Sprawozdanie z chromatografii cienkowarstwowej

Celem pierwszego ćwiczenia jest potwierdzenie przydatności chromatografii cienkowarstwowej do rozdziału i identyfikacji barwników roślinnych zawartych w świeżych liściach.

Roztarto w moździerzu liście pietruszki wraz z piaskiem w celu wydobycia z liści barwników. Następnie do otrzymanej papki dodano kilka ml acetonu, położono na mieszaninie małą kulkę z zbitej waty, wciągnięto przez pipetkę Pasteura ekstrakt i włożono do probówki. Za pomocą kapilary naniesiona została próbka ekstraktu na miejsce startu na płytce, i włożono ją do komory do rozwijania chromatografu, do której uprzednio wlana została mieszanina eteru naftowego, toluenu i etanolu w stosunku 8:3:2. Gdy czoło eluenta znalazło się na linii końcowej wyjęto płytkę z komory i obrysowano poszczególne plamki.

Obliczono R_f dla poszczególnych plamek:

Plama żółtozielona - R_f = 0.75- chlorofil B

Plama sinozielona - R_f = 0.8 - chlorofil A

Plama „żółta” - R_f = 0.61 - ksantofile

Plama (kolor wyblakł) - R_f = 1.0- beta karoten

Chromatogram:

Celem drugiego ćwiczenia było wykrycie które z wzorcowych barwników otrzymałem do analizy.

Na płytkę naniesiono roztwory pięciu wzorców i badaną próbkę. Płytkę umieszczono w komorze z eluentem - mieszaninie toluenu i acetonu w stosunku 3:1. Gdy czoło eluenta znalazło się przy linii końcowej wyjęto płytkę z komory, następnie obliczono R_f dla każdego barwnika. Oto wyniki:

• Eozyna - R_f = 0.35

• oranż 2-naftolowy - R_f = 0.37

• Fluoresceina - R_f = 0.13

• Czerwień metylowa - R_f = 0.22

• 1-fenyloazo-2-naftol (Sudan I) - R_f = 0.96

• Moja próbka - R_f = 0.37, R_f = 0.13 R_f = 0.22

Wnioski - moja próbka zawierała następujące barwniki : Fluoresceinę, oranż 2-naftolowy oraz czerwień metylową.

Chromatogram:

---