KONSERWACJA PREPARATÓW HISTOLOGICZNYCH

Preparaty po zabarwieniu muszą być odpowiednio zabezpieczone, ponieważ są nietrwałe(wysychają, pękają, odpadają od szkiełka, odbarwiają się). W tym celu zamykamy je w odpowiednim medium.

Wybór środka konserwującego zależy od: techniki histologicznej, wykrywanych składników, np. skrawki żelatynowe uwodnione zamykamy glicerożelatyną wg Kaisera lub syropem Apathy´ego(wykrywanie lipidów), skrawki parafinowe konserwujemy balsamem kanadyjskim i żywicami syntetycznymi.

Preparaty parafinowe zamykamy po dokładnym odwodnieniu i prześwietleniu w żywicach naturalnych lub syntetycznych. Należą do nich: balsam kanadyjski(naturalna żywica), cedax, DPX, montex i inne.

Wszystkie media muszą spełniać następujące warunki:

- muszą być przejrzyste, bezbarwne

- nie mogą krystalizować

- muszą być płynne w zamkniętym preparacie

- muszą mieć współczynnik załamania światła zbliżony do szkła aby uniknąć w czasie oglądania uginania promieni świetlnych(ok.1.34-1,5)

- nie powinny odbarwiać preparatu

Preparat po zabarwieniu musi być natychmiast zamknięty, nie można dopuścić do całkowitego odparowania ksylenu, ponieważ preparat pęka, odbarwia się i zamknie się z pęcherzykami powietrza, pod którymi powstają odbarwienia. Maksymalnie czas od wyjęcia preparatu z ksylenu do zamknięcia balsamem wynosi 25 -30 sek.

Do zamykania preparatów najlepiej używać zobojętnionego balsamu kanadyjskiego lub salicylowanego o konsystencji ciepłego płynnego miodu. Gęściejszy balsam powoduje powstanie grubej warstwy zamykającej, co utrudnia obserwację preparatu(uginanie promienia), zbyt rzadki balsam powoduje powstawanie pęcherzyków.

KOLEJNOŚĆ CZYNNOŚCI

1. Szkiełko nakrywkowe wytrzeć z pyłu szklanego bawełnianą ściereczką

2. Nanieść na szkiełko nakrywkowe kroplę balsamu kanadyjskiego lub innego medium o konsystencji ciepłego, płynnego miodu

3. Wyjąć preparat z ksylenu I , sprawdzić pod lampą po której stronie szkiełka podstawowego jest preparat(obserwacja cienia) i natychmiast przystąpić do zamykania

4. Odwrócić preparat i dotknąć do kropli balsamu(nie dociskać) i natychmiast odwrócić. Balsam rozprowadza się wzdłuż powierzchni szkiełka nakrywkowego siłami włosowatości.

5. Preparat wytrzeć z nadmiaru ksylenu od spodu i wzdłuż powierzchni szkiełka nakrywkowego unikając jego przesunięcia(uszkodzenie preparatu)

6. Preparat opisać ołówkiem diamentowym lub specjalnym pisakiem do szkła: nazwa narządu, metoda barwienia, data wykonania preparatu

7. Preparat histologiczny umieścić w odpowiedniej kasetce w termostacie do wyschnięcia.