Alicja Bembnista

Paulina Czerniak

Agnieszka Nowak

Identyfikacja cukrów metodą chromatografii bibułowej.

Na pasku bibuły zaznaczyłam linię startu. Na tą linię naniosłam 4 punkty, na które naniosłam mikropipetą po 10 kropli na każdy 1 % roztwory cukrów (glukozy, rybozy, fruktozy i próby badanej). Po naniesieniu każdą kroplę suszyłam w strumieniu ciepłego powietrza. Następnie umieściłam bibułę w komorze chromatograficznej z układem rozwijającym, chromatograf rozwijałam przez 65min. Po tym czasie wyjęłam chromatogram z komory, zaznaczyłam ołówkiem czoło układu rozwijającego i suszyłam w temperaturze 150-200’C do momętu wywołania plam (10 – 15 min.)

Rf= $\frac{droga,\ ktora\ przebyla\ badana\ substancja\ \lbrack cm\rbrack}{droga,\ ktora\ przebyl\ uklad\ rozwijajacy}$

Glukoza: Rf = $\frac{3,3}{7,7}$ = 0,423 cm

Ryboza: Rf = $\frac{4,25}{7,7}$ = 0,552 cm

Fruktoza: Rf: = $\frac{3,4}{7,6}$ = 0,447 cm

Próba badana: Rf = $\frac{4,5}{7,6}$ = 0,592 cm

Naszą próbą badaną była ryboza.

Oznaczanie laktozy kolorymetryczną metodą Meriera:

Do 2 cm³ rozcieńczonego mleka dodałam 1 kroplę 80% roztworu fenolu oraz 6 cm³ stężonego kwasu siarkowego. Po ochłodzeniu zmierzyła w kolorymetrze intensywność pomarańczowego zabarwienia, które zależy od stężenia laktozy.

Jako próby kontrolnej użyłam wody destylowanej. Intensywność zabarwienia mierzyłam na spektrofotometrze przy długości fali 485 nm

1mg – 1000 µg

X – 135 µg

0,236 – 135 µg laktozy / 2cm³

1mg = 1000 µg

0,135 mg / 2cm³

0,068 mg / m³

0,135 - 2cm³

X - 1cm³

X=0,068 mg / cm³

0,068 * 100% = 6,8 mg%