88126 IMG 1404014917

_i00f

z roztworu zarówno zwiększając, jak i obniżając stężenie czynny 1 cego. Dla najbardziej popularnego czynnika strącającego, jakim jest^H-amonu, oraz dla innych soli te dwa zjawiska noszą nazwę efektu*¹**^ dodatniego i ujemnego. Źródłem obu efektów jest obecność na białka naładowanych reszt aminokwasowych, tak ujemnych (kwasy* raginowy i glutaminowy), jak i dodatnich (arginina, lizyna, histydym^ chanizm obu efektów jest jednak całkowicie odmienri^H

Efekt solny dodatni wiąże się z faktem* że stabilnaformę w roztw zapewnia cząsteczkom białka otulająca je warstwa hydratacyjna. Ąi_e w* tacji ulegają również obecne w roztworze j^y nieorgani^ppii ich nadmiar, wykorzystają do swego    wszystkiecząsteczki

dy dostępne w roztworze, pozbawiając białko nieżf|||ej warstwy hyd^ ęyjnej. Dojdzie do paradoksalnej sytuacji przesusz||iią$ białkaW roztwory Dehydratowane cząsteczki białkowe zaczną twoj^ć skupiła, starający wykorzystać skąpe zapasy wody. Rozpocznie‘|ię.|if^es agregacji prowa. dzący do powstania zarodków krystalizacyj^^®^ dą^j kolejności, kryształów.

s^tabili^ejmolifeuw białka ,ot&s^j^raa>    cząsteczka®!

^dy^ale wiążą również przy    o przecbtóir^

jiMMkóińtehsUia'Ge4Ghładuhki^0W/fei?Z(l^^^^^yild^eriib\ffim|pBŁ ciwjonów na skutek obniżania stężenia soli, na powierzchni białka zaczną {-^djawiać się nieskompensowane ładunki. Ich oddziaływania elektrostatyczne spow;0.d,uj‘ą przvQiagańln^pori^@^ite^asfe'^^pMimka^jiowstawa. nie agregatów, a dalej zarodków. nego efektu solnego.

M

,nf"

m

sfl

ao m

si#

Igin

H

¹ próg²*

San H

H

^&20«

Kiy^sfc

l|tl

tańczą przez*¹¹ pięcia (^z Trze

niczne,

czyli^l

I2tacyj n ego

W roztworze krystalizacyjnym musi być oczywiście woda, białko i zwykle jiiMiśabufor. Niezbędny jeą| też d^atek składników

cyficzne dodatki, jak kofakt@^zv^inMbitorv, a także kompleksony, np. |^A,,wp^jaJlk%gdy obecnMfeftów

lizacji, oraz środek redukujM®ły yyażne je§t    białka przed

utleniającym wpływem pgwjtśa, np|d||

^m^^mostmw dwusiarczkach. Tanim odczynnikiem redukującyc^jest jp związek niekorzystny, gdyż sam dekorująioz-rvwanp^ap.^^|g^ Lepszy |e£iitiotreitol nie powodujący modyfitó kowalencyjnej białka..

Czynn

Wśród pH i r tempe sgydr

elekta

■gl

żeni;

pk.

rów

ipo

■

M

136