ab
n =-,
V
gdzie:
n - liczba komórek w 1 cm3, a - średnia liczba komórek w 1 polu widzenia, b - liczba pól widzenia na powierzchni filtra,
V - objętość filtrowanej wody (cm3).
2. Oznaczanie ogólnej liczby kolonii na podłożu agarowym zwykłym w temp. 22°C po 72 h inkubacji metodą posiewu wgłębnego (lanego).
• Materiały: woda jeziorna.
• Aparatura i szkło: pipety 1 cm3, płytki Petriego.
• Odczynniki: roztwór soli fizjologicznej w probówkach po 9 cm3.
• Pożywki: podłoże agarowe zwykłe.
• Wykonanie:
- metoda posiewu wgłębnego, „płytek lanych” (rozdz. 9);
- przygotować rozcieńczenia badanej wody wg schematu (rys. 11.3);
- jałową pipetą przenieść po 1 cm3 badanego materiału z określonego rozcieńczenia do płytki Petriego. Posiew wykonać w trzech powtórzeniach dla każdego rozcieńczenia;
- rozpuścić pożywkę agarową i schłodzić ją do temp. 45-50°C;
- uchylić wieczko płytki Petriego, wlać ok. 10 cm3 upłynnionej pożywki, zamknąć wieczko i ruchem kolistym wymieszać wysiany materiał z pożywką;
- po zestaleniu pożywki odwrócić płytkę dnem do góry i wstawić do termostatu o temp. 22°C na 72 h inkubacji;
- po inkubacji policzyć liczbę wyrosłych kolonii, dla powtórzeń danego rozcieńczenia obliczyć średnią;
- określić liczebność bakterii w 1 cm3 badanej wody wg wzoru:
a
n=v’
gdzie:
n - liczba bakterii w 1 cm3, a - liczba kolonii,
V - objętość badanego materiału (cm3).
3. Oznaczanie ogólnej liczby bakterii z grupy pałeczki okrężnicy na podłożu Eijkmana w temp. 37°C po 48 h inkubacji metodą miana i NPL.
• Materiały: woda jeziorna.
• Aparatura i szkło: pipety 1 cm3.
• Odczynniki: roztwór soli fizjologicznej w probówkach po 9 cm3.
• Pożywki: pożywka Eijkmana.
98