Sprawozdanie
Chromatografia gazowa

Temat: Analiza ilościowa i jakościowa tłuszczu mlecznego na podstawie chromatogramu otrzymanego od prowadzącego.
Cel: Interpretacja przykładowego chromatogramu tłuszczu mlecznego.

Budowa i działanie chromatografu gazowego
1. Butle z gazem - faza ruchoma, detektor.
2. Dozownik - automatyczny lub ręczny.
3. Kolumna - najczęściej wykorzystuje się kolumny typu kapilarnego, które zapewniają wysoką sprawność i dużą rozdzielczość pików. Kolumna umieszczona jest w termostacie.
4. Detektor - wykrywa związki rozdzielone w kolumnie. W chromatografie wykorzystywanym na ćwiczeniach zastosowano detektor płomieniowo-jonizacyjny (FID).

Zasady interpretacji chromatogramu.
Identyfikację związków w chromatografii dokonuje się stosując wzorce związków, np. dla estrów metylowych kwasów tłuszczowych, najczęściej stosowanym jest Supelco 37FAME MIX. Identyfikacji dokonuje się w ten sposób, że:
- nastrzykuje się wzorzec uzyskując chromatogram,
- nastrzykuje się nieznaną próbę,
- porównuje się czasy retencji wzorca z próbą,
- pomocniczo można zastosować znane próby.
Identyfikację składu próby można również przeprowadzić stosując certyfikowane materiały odniesienia, np. tłuszcz wołowy, tłuszcz mleczny.

Analizę ilościową wszystkich związków występujących w próbie przeprowadza się metodą normalizacji wewnętrznej. Metoda ta uwzględnia współczynnik odpowiedzi detektora obliczony jako współczynnik korekcyjny.

Na ćwiczeniach dokonaliśmy analizy chromatogramu wzorca tłuszczu mlecznego, otrzymanego od prowadzącego zajęcia.

Kwas	Area (%)	Współczynnik korekcyjny	Ilość w próbce
C4:0 kwas masłowy	3,00698	1,655693	4,978636
C6:0 kwas kapronowy	2,40792	1,157973	2,788306
C8:0 kwas kaprylowy	1,51727	1,042537	1,58181
C10:0 kwas kaprynowy	3,32560	0,998903	3,321952
C12:0 kwas laurynowy	3,77504	0,9786	3,694254
C14:0 kwas mirystynowy	12,29468	0,955949	11,75309
C16:0 kwas palmitynowy	31,23409	0,961569	30,03373
C16:1 kwas palmitooleinowy	1,43931	0,974981	1,4033
C18:0 kwas stearynowy	10,11277	0,957596	9,683948
C18:1 11t kwas wakcenowy	1,00647	1	1,00647
C18:1 9c kwas oleinowy	19,34913	0,956807	18,51338
C18:2 9c 12c kwas linolowy	1,21705	1,02168	1,243436
C18:3 9c 12c 15c kwas α-linolenowy	0,40405	1,079026	0,43598
C18:2 9c 11t kwas CLA	0,48720	1	0,4872
C20:0	0,08241	1,014127	0,083574

• Suma kwasów tłuszczowych od C4:0 do C12:0 wynosi 16,36495816 g/100g tłuszczu,

• suma kwasów tłuszczowych od C14:0 do C20:0 wynosi 74,64411108 g/100g tłuszczu,

• suma kwasów tłuszczowych jednonienasyconych wynosi 19,91668293 g/100g tłuszczu,

• suma kwasów tłuszczowych wielonienasyconych wynosi 2,166616099 g/100g tłuszczu,

• suma kwasów tłuszczowych C18:2 9c11t (CLA) i C18:1 11t (wakcenowego) wynosi 1,49367 g/100g tłuszczu.

---