HPLC 1

Chemiczna analiza instrumentalna - ćwiczenia [MSZ]

Wysokosprawna chromatografia cieczowa /HPLC/

WSTĘP

Chromatografia jest jedną z najbardziej rozpowszechnionych metod instrumentalnych w chemii analitycznej, a w analizie związków organicznych zajmuje pozycję lidera. Zapewnia ona możliwość identyfikacji substancji oraz ich ilościowej analizy, nawet w niskich stężeniach w obecności innych związków.

Możliwość rozdzielania chromatograficznego substancji wynika z faktu, że poszczególne składniki próbki w niejednakowym stopniu ulegają podziałowi między dwie nie mieszające

się fazy, przy czym jedna z tych faz jest ruchoma (tzw. eluent), a druga stanowi nieruchome

' ........... ... . .... - ...

wypełnienie kolumny chromatograficznej (faza stacjonarna).

Zagadnienia do opracowania:

- podział metod chromatograficznych,

- co to jest retencja (R), czas retencji (tR), objętość retencji (V_R),

- kształt piku a izotermy podziału,

- co 10 jest współczynnik retencji k ,

- jak wyznaczyć czas retencji substancji nie zatrzymywanej na kolumnie,

- przyczyny rozmycie pików chromatograficznych,

- co to jest sprawność kolumny chromatograficznej i od czego zależy,

- co oznacza termin „wysokość równoważna półce teoretycznej”,

- narysować zależność wysokości półki teoretycznej H od prędkości fazy ruchomej w chromatografii gazowej i cieczowej,

- jakie parametry charakteryzują zależność rozdzielczą kolumny,

- charakterystyka wypełnień mikroporowatych,

- fazy stacjonarne w chromatografii cieczowej,

- detektory w chromatografii cieczowej,

- elucja izokratyczna i gradientowa,

- chromatografia w odwróconym układzie faz,

- analiza jakościowa i ilościowa w chromatografii cieczowej.

LITERATURA OBOWIĄZUJĄCA

Z. Witkiewicz, Podstawy chromatografii, WNT, 1992, 2005.