Laboratorium 16, II rok, II rok CM UMK, Giełdy, 2 rok, II rok, biochemia


Laboratorium 16 N I E E N Z Y M A T Y C Z N E S K Ł A D N I K I K R W I

Ćwiczenie 1. Reakcja benzydynowa.

Do jednej kropli krwi rozcieńczonej 1 : 10 dodaj 1 mL wody, 1 kroplę roztworu benzydyny oraz 1 kroplę 3% roztworu H2O2. Zaobserwuj zmianę zabarwienia i sformułuj wniosek.

Ćwiczenie 2. Otrzymywanie kwaśnej i zasadowej hematyny.

Do dwóch probówek wlej po 1 mL krwi rozcieńczonej 1 : 10. Następnie do jednej probówki dodaj 1 kroplę 2 M roztworu NaOH, a do drugiej - 1 kroplę 2 M roztworu HCl. Zaobserwuj zmiany w zabarwieniu w obu probówkach i sformułuj wnioski.

Ćwiczenie 3. Wykrywanie żelaza w hemoglobinie.

Do 3 kropli krwi rozcieńczonej 1 : 10 dodaj 0,5 mL 60% roztworu HClO4 (uwaga: jest to środek żrący!) oraz 0,5 mL 30% roztworu H2O2 (perhydrol). Ogrzewaj probówkę przez około 15 minut we wrzącej łaźni wodnej - do uzyskania całkowitego odbarwienia roztworu. Po ostudzeniu probówki pod bieżącą wodą, dodaj kilka kropli K4[Fe(CN)6]. Zanotuj zmianę barwy i sformułuj wniosek (nazwij powstały kompleks!).

Ćwiczenie 4. Ilościowe oznaczanie Hb metodą cyjano-methemoglobinową.

Do probówki zawierającej 2,5 mL odczynnika Drabkina (uwaga: jest to środek trujący!) dodaj 10 μL krwi. Wymieszaj próbę i odstaw na 20 minut. Po tym czasie zmierz absorbancję próby przy długości fali λ = 540 nm, używając odczynnika Drabkina jako próby ślepej. Następnie wlej do kuwetki 1,5 mL wzorcowego roztworu methemoglobiny i zmierz absorbancję próby wzorcowej przy tej samej długości fali. Następnie oblicz stężenie hemoglobiny według wzoru:

stężenie Hb [g/100 mL] = (Apróba badana/Apróba wzorcowa) × Kwzorzec

Ćwiczenie 5. Wykrywanie składników nieorganicznych w surowicy krwi.

  1. odbiałczanie surowicy za pomocą TCA

Do probówki odmierz 2 mL surowicy oraz 4 mL wody, wymieszaj i dodaj 1,5 mL 20% roztworu TCA. Odstaw probówkę na 15 minut, a następnie przesącz przez bibułę filtracyjną. Uzyskany preparat odbiałczonej surowicy wykorzystaj do wykonania doświadczeń b - d.

  1. wykrywanie jonów Ca2+

Do 0,5 mL odbiałczonej surowicy dodaj 0,5 mL roztworu szczawianu amonowego. Pocieraj ścianki probówki bagietką w celu zainicjowania krystalizacji. Wynik zinterpretuj zapisując odpowiednie równanie reakcji.

  1. wykrywanie jonów Cl-

Do 0,5 mL odbiałczonej surowicy dodaj 5 kropel stężonego roztworu HNO3 oraz kilka kropli 0,1 M roztworu AgNO3 aż do wytrącenia osadu. Wynik zinterpretuj zapisując odpowiednie równanie reakcji.

  1. wykrywanie jonow PO43-

Do 0,5 mL odbiałczonej surowicy dodaj 0,5 mL 2,5% roztworu molibdenianu amonu i ogrzewaj przez 5 minut we wrzącej łaźni wodnej. Wynik zinterpretuj zapisując odpowiednie równanie reakcji.

Ćwiczenie 6. Wykrywanie lipidów w surowicy krwi.

Do 0,5 mL surowicy dodaj 4,5 mL 1% roztworu fenolu w roztworze NaCl. Wytrząśnij i pozostaw na 30 minut. Zaobserwuj zmętnienie.

Ćwiczenie 7. Wykrywanie bilirubiny w surowicy krwi.

Do 3 probówek napipetuj po 1 mL surowicy. Do 1 probówki dodaj 0,5 mL etanolu i 0,5 mL odczynnika dwuazowego (odczyn pośredni), do 2 probówki - 0,5 mL odczynnika dwuazowego (odczyn bezpośredni), a do 3 probówki - 0,5 mL wody destylowanej (próba kontrolna). Odstaw probówki na 30 minut. Zaobserwuj zmiany barwy w probówkach i sformułuj wnioski.

Ćwiczenie 8. Oznaczanie stężenia kwasu moczowego w surowicy krwi metodą enzymatyczną.

Wykonaj zgodnie z załączoną instrukcją.



Wyszukiwarka

Podobne podstrony:
Laboratorium 18, II rok, II rok CM UMK, Giełdy, od Joe, biochemia
Laboratorium 4 CHROMATOGRAFIAI, II rok, II rok CM UMK, Giełdy, 2 rok, II rok, biochemia
Laboratorium 2 BIALKA, II rok, II rok CM UMK, Giełdy, 2 rok, biochemia, koło 1
laboratorium 14, II rok, II rok CM UMK, Giełdy, 2 rok, II rok, biochemia
Laboratorium 19, II rok, II rok CM UMK, Giełdy, od Joe, biochemia, BIOCHEMIA, GIEŁDY - KOLOKWIA, Gie
Laboratorium 11 OKSYDOREDUKTAZY, II rok, II rok CM UMK, Giełdy, od Joe, biochemia
pokarmowka gielda, II rok, II rok CM UMK, Giełdy, od Joe, FIZJOLOGIA, KOLOKWIA, NEUROFIZJOLOGIA, gie
egzamin 2007, II rok, II rok CM UMK, Giełdy, 2 rok, II rok, giełdy od Nura, fizjo, egzamin, New fold
żołądek ść 4, II rok, II rok CM UMK, Giełdy, 2 rok, histologia
MELATONINA, II rok, II rok CM UMK, Giełdy, od Joe, biochemia, BIOCHEMIA, GIEŁDY - EGZAMIN, Dodatkowe
lekarski ii rok ii sem, II rok, II rok CM UMK, Giełdy, 2 rok, inne
Fizjologia kolo RKZ, II rok, II rok CM UMK, Giełdy, od Joe, FIZJOLOGIA, KOLOKWIA, RÓWNOWAGA KWASOWO-
neuron, II rok, II rok CM UMK, Giełdy, 2 rok od Pawła, fizjologia, Opracowanie ćwiczenia
Regulacja przyjmowania pokarmu, II rok, II rok CM UMK, Giełdy, 2 rok, fizjo
Neurofizjologia, II rok, II rok CM UMK, Giełdy, od Joe, FIZJOLOGIA, KOLOKWIA, NEUROFIZJOLOGIA
2007 ---, II rok, II rok CM UMK, Giełdy, 2 rok od Pawła, fizjologia, egzamin, wordy
nerka, II rok, II rok CM UMK, Giełdy, 2 rok, II rok, fizjologia

więcej podobnych podstron