarodnia.
Przedstawiciele:
Mucor sp. : A  zarodnia z zarodnikami
B  różne kształty kolumeli
Ascomycota
Cechy charakterystyczne:
·ð Wielokomórkowa grzybnia
·ð Rozmnażanie wegetatywne  z grzybni wyrasta strzÄ™pka owocujÄ…ca -
konidiofor, zarodniki zewnętrzne  konidia (egzospory)
·ð Rozmnażanie pÅ‚ciowe  wytworzenie worka (ascus) z zarodnikami
workowymi (ascospory)
·ð Drożdże bezpÅ‚ciowo rozmnażajÄ… siÄ™ przez pÄ…czkowanie, natomiast
płciowo przez zarodniki (ascospory)
Przedstawiciele:
Chaetomium globosum: a)perytecjum, b) worki z zarodnikami, c) zarodniki
Deuteromycota (Fungi Imperfecti)
Cechy charakterystyczne:
·ð Grzyby u których nie stwierdzono rozmnażania pÅ‚ciowego
·ð Grzybnia skÅ‚adajÄ…ca siÄ™ ze strzÄ™pek rozgaÅ‚Ä™zionych, wielokomórkowych
·ð Rozmnażanie wegetatywne  wytwarzanie konidiów lub oidiów 
powstających z rozpadu strzępek
Przedstawicele:
2. Znaczenie pleśni i drożdży w przemyśle spożywczym
Część praktyczna
1. Oznaczanie liczby komórek drożdży piekarskich Saccharomyces cerevisiae w komorze
Thoma:
a) po ustawieniu oświetlenia w mikroskopie należy znalez
ć siatkę komory, najpierw pod
obiektywem o powiększeniu 10 x, a następnie 40 x,
b) otrzymaną zawiesinę drożdży wytrząsać przez kilka minut, następnie przenieść szybko
pipetÄ… do komory Thoma,
c) obliczyć średnią liczbę komórek w ok. 40 małych kwadracikach, (w sumie ok. 700
komórek),
d) wyliczyć liczbę komórek w 1 cm3 badanej zawiesiny drożdży.
2. Wykonanie testu na żywotność i odżywienie drożdży
Żywotność
a) na szkiełko przedmiotowe nanieść kroplę zawiesiny drożdży
b) dodać kroplę błękitu metylenowego, delikatnie wymieszać,
c) przykryć preparat szkiełkiem nakrywkowym,
d) oglądać pod mikroskopem przy użyciu obiektywu o pow. 40x
e) policzyć martwe komórki w polu widzenia mikroskopu (komórki martwe barwią się na
kolor szafirowo-niebieski, żywe są bezbarwne)
Odżywienie
a) na szkiełko przedmiotowe nanieść kroplę zawiesiny drożdży
b) dodać kroplę płynu Lugola, delikatnie wymieszać,
c) przykryć preparat szkiełkiem nakrywkowym,
d) oglądać pod mikroskopem przy użyciu obiektywu o pow. 40x
e) policzyć komórki z brunatnymi ziarnistościami (glikogen) w polu widzenia mikroskopu
3. Obserwacje grzybów w hodowlach oraz preparatach mikroskopowych
a) Obejrzeć pod mikroskopem stereoskopowym płytki z przedstawicielami
poszczególnych klas
b) Za pomocą igły mikrobiologicznej sporządzić preparat grzybowy barwiony płynem
Lugola
c) Obejrzeć preparat pod mikroskopem przy małym i średnim powiększeniu.
d) Wykonać rysunek.
Opracowanie wyników
Obserwacje, wyniki i wnioski należy przedstawić w formie sprawozdania