Wykonanie: Mazurkiewicz Marek; Adrian Orzechowski

Enzymologia - zajęcia 1 2011-12-06

Temat: Otrzymywanie inwertazy (β-fruktofuranozydaza) z drożdży i badanie jej właściwości kinetycznych

cel: poznanie właściwości inwertazy

zasada metody: W celu wyekstrahowania inwertazy związanej ze ścianą komórkową roztarto drożdże z piaskiem. Enzym oczyszczono poprzez wirowanie. Aktywność enzymu ustalono na podstawie oznaczenia ilości cukrów prostych powstałych z rozkładu sacharozy i rafinozy. Użyto w tym celu odczynnika Somogyi (otrzymano Cu₂O w ilości odpowiadającej ilości cukrów) i odczynnika Nelsona (który daje błękit molibdenowy w obecności Cu₂O). Absorbancja została zmierzona przy 520 nm

obserwacje:

absorbancja wynosiła:

aktywność była obliczona ze wzoru:

10ml*25ml*50ml*n (sacharozy lub rafinozy) / 2,5g*1ml*1ml*1ml*5min

masa molowa glukozy =180g/mol

---