Judyta Baczmaga
W-7 Ochrona Środowiska
Nr albumu 206069

MIKROBIOLOGIA - SPRAWOZDANIE Nr 1

Temat 1: Morfologia komórki i kolonii. Barwienie pozytywne proste i barwienie negatywne

1. Cel ćwiczenia

Celem zajęć było określenie morfologii komórek i kolonii bakterii. Zapoznanie się z metodami prostego i negatywnego barwienia preparatów.

1. Część doświadczenia

   1. Morfologia komórki – wykonanie barwienia prostego błękitem metylenowym

Barwienie błękitem metylenowym wykonano dla wybranych szczepów bakteryjnych należących do gatunków: Sarcina lutea oraz Bacillus cerreus. Odtłuszczono szkiełko, wyżarzono w płomieniu palnika ezę, korek i wylot próbówki. Za pomocą ezy pobrano materiał z probówki, zrobiono rozmaz na odłuszczonym szkiełku i odstawiono do wyschnięcia. Następnie wykonano utrwalenie termiczne (trzykrotnie przesunięto szkiełkiem z preparatem nad płomieniem). Wykonano barwienie pozytywne, stosując barwnik: błękit metylenowy. Preparat odstawiono na 1,5 minuty, następnie polano wodą destylowaną i osuszono. Na gotowy preparat nałożono kroplę olejku immersyjnego i obserwowano pod mikroskopem z powiększeniem 100x. Wyniki obserwacji zamieszczono na rysunkach 3.1.1. oraz 3.1.2

1. Morfologia komórki – wykonanie barwienia negatywnego.

Preparat przygotowano i utrwalono w taki sam sposób jak w przypadku barwienia prostego. Barwienie wykonano dla wybranych szczepów bakteryjnych należących do gatunków: Sarcina lutea oraz Bacillus cerreus. W barwieniu negatywnym zastsowano nigrozynę. Po nałożeniu barwnika (nigrozyny) na preparat, wykonano rozmaz drugim szkiełkiem, pod kątem 45°. Po wyschnięciu preparatu, oglądano go pod imersją z powiększeniem 100x. Wyniki obserwacji zamieszczono na rysunkach 3.2.1. i 3.2.2.

1. Obserwacji morfologii kolonii

Spośród wyrosłych na pożywce agarowej na płytce Petriego wybrano jedną kolonię – Candida lipolityca. Opisano ich morfologię uwzględniając takie cechy jak kształt, brzeg, powierzchnia, struktura, wyniosłość ponad powierzchnie, kolor, przejrzystość, konsystencja. Wyniki obserwacji zamieszczono w pkt 3.3.

1. Wyniki
   
   3.1. Morfologia komórki – wykonanie barwienia prostego błękitem metylenowym - Sarcina lutea (1) i Bacillus cerreus (2):

1 2

3.2. Morfologia komórki – wykonanie barwienia negatywnego - Bacillus cereus (1) i Sarcina lutea (2):

1 2

3.3. Obserwacja morfologii kolonii
Candida lipolityca:

• kształt – nieregularny

• brzeg – zatokowaty

• powierzchnia – matowa szorstka

• struktura – ziarnista

• wyniosłość ponad powierzchnię – wypukła, kopulasta ze środkiem wzniesionym w postaci guziczka

• kolor – biała, barwa w świetle odbitym i przepuszczającym

• przejrzystość – mętna, nieprzejrzysta

• konsystencja – sucha

1. Wnioski
   Celem ćwiczenia było określenie morfologii Sarcina lutea oraz Bacillus cereus. Błękit metylenowy oraz nigrozyna posiadają właściwości, dzięki którym można było zaobserwować wymienione wyżej bakterie. Przy użyciu błękitu, czyli podczas barwienia pozytywnego zaobserwowano bakterie, które zabarwiły się na ciemny fiolet. Natomiast przy użyciu nigrozyny, tło zostało zabarwione na jasny fiolet, a bakterie pozostały bezbarwne. Rozkład komórek bakterii w badanym preparacie był różny. Na rysunku 3.1.1. wyraźnie widać że zawiesina była gęsta i bakterie są usytuowane praktycznie w jednym miejscu, natomiast na rysunku 3.1.2. są one rozstawione w większych odległościach, co wskazuje na rzadszą zawiesinę. Komórki Sarcina lutea bardzo drobne, kuliste, natomiast Bacillus cereus kształtu podłużnego, nitkowatego.