1.3. Oznaczanie witaminy C (bezpośrednia redukcyjność) w próbkach intensywnie zabarwionych [2]
Zasada metody
W metodzie tej wykorzystuje się fakt, że w rozpuszczalnikach organicznych (chloroform, benzen, ksylen, nitrobenzen) rozpuszcza się odczynnik Tillmansa, a nie rozpuszczają się barwniki antocyjanowe. Po osiągnięciu końcowego punktu miareczkowania nadmiarowa kropla roztworu barwnika przechodzi do warstwy rozpuszczalnika zabarwiając go na różowo.
Odczynniki, sprzęt i aparatura
>- Roztwór HC1, 2% (w/w),
>- Chloroform,
2,6-djchlorofenoloindofenol
Wykonanie oznaczenia
Oznaczanie bezpośredniej redukcyjności w soku z czarnej porzeczki: 10 cm1 2 3 soku rozcieńczyć HC1 do objętości 100 cm3. Pobrać 10 cm3 rozcieńczonego soku do probówki, dodać 2 cm3 chloroformu i miareczkować barwnikiem Tillmansa (jednocześnie mieszając) do uzyskania barwy lekko różowej w warstwie rozpuszczalnika.
Obliczenia wyników
Uwzględniając miano odczynnika Tillmansa (liczba mg kwasu L-askorbinowego odpowiadająca 1 cm3 odczynnika Tillmansa), jego zużycie podczas miareczkowania oraz rozcieńczenie próbek obliczyć bezpośrednią i ogólną redukcyjność. Wynik podać w mg%.
Interpretacja wyników
Na wynik miareczkowania roztworów witaminy C (bezpośrednia redukcyjność) mają wpływ, oprócz kwasu L-askorbinowego, reduktony białkowe i reduktony cukrowe. Podczas redukcji kwasu L-dehydroaskorbinowego (metoda Pijanowskie-go) do kwasu L-askorbinowego strąceniu ulegają reduktony białkowe. Dlatego na ogólną redukcyjność ma wpływ obecność kwasu L-askorbinowego, kwasu L-dehydroaskorbinowego oraz reduktonów cukrowych, co należy uwzględnić przy interpretacji wyników.
Głównym źródłem witaminy C dla organizmu ludzkiego są świeże owoce i warzywa oraz przetwory z nich otrzymane. Zawartość witaminy C w świeżych owocach
warzy wach jest zróżnicowana, przy czym do szczególnie zasobnych w tę witaminę i
zaliczamy owoce dzikiej róży (200-1000 mg%), czarne porzeczki (100-200 mg%), J
szpinak (70 mg%) i truskawki (60 mg%). Ponadto znaczne ilości witaminy C I zawierają cytryny (40 mg%), kapusta (45 mg%), ziemniaki (20 mg%). Mleko J zawiera 1-2 mg%, kiszona kapusta 30 mg%, sok pitny z czarnej porzeczki 22 | mg% witaminy C.