img208

Tabela 15.2

Ocena sanitamo-bakteriologiczna gleby

Stan gleby	Liczba bakterii saprofitycznych w 1 g gleby	Miano coli	Miano bakterii anaerobowych CClostridium perfringens)
Czysta	1-2,5 ■ 10^6	> 1,0	> 0,1
Umiarkowanie zanieczyszczona	1-2,5 ■ 10^6	1,0-0,01	0,1-0,001
Zanieczyszczona	> 2,5 ■ 10^6	0,01-0,001	0,001-0,0001
Silnie zanieczyszczona	> 10 10^6	< 0,001	< 0,0001

Wykonanie ćwiczenia

Analiza bakteriologiczna gleb na potrzeby sanitarne

•    Materiały: gleba.

•    Aparatura i szkło: pipety 1 cm³, płytki Petriego, probówki, wytrząsarka, termostaty.

•    Odczynniki: płyn fizjologiczny po 90 cm³ w kolbach Erlenmeyera i po 9 cm³ w probówkach.

•    Pożywki: podłoże agarowe zwykłe, podłoże Wilson-Blaira, podłoże Eijkmana.

•    Wykonanie:

1.    Pobór prób:

Przy wykonywaniu analizy mikrobiologicznej gleby istotne jest właściwe wyznaczenie miejsca poboru próby. Należy zwrócić uwagę na warunki klimatyczne, porę roku, strukturę gleby, sposoby nawożenia, szatę roślinną, umiejscowienie źródeł zanieczyszczenia, kanalizacji itp. Na badanym terenie należy wyznaczyć dwa obszary poboru prób o powierzchni 25 m². Wytypować 5 stanowisk poboru prób. Z każdego z nich pobrać do sterylnego słoja próbkę gleby z powierzchni 5 cm² (do głębokości 20 cm) w ilości 200-300 g. Pobrane próbki dokładnie wymieszać w celu uśrednienia próby. Słój zamknąć i dołączyć etykietę z informacją dotyczącą daty i miejsca poboru próby. Badanie bakteriologiczne należy wykonać w dniu poboru próby. Na czas transportu do laboratorium lub przechowania pobraną próbę umieścić w temp. +4°C na okres nie dłuższy niż 24 h.

2.    Wykonanie rozcieńczeń do oznaczenia bakterii nieprzetrwalnikujących:

-    z gleby wykonać naważkę 10 g, przenieść ją do kolby Erlenmeyera z 90 cm³ płynu fizjologicznego i wytrząsać ją na wytrząsarce przez 15 min, następnie pozostawić na ok. 5 min do sedymentacji;

-    tak przygotowany roztwór glebowy jest rozcieńczeniem 10^_1. Z niego należy wykonać kolejne rozcieńczenia (10^-2, 10^-3 itd.) według schematu (rys. 11.3).

3.    Oznaczenie liczebności bakterii saprofitycznych:

-    wykonać posiew metodą płytek lanych (rozdz. 9), biorąc po 1 cm³ zawiesiny glebowej w trzech powtórzeniach z przygotowanych rozcieńczeń;

133