Nowy 5

Pierwsza pochodna

automatycznie oblicza Cp przez wyznaczenie punktów najszybciej pojawiających się na krzywej

Względna metoda ilościowa

•    nie wymaga standardów - krzywej standardowej (jest to metoda porównawcza)

•    stosowanych jest kilka barwników (min. 2)

•    wyniki są wyrażane jako stosunek (ułamek), nie jako absolutne wartości

• powszechnie stosowane w określaniu ekspresji genów

Całkowita metoda ilościowa

Wymaga sporządzenia krzywej standardowej

•    próby nieznane i standardy zawierają zwykle te same sekwencje docelowe

•    wymaga kilku replikacji dla uzyskania powtarzalnych danych

•    wyniki są przedstawione w postaci ilości kopii

•    można używać więcej niż jednego barwnika w danej reakcji

•    stosowane przy bakteryjnej detekcji i ekspresji genetycznej

Krzywa dysocjacji

78 80 82 84 86 88 90 92 94 96 98

Temperaturę

wykreślając zmiany fluorescencji w zależności od zmiany temperatury jest możliwe określenie punktu, w którym następuje rozdzielenie nici DNA

■ odczyty prowadzone są co 0,25 - 0,5°C począwszy od momentu przyłączenia primerów do - 95°C

2,000 1,500 5 1,000 S 500 0

-500