Ogólna technologia żywności
Laboratorium
Laktoza
Technologia Chłodnictwa Żywności Smyła Grzegorz
Dzień zajęć: Środa Kurasik Maria
Godz.: 8:00 – 12:00 Matczak Michalina
Malek Mateusz
1.Cel ćwiczenia.
Zapoznanie się z laboratoryjnym sposobem otrzymywania albumin oraz laktozy z serwatki.
2.Wstęp teoretyczny.
Serwatka jest odpadem przy produkcji sera. Ciecz prawie klarowna, będąca pozostałością po całkowitym ścięciu mleka. Zawiera blisko 5% laktozy, do 1% białka i ok. 0,5% tłuszczu oraz sole mineralne i witaminy. Stanowi połowę suchej masy mleka i jest coraz częściej stosowana przy karmieniu zwierząt. Obecnie nowe technologie umożliwiają rozdzielenie i pozyskanie z serwatki frakcji białek serwatkowych, należących do białek o najwyższej wartości odżywczej. Posiadają one wysoką zawartość aminokwasów egzogennych, dzięki czemu są łatwo trawione i wchłaniane w przewodzie pokarmowym. Białka serwatki korzystnie wpływają na układ sercowo-naczyniowy przyczyniając się do zmniejszenia stężenia triglicerydów oraz LDL we krwi.
Wyróżnia się serwatkę łagodną i słodkawą serwatkę podpuszczkową, która jest produktem ubocznym przy wyrobie serów twardych i miękkich oraz kwaśną występującą przy produkcji twarogów.
Przerób serwatki jest uzależniony od jej rodzaju. Serwatka podpuszczkowa może być poddawana bezpośrednio zagęszczaniu w temperaturze poniżej 65oC do stężenia około 65%, a następnie przeprowadza się krystalizację laktozy. Roztwór macierzysty po odwirowaniu przeznacza się do suszenia, uzyskując niskobiałkowy koncentrat. W inny sposób serwatkę podpuszczkową poddaje się odbiałczaniu przez ogrzanie serwatki i zakwaszenie kwasem mlekowym do pH ok. 4,8. Po odwirowaniu zawiesiny albuminy serwatkę zagęszcza się i poddaje krystalizacji w celu otrzymania laktozy. W zależności od sposobu przetwarzania serwatki możemy otrzymać produkty takie jak:
Koncentraty białek serwatkowych i laktozy
Koncentraty serwatki i proszku serwatkowego
Proszek serwatkowy jest przede wszystkim stosowany do produkcji żywności dietetycznej oraz odżywek dla niemowląt i dzieci. Ponadto znalazł zastosowanie w produkcji sosów, napojów. Odbiałczaną serwatkę można stosować do produkcji piwa, napojów chłodzących, szampanów i różnego rodzaju napojów musujących.
Laktoza - (cukier mleczny - C12H22O11,); dwucukier zbudowany z glukozy i galaktozy występujący w mleku ssaków. Powstaje bezpośrednio w gruczole mlecznym. W technologii otrzymywana z serwatki przy produkcji sera. Wykorzystywana jako składnik do produkcji żywności niskokalorycznej oraz odżywek przeznaczonych dla dzieci. Stosowana w przemyśle piekarniczym, farmaceutycznym – jako wypełniacz produktów oraz w mikrobiologii jako składnik podłoża. Cukier mleczny trawiony jest w jelicie przy udziale laktazy.
3.Obliczenia
Oznaczyliśmy kwasowość serwatki poprzez miareczkowanie 0,1 N roztworem NaOH próbki o objętości 20 cm3.
Objętość 0,1 M NaOH, która została zużyta do zmiareczkowania próby - 10 cm3
10 cm3 0,1 M NaOH – 20 cm3 serwatki
C1 ∙ V1 = C2 ∙ V2
V2 = cm3 4*5 100cm3 = 20 oSH
Kwasowość wyrażą się w stopniach Soxhleta – Henkla(oSH). 1 oSH odpowiada 1 cm3 0,25 M NaOH/100 cm3 serwatki. Z definicji oSH wynika, że otrzymaliśmy 20 oSH.
Obliczyliśmy objętości roztworu 2 N NaOH jaką musimy dodać w celu obniżenia kwasowości serwatki do 6 oSH.
20 oSH – 6 oSH = 14oSH
50 ml– 20 oSH
X – 14 oSH
x = = 35ml
35 ml – 100 ml
x – 660 ml
x = = 231ml
C1 ∙ V1 = C2 ∙ V2
V2 = cm3
Połowę obliczonej ilości roztworu wodorotlenku sodowego dodaliśmy do serwatki umieszczonej w zlewce o pojemności 1,5 dm3 całość ogrzewaliśmy do temperatury ok. 85ºC. Po osiągnięciu temperatury dodaliśmy pozostałą część roztworu wodorotlenku i wznowiliśmy ogrzewanie w temperaturze 93ºC przez 10 minut. Na lejku Büchnera umieściliśmy kolejno bibułę, tkaninę filtracyjną i bibułę, a zawiesinę białek serwatkowych oddzieliliśmy pod zmniejszonym ciśnieniem. Oddzieloną na lejku albuminę w suszarce w temperaturze 105ºC przez 2 godziny.
Odbiałczoną i klarowną serwatkę poddaliśmy procesowi zagęszczania, do uzyskania ok.60˚Bx.
Zawartość s.s. = 59,8˚Bx
W czasie zagęszczania serwatki odbiałczonej w pozostałej części oznaczyliśmy
zawartość s.s. w ˚Bx oraz zawartość laktozy metodą polarymetryczną.
Do kolby miarowej o pojemności 100 cm3 odmierzyliśmy 32,1 cm3 dodaliśmy 4 cm3 roztworu octanu ołowiawego i 8 cm3 roztworu Na2HPO4 ,a następnie kolbę uzupełniliśmy wodą do kreski. Po wymieszaniu zawiesinę sączyliśmy na lejku przez sączek karbowany. Skręcalność roztworu zmierzyliśmy metodą polarymetryczną.
Stężenie procentowe laktozy w serwatce = 3,43˚S
Zawartość s.s. = 5,08˚Bx
Ilość odbiałczonej serwatki = 500ml.
Masa zagęszczonej serwatki = 29,00g
Przenieśliśmy serwatkę do zważonej zlewki o pojemności 100cm3, ponownie zważyliśmy i wprowadziliśmy kryształy zaszczepowe. Koncentrat schowaliśmy do lodówki na okres 1 tygodnia.
Po okresie 1 tygodnia oznaczyliśmy zawartość s.s. krystalizatu i dodaliśmy 10cm3 wody z lodówki o temperaturze +5˚C. Po wymieszaniu odsączyliśmy kryształy na lejku Büchnera. Następnie suszyliśmy je w suszarni owiewowej w temperaturze 85˚C do stałego ciężaru.
Oznaczenie zawartości laktozy w otrzymanej laktozie krystalicznej:
Odważyliśmy 5g preparatu i rozpuściliśmy w 50 cm3 wody w temperaturze 50˚C w kolbie o pojemności 100 cm3, po czym dodaliśmy 2 cm3 roztworu octanu ołowiawego, 4 cm3 roztworu Na2HPO4 oraz 5 kropli amoniaku. Zawartość kolby uzupełniliśmy do kreski wodą destylowaną. Po 30 minutach w gdy ustaliła się równowaga mutamerów roztwór schłodziliśmy do temperatury 20˚C i przesączyliśmy. Skręcalność wyznaczyliśmy z przesączu w rurce o długości 200mm.
skręcalność wynosi = 11,43˚S.
Oznaczenie zawartości białka w wysuszonej albuminie metodą Kjeldahla:
2,013g rozdrobnionej albuminy przenieśliśmy do kolby Kjeldahla. Dodaliśmy 25 cm3 stężonego H2SO4, 0,2343g CuSO4 i 5,2214g K2SO4. Kolbę ogrzewaliśmy aż do momentu gdy uzyskaliśmy klarowną ciesz o zabarwieniu zielonym. Następnie schłodzony roztwór rozcieńczyliśmy z ok. 100 cm3 wody destylowanej i przenieśliśmy do kolby miarowej 250 cm3uzupełniając kolbę wodą destylowaną do kreski. Pobraliśmy pipetą 50 cm3 roztworu i 30 cm3 30% NaOH i przenieśliśmy do aparatu Parnasa.
Wylot chłodnicy zanurzyliśmy w kolbie stożkowej o pojemności 300 cm3, zawierającej 50 cm3 0,1M HCl i kilka kropel wskaźnika Toshiro. Rozpoczeliśmy destylację, która trwała aż do uzyskania odczynu obojętnego. Zawartość kolby jak i próbę ślepą miareczkowaliśmy 0,1M roztworem NaOH.
Zawartość białka:
a – objętość w cm3 0,1M NaOH do miareczkowania 50 cm3 około 0,1M HCl (próba odniesienia)
b – objętość w cm3 0,1M NaOH do miareczkowania 50 cm3 nadmiaru kwasu w badanej próbie
n – stosunek objętości kolby miarowej do objętości roztworu poddanego destylacji; n = 250/50 = 5
c – naważka w gramach
Zawartość laktozy wyniosła 14,38°S
Zawartość laktozy z roztworu o stężeniu 5g na 100 cm3 obliczamy ze wzoru:
$$c = \frac{\propto *100}{\propto_{0}*I}$$
Gdzie:
α = 0,346 *°S
α0 = 55
I = 2c=3,59
Procentowa zawartość laktozy w laktozie surowej (czystość) wynosi:
$$\text{Cz} = \ \frac{c}{5}*100\%$$
Cz = 71,9%
Obliczono wydajność wyodrębnienia albuminy z 1 dm3 serwatki:
2,013 g ∙ 47,63 % = 0,9588 g
Gdzie: 2,013 g – masa surowca użytego do Kjeldahla
47,63 % - zawartość białka w wysuszonej albuminie
0,9588 g - 600 ml
x - 1000 ml
x = 1,598g
Obliczono wydajność wyodrębnienia albuminy z 100 g suchej masy serwatki:
1,598 g - 59,8 g
x - 100 g
x = 2,6722 g
Gdzie: 59,8 g – stężenie zagęszczonej serwatki
Obliczono wydajność wyodrębnienia laktozy z 1 dm3 serwatki:
21,362 g ∙ 71,9 % = 15,3592 g
Gdzie: 21,362 g – masa skrystalizowanej laktozy
71,9 % - czystość laktozy
15,3592g - 600 ml
x - 1000 ml
x = 25,5988g
Obliczono wydajność wyodrębnienia laktozy z 100 g suchej masy serwatki:
25,5988g - 36,1091g
x - 100 g
x = 70,8929 g
Gdzie: 36,1091g – zawartość suchej masy w laktozie skrystalizowanej
4.Wnioski
Czystość uzyskanej laktozy wyniosła 71,9%.
Wydajność wyodrębnienia albuminy serwatki wyniosła 1,59 g na 1 dm3 oraz 2,67 g na
100 g suchej substancji.
Wydajność wyodrębnienia laktozy z serwatki wyniosła 25,59 g na 1 dm3 oraz 70,89 g na
100 g suchej substancji.Na podstawie wyników wywnioskować można że uzysk laktozy z serwatki jest znacznie większy niż albumin.
Błędy mogą być spowodowane stratami produktów podczas wykonywanych czynności takich jak: sączenie, suszenie, przenoszenie roztworów.