20110407214

Marana HW*»k

Ćwiczenie laboratoryjne 7

Charakterystyka kwaśnej fosfatazy z homogenatu ziemniaka OŚ— aiirmwf ffc

•    wpiiuerw optimum pH dla reakcji katalizowanej przez kwaśną fosfatazę

•    wyweczcree szybkości początkowej reakcji katalizowanej przez kwaśną fosfatazę

Wprowadzenie

Enzymy są bwfcatakzatorami umożliwiającymi przebieg reakcji enzymatycznej w komórce poprzez obniżenie energii aktywacji katalizowanej reakcji. Do cech charakteryzujących enzymy jako fcatafizatory należą:

•    wydajność katalityczna - zdolność przyśpieszania reakcji 10*-10^u razy,

« swoistość pod względem substratu, reakcji lub substratu I reakcji,

•    działanie w łagodnych warunkach temperatury i pH,

•    zmiana aktywności enzymów pod wpływem czynników środowiskowych I dostosowanie jej do aktualnych potrzeb komórki czy organizmu.

Podstawy kinetyki enzymatyczną]

Kinetyka enzymatyczna stanowi dział enzymołogR zajmujący się zagadnieniami związanymi z szybkością reakcji katalizowanych enzymatycznie. Szybkość reakcji enzymatycznej (V) Jest miarą katalitycznego działania enzymu I jest one w pewnym zakresie proporcjonalna do stężenia substancji reagujących; wyznacza Ją przyrost stężenia produktu reakcji w czasie. Miarą szybkości reakcji w danym momencie jest więc wzrost stężenia produktu, jaki następuje w jednostce czasu. Przy stałym stężeniu enzymu i substratu szybkość powstawania produktu reakcji powinna być wprost proporcjonalna do czasu reakcji, W rzeczywistości tylko w początkowej fazie reakcja ta jest reakcją pierwszego rzędu (Rys.l), co znaczy, że szybkość działania enzymu jest liniową funkcję czasu - Jest to tzw, szybkość początkowa reakcji enzymatycznej (V₀),

RysA Wzrost Roid produktu reakcji enzymatycznej w ciut*

WStoić v« uzyskuje s* era wykreślenie Wl proswj stycznej do poczytanego odarta krzywej, poczynaj*: od czasu wwwgo. Nachylenie tej prostej ma wartość V*. Dta badań kinetyki eruymdw n ntewyMe ważne jest więc określenie aaw reakcji, w którym przyrost prewatu reakcji enzymatycznej jest wpma proporcjonalny do aasu.

1