Aminokwasy

Wykrywanie aminokwasów:

1. Reakcja z kwasem azotowym (III) z utworzeniem hydroksykwasu – wydzielają się bezbarwne i bezwonne pęcherzyki azotu

Reakcje barwne charakterystyczne dla aminokwasów:

1. Reakcja z ninhydryną - dla aminokwasów zawierających gr aminową w pozycji α w stosunku do grupy –COOH

2 etapy:

• Aminokwas utleniony do aldehydu, ninhydryna zredukowana

• Kondensacja 2 cząsteczek: utlenionej i zredukowanej

Powstaje niebieski kompleks

Pozytywny wynik też dla białek, peptydów, niektórych amin, amoniaku.

1. Reakcja dla cysteiny – na obecność grupy tiolowej –SH

Min. cysteina, cysteina i metionina

Powstaje ciemno-popielaty osad

1. Reakcja Sakaguchi dla argininy - Związki z wolną gr. Guanidynową np. arginina

Powstaje pomarańczowoczerwony kompleks

1. Reakcja ksantoproteinowa – na pierścień aromatyczny ->nitrowanie pierścienia

Fenyloalanina, tyrozyna, tryptofan

Pomarańczowe zabarwienie

1. Reakcja dla układu indolowego w tryptofanie

->reakcja Adamkiewicza i Hopkinsa - z kwasem gliksalowym

->reakcja Voiseneta – z aldehydem mrówkowym

Fioletowo zabarwiony produkt

Białka

1. Białka w obecności kwasów – zachowują się jak zasada -> właściwości buforujące

-3 krople zieleni bromokrezolowej, miareczkujemy HCl aż do uzyskania barwy żółtej

1. Białka w obecności zasad – zachowują się jak kwasy

-3 krople błękitu tymolowego, miareczkujemy NaOH, aż do uzyskania barwy niebieskiej

1. Wyznaczanie punktu izoelektrycznego – w punkcie izoelektrycznym białka łączą się w skupiska(agregacja) i mogą wypaść z roztworu(koagulacja). Ładunek zapobiega koagulacji.

2. Denaturacja białek

• Cieplna – zrywanie wiązań wodorowych

• Pod wpływem alkoholu(np. etanol) – osłabienie oddziaływań hydrofobowych

• Pod wpłyem stężonego kwasu siarkowego – nie wytrąca białek z roztworu mimo denaturacji!

• Strącanie białka za pomocą kationów(soel metali ciężkich)

-z Fe Cl₃ – brunatny osad

-z CuSO₄ – jasnobłękitny osad

• Strącanie białka za pomocą anionów

-z kwasem trichlorooctowym – biały osad

1. Reakcje barwne białek:

• Wykrywanie: reakcja biuretowa – więcej niż 2 wiązania peptydowe

Barwne kompleksy z jonami miedzi 2+ - niebiesko-fioletowe, ale intensywność zabarwienia zależy odbudowy łańcucha. W przypadku niezbyt długich łańcuchów – czerwono-fioletowe

• Reakcja Libermana – na obecność gr węglowodanowej

-wszystkie glikoproteidy

-zabarwienie fiołkowe