• wirować z prędkością 150-340 g (1000-1500 obr./min.) przez 30-60 sek.
• reakcję odczytać makroskopowo poprzez delikatne wstrząsanie poszczególnymi probówkami
• wykonać kontrolę wiarygodności ujemnego wyniku PTA-LISS zgodnie z metodyką podaną w pkt 3.2 rozdz. III
• wyniki zapisać w formie protokołu
* PTA-PEG stosowany jest jako dodatkowy i rozstrzygający, w przypadku gdy surowica badana reaguje ze wszystkimi użytymi do badań krwinkami allogenicznymi i autologicznymi w teście LEN, a w PTA-LISS reakcje są ujemne. Ujemny PTA-PEG i ujemny BTA krwinek badanych potwierdza, że reakcje są nieswoiste. Ten bardzo czuły i swoisty test antyglobulinowy jest także przydatny do wykrywania i potwierdzania odpornościowego charakteru przeciwciał wykrytych u kobiet w ciąży [8].
1.3. Przykład protokołu badania przeciwciał
Krwinki |
Metoda |
Wynik badania przeciwciał | ||
LEN |
PTA-LISS |
Kontrola ujemnych wyników PTA-LISS | ||
DCCee nr serii |
obecne lub nieobecne ___ | |||
DccEE nr serii | ||||
dcceeK nr serii | ||||
Autokontrola |
: | |||
Kontrola dodatnia | ||||
Kontrola ujemna |
J
60 1 serologia grup krwi w praktyce
Wykonuje się go w diagnostyce:
- konfliktu serologicznego między matką a płodem
- chorób z autoagresji -powikłań poprzetoczeniowych
Krwinki badane
i
Surowica antyglobulinowa PBS
Krwinki uczulone
0 Rh+ 0 Rh-
I- I
▼ *
Probówka nr 1 - wykrywanie obecności autoprzeciwciał na krwinkach
Probówka nr 2 - kontrola krwinek badanych
Probówka nr 3 i 4 - kon trola dodatnia i ujemna
• przygotować cztery odpowiednio opisane probówki
• dodać po dwie krople 4% zawiesiny w roztworze PBS:
- krwinek badanych - do probówki nr 1 i 2
- krwinek wzorcowych uczulonych grupy 0 Rh+ - do probówki nr 3
- krwinek wzorcowych uczulonych grupy 0 Rh- - do probówki nr 4
• krwinki wirować 3 min. z prędkością 340-680 g (około 1500-2000 obr./min.)
• nadmiar PBS odsączyć na ligninie
• dodać po dwie krople:
- surowicy antyglobulinowej - do probówki nr 1,3,4
- roztworu PBS - do probówki nr 2
• zawartość probówek dokładnie wymieszać przez wstrząsanie
• wirować z prędkością 150-340 g (1000-1500 obr./min.) przez 30-60 sek.
serologia grup krwi w praktyce
I
61