Odczynniki (firmy EMAPOL)
1. Odczynnik enzymatyczny zawierający: bufor fosforanowy pH 6,5, 4-aminoantypirynę, fenol, peroksydazę, esterazę cholesterolową, oksydazę cholesterolową, azydek sodu (środek konserwujący - unikać kontaktu ze skórą i śluzówkami).
2. Standard cholesterolu o stężeniu 200 mg/dl = 5,17 mmol/1.
Materiał do badań
Surowica osoby zdrowej (SZ) i chorej (SC).
Wykonanie oznaczeń
Oznaczenia wykonujemy w dwóch powtórzeniach.
Do probówek reakcyjnych napipetować:
Próba zerowa |
Standard cholesterolu |
Pr. badana | |
(PZ) |
(SCH) |
(SZ i SC) | |
Odczynnik enzymatyczny |
1000 pl |
1000 pl |
1000 pl |
Pr. badana (SZ i SC) |
10 pl | ||
Standard cholesterolu (SCH) |
10 pl | ||
H20 dest. |
10 pl |
Zawartość probówek wymieszać i inkubować 5 min. w 37°C lub 20 min. w temperaturze pokojowej. Odczytać absorbancję prób (badanych surowic i standardu) w stosunku do próby zerowej w ciągu 60 min. - AA przy długości fali X = 500 nm w 1 cm kuwetach.
Obliczanie i interpretacja wyników
1. Przy pomocy współczynnika kalibracji:
Cchoi. cal. [mg/dl] = 553 X AA; cchoi. cat. [mmol/1] = 14,3 x AA
2. W stosunku do standardu:
AApr. badanej
Cchoi. cal. [rng/dl] = 200 X -
AAstand. chol.
AApr. badanej
Cchoi. cał. [mmol/1] = 5,17 x -
AAstand. chol.
Test może być wykorzystany do analizy prób zawierających nie więcej niż 750 mg/dl = 19,3 mmol/1. Przy wyższym stężeniu rozcieńczyć próbkę 3-razy 0,9% NaCl. Wynik pomnożyć przez 3.
Europejskie Towarzystwo Miażdżycowe rekomenduje poziom cholesterolu około 180 mg/dl do 30 roku życia i około 200 mg/dl powyżej 30 roku życia.
3