CUKROWCE
ODCZYNNIKI: odczynnik Benedicta (odczynnik powstaje w wyniku rozpuszczenia 173 g cytrynianu sodu i 100 g bezwodnego Na2C03 w 700 ml wrzącej wody destylowanej, powolne dodanie po ochłodzeniu 100 ml 17,3 % CuS04*5H20 stale mieszając oraz uzupełnienie wodą do 1000 ml), roztwór glukozy o stężeniu 160 mmol/dm3, roztwór glukozy o nieznanym stężeniu
1. Przygotować wzorcowe stężenia roztworów glukozy - z roztworu glukozy o stężeniu 160 mmol/ dm3 przygotować w probówkach po 0,3 ml roztworów o następujących stężeniach: 80 mmol/dm3, 40 mmol/dm3, 20 mmol/dm3,10 mmol/dm3,0 mmol/dm3.
2. W szóstej probówce umieścić 0,3 ml badanej próbki glukozy, o nieznanym stężeniu.
3. Do wszystkich probówek dodać po 1,5 ml odczynnika Benedicta, wymieszać i pozostawić we wrzącej łaźni wodnej przez około 3 minuty.
4. Sporządzić zależną od stężenia glukozy skalę barw i podać stężenie glukozy w badanej próbce.
Podstawa teoretyczna: Skrobia na skutek reakcji z cząsteczkami jodu barwi się na kolor niebieski. Barwa kompleksu zależy od struktury przestrzennej łańcucha polisacharydu, gdyż cząsteczki jodu wnikają do wnętrza tworzonej przez skrobię spirali. Na jeden skręt takiej spirali tworzonej przez 6 cząsteczek glukozy przypada jedna cząsteczka jodu. Kompleks jodu z amylozą ma inną barwę niż z amylopektyną. Oba te związki są homoglikana-mi, czyli polisacharydami zbudowanymi z jednego rodzaju reszt monosacharydów, w tym wypadku z glukozy, ale różnią się stopniem rozgałęzienia łańcucha. Amyloza nie jest rozgałęziona, a amylopektyna posiada rozgałęzienia. Zabarwienia kompleksu nie obserwuje się w wysokich temperaturach gdyż w takich warunkach spiralnie skręcony łańcuch skrobi ulega rozprostowaniu.
ODCZYNNIKI: 1 % roztwór kleiku skrobiowego, odczynnik Lugola (jod w roztworze jodku potasu)
1. Do około 1 ml roztworu skrobi dodać kilka kropel płynu Lugola.
2. Zaobserwować i wyjaśnić wynik.
3. Zawartość probówki podgrzać.
4. Zaobserwować i wyjaśnić wynik.
5. Zawartość probówki ochłodzić.
6. Zaobserwować i wyjaśnić wynik.
Wykonać próbę Fehlinga dla skrobi (patrz punkt 3.3 tego rozdziału) wraz z próbą ślepą.
163]