Pytania z PCR 2, Studia Biotechnologia, Semestr 7 - II stopnia - mikrobiologia molekularna, Metody PCR


  1. W metodzie 5' Race PCR używany jest enzym transfrazy nukleotydów terminalnych (TNT). Wyjaśnij jakie jest jego działanie, podaj substraty i produkty reakcji katalizowanej przez TNT. Dlaczego matryca dla tego enzymu musi byś specjalnie oczyszczona? W jaki sposób można przeprowadzić oczyszczanie matrycy?

  2. Narysuj schematycznie startery do amplifikacji sekwencji kodującej białko przeznaczonej do wklonowania w wektor ekspresyjny za pomocą enzymów restrykcyjnych. Produkt białkowy powinien posiadać znaczniki na N- i C-końcu.

  3. Jakie jest prawdopodobieństwo wprowadzenia błędu do sekwencji kodującej białko o masie 110 kDa przez polimerazę Taq? Podać objaśnienia do przeprowadzonych obliczeń.

  4. Obliczyć całkowity czas działania programu termocyklera dla amplifikacji fragmentu o długości 2 kbp przez polimerazę Taq obejmujący 20 cykli. (dane w oryginalnym zadaniu mogły się różnić)

  5. Opisz krótko technikę Real time PCR wykorzystującą barwniki interkalujące w dwuniciowe DNA. W jaki sposób sprawdza się jednorodność uzyskanych produktów reakcji?

  6. Nie uzyskano w reakcji PCR pożądanych produktów. Startery zostały zaprojektowane, a reakcja przeprowadzona zgodnie z ogólnie przyjętymi zasadami. Jakie mogły być tego przyczyny? Zaproponuj zmiany jakie można wprowadzić w celu poprawienia wyników eksperymentu. Wyjaśnij jaki wpływ mają te zmiany na przebieg reakcji.



Wyszukiwarka

Podobne podstrony:
Zasady projektowania starterow, Studia Biotechnologia, Semestr 7 - II stopnia - mikrobiologia moleku
Dla wektorów z miejscem polilinkerowym, Studia Biotechnologia, Semestr 7 - II stopnia - mikrobiologi
14.10, Studia Biotechnologia, Semestr 7 - II stopnia - mikrobiologia molekularna, Metagenomika
Mikrobiologia ogólna- Pytania opracowane, Studia Biotechnologia, Semestr 3, Mikrobiologia ogólna
Fizyka - pytania egzaminacyjne, Studia, ZiIP, SEMESTR II, Fizyka
pytania sgs, Studia - Socjologia - Semestr II, Socjologia grup społecznych, Kolokwia i Egazmin
Pytania termin I, Studia, AiR, SEMESTR II, TSiIW
Przykładowe pytania z geologii`07, STUDIA, Polibuda - semestr II, Geologia, geologia
Pytania z mikrobiologii - pierwszy termin, Studia Biotechnologia, Semestr 4, Mikrobiologia przemysło
Pytania na kartkówke 12.04.08, Studia, ZiIP, SEMESTR II, Materiały metalowe
pytania pedagogika, Studia - resocjalizacja - Tarnów, I,II,III semestr
Pytania egzaminacyjne-MPT, Studia, studia mgr I semestr, II sem, MPT
socjologia wykłady budrewicz I semestr II stopnia studnia, Studia, Rok 2, Socjologia, socjologia
pytania na matbud 1, STUDIA budownictwo, SEMESTR II, materiały budowlane
Kwas cytrynowy, Studia, II semestr II rok, Mikrobiologia przemysłowa
Geologia - pytania, STUDIA, Polibuda - semestr II, Geologia
Pytania z zerowki, Studia PG, Semestr 02, Fizyka II, Egzamin

więcej podobnych podstron