Ćwiczenie 4
*- i wybierz LIPASE. N. ^, pojawi aj, SS^T w którym butelki z ktopiomierzem, Mj
żółciowe Butelki zawierające bufory o różnym pil mają różne kolory ma to pomoc analizować wyniki uzyskiwane w dalszej czeSci doświadczenia. Itaalante hpazy , żólc, bedzie oceniane na podstawie trawienia tłuszczu, jakim jest olej roślinny.
1. Kliknij na probówkę wiszącą najbliżej inkubatora, przenieś ją do uchwytu nr l znajdującego się na górze inkubatora i zwolnij przycisk myszki. Probówka „wskoczy w uchwyt. Powtórz tę czynność wstawiając probówki w uchwyt nr 2, nr 3 itd., aż momentu, gdy wszystkie siedem uchwytów na górze inkubatora zawiera probówki.
2. Napełnij siedem probówek trzema substancjami w następujący sposób:
Probówka #1: lipaza, olej roślinny (vegetable oil), sole żółciowe (bile salts), bufor pH
7.0
Probówka #2: lipaza, olej roślinny (vegetable oil), sole żółciowe (bile salts), bufor pH
Probówka #3: lipaza, olej roślinny (vegetable oil), woda dejonizowana, bufor pH 7.0 Probówka #4: lipaza, woda dejonizowana, sole żółciowe (bile salts), bufor pH 9.0 Probówka #5: woda dejonizowana, olej roślinny (vegetable oil), sole żółciowe (bile salts), bufor pH 7.0
Probówka #6: lipaza, olej roślinny (vegetable oil), sole żółciowe (bile salts), bufor pH
Probówka #7: lipaza, olej roślinny (vegctable oil), sole żółciowe (bile salts), bufor pH
9.0
Aby to zrobić kliknij na zakraplacz znajdujący się na każdej butelce z podawaną substancją, przenieś go do odpowiedniej probówki i zwolnij przycisk mysz}'.
3. Kliknij cyfrę „1” pod probówką #1. Probówka zostanie wsunięta do inkubatora. Następnie kliknij przycisk Zagotuj (BOIL). Probówka zostanie zagotowana i powróci
na miejsce.
4. Upewnij się, że temperatura inkubacji jest ustawiona na 37C i że stoper ustawiony jest na 60 minut. Jeżeli nie, użyj przycisków (+) lub (-).
5. Kliknij przycisk Inkubuj (INCUBATE). Wszystkie probówki zostaną wsunięte do inkubatora i podczas inkubacji będą ostrożnie wytrząsane. Po zakończeniu okresu inkubacji probówki powrócą na miejsce i otworzą się drzwi do komory analitycznej. Kiedy otworzą się drzwi komory, zobaczysz pH-metr. Trawienie oleju roślinnego przez lipazę prowadzi do uwolnienia kwasów tłuszczowych, które obniżają pH. Dlatego też będziemy stosować pH-metr do wykrycia obecności kwasów żółciowych (a co za tym idzie ich trawienia) poprzez porównanie poziomu pH Twoich próbek z wyjściową wartością pH. Będziesz musiał klikać i przenosić probówki pojedynczo do pH-metru. Kiedy probówki znajdą się na swym miejscu, musisz kliknąć MEASURE
pH. Wtedy do zawartości probówki wprowadzona zostanie elektroda i dokonany zostanie pomiar.
6. Kliknij i przenieś probówkę łf\ do pH-metru.
7. Kliknij MEASURE pH.
Zanotuj wartość pH w Iabeli 4, a następnie przenieś probówkę z powrotem do uchwytu na górze inkubatora.
9. Powtórz kroki 6-8 z pozostałymi probówkami
I ? l^riWyk°nan,U odczytu ka*dej z probówek, kliknij RECORD DATA. likmj zakładkę TOOLS na górze ekranu, a następnie PR1NT DATA.
\J£
\
7