7

114 Enzymy

4.2. SZYBKOŚĆ REAKCJI ENZYMATYCZNEJ

Miarą aktywności enzymu jest szybkość katalizowanej reakcji, mierzona przyrost; produktu lub ubytkiem substratu w czasie.

_y _ ~d[S] _ d[P] dt dt

[S] - stężenie substratu, [P] - stężenie produktu

W czasie trwania reakcji enzymatycznej, przy stałym stężeniu enzymu i przy określoń\r początkowym stężeniu substratu, możemy wyróżnić kilka etapów (Rys. 4.5).

Rys. 4.5 Zależność stężenia produktu (A) i szybkości reakcji enzymatycznej (B) od czasu jej trwania

Początkowo, przez krótki okres: w czasie od t₀ do t_n, przyrost produktów reakcji enzymatycznej jest wprost proporcjonalny do czasu jej trwania (Rys. 4.5 A) i obserwujem> stałą szybkość reakcji tzw. szybkość początkową - v₀. Oznacza to. że w równych odstępach czasu enzym katalizuje powstawanie takiej samej ilości produktu (Rys. 4.5 B). W czasie dłuższego trwania reakcji enzymatycznej szybkość reakcji maleje, ponieważ ilość powstającego produktu przestaje być wprost proporcjonalna do czasu. Przyczyną zmniejszania się przyrostu ilości produktu i tym samym szybkości reakcji enzymatycznej w miarę jej trwania (Rys. 4.5 B) jest wyczerpywanie się substratów, a także w niektórych przypadkach hamowanie aktywności enzymu przez produkty reakcji, reakcje przebiegające w przeciwnym kierunku lub postępująca inaktywacja enzymu w czasie procesu katalizy. W związku z tym, w badaniach enzymologicznych należy bezwzględnie zadbać o to, żeby warunki reakcji i czas jej trwania były lak dobrane, aby reakcja przebiegała ze stałą szybkością.

4.3. SPOSOBY OKREŚLANIA AKTYWNOŚCI ENZYMU

Pomiar szybkości katalizowanej reakcji umożliwia określenie aktywności enzymu. Aby ułatwić porównywanie aktywności preparatów enzymatycznych, Komisja Enzymowa Międzynarodowej Unii Biochemicznej wprowadziła pojęcie międzynarodowej