45
śsnieją również obojętne mieszaniny barwników kwaśnych i zasadowych, np. -:ir.vnik Giemzy.
Zależnie od sposobu barwienia wyróżniamy barwienie przyżyciowe i barwie-: e preparatów utrwalonych.
Polega ono na barwieniu żywych komórek drobnoustrojów. Przykładem tego nu barwienia jest barwienie drożdży na żywotność lub obecność substancji zarysowych.
Barwienie preparatów utrwalonych można podzielić na:
a) proste, które polega na zabarwieniu komórek drobnoustrojów tylko jednym
rerwnikiem,
b) złożone, do którego używa się kilku barwników,
c) negatywne, polegające na zabarwieniu tła, podczas gdy komórki drobno-.strojów pozostają nie zabarwione.
Barwienie preparatów utrwalonych obejmuje trzy etapy i wymaga:
- wykonania rozmazu,
- utrwalenia preparatu,
- zabarwienia komórek drobnoustrojów.
WYKONANIE ROZMAZU. Technika sporządzania rozmazu zależy od konsy-rrencji badanego materiału. Jeśli mamy do czynienia z podłożem płynnym, to sporządzenie rozmazu polega na rozprowadzeniu kropli hodowli cienką warstwą na środku odtłuszczonego szkiełka przedmiotowego. Szkiełko odtłuszcza się przez przeciągnięcie go w płomieniu palnika. Rozmaz wykonuje się ezą, a następnie suszy na powietrzu. Jeśli badane drobnoustroje znajdują się na podłożu stałym, to -ówczas należy najpierw za pomocą jałowej ezy na powierzchnię odtłuszczonego szkiełka przedmiotowego nanieść kroplę wody, a następnie ponownie wyjałowioną zza pobrać niewielką ilość kultury, rozprowadzić w kropli w'ody, wykonać rozmaz wysuszyć (rys. 19).
Rysunek 19. Preparat z kroplą i prawidłowo wykonanym rozmazem (wg Wojciechowskiej)
UTRWALANIE PREPARATU. Po wysuszeniu rozmaz należy utrwalić. Utrwali możemy metodą termiczną lub chemiczną.
Metoda termiczna polega na trzykrotnym powolnym przeciąganiu szkiełka rrzedmiotowego z rozmazem w płomieniu palnika. Szkiełko należy trzymać szczypcami, zwrócone rozmazem do góry.