303 (21)

Nawarstwienie na

kolumną roztworu, np MM

t

o'o o o o o o o o o

V?

W materiale siano mącym wypelniene kolumny występuje rOzr»cowan»e mgra-qi ze wzgiątfj na wwfcotć&atek

o o o

W

o o o o o

Yr

DuZe białka nie pod K>w sączeniu w matanała stanowtą-cym wypolnier»o kolumny. v«ystępoją on# we trakqacn począł kowych

o o o o o

w

rSr

Numer trafcc*

c

O cząstki wypełniona kolumny . mafie molekuły b*a»ek • duże molekuły botek

Ryc. 12.7. Sączenie Żelowe: a - sieciowana cząsteczka zmodyfikowanego dekstranu z wewnętrznymi kanałami, b - zasada frakcjonowania metodą sączenia Żelowego, c - kolejne frakcje wycieku z kolumny nic wskazują pęcznienia przy stosowaniu roztworów wodnych. Przy odpowiednim doborze rodzaju żelu wypełniającego kolumnę możliwe jest frakcjonowanie białek i wiełocukrów o masach cząsteczkowych od kilkuset do kilku milionów.

Zasadę frakcjonowania metodą sączenia Żelowego przedstawiono na ryc. I2.7b. DuZe cząsteczki roztworu przechodzą przez wolne przestrzenie wypełnienia kolumny. mniejsze wnikają przez, pory do zraren Żelu. To wydłużenie drogi migracji powoduje. Ze cząsteczki występują, w zależności od ich wielkości, w kolejnych frakcjach wycieku z kolumny (ryc. I2.7c). Standaryzacja warunków uZycia kolumny i wykorzystanie wzorców mas cząsteczkowych (I. 2. 3 na ryc. I2.7c) umożliwia przyporządkowanie tych wartości poszczególnym frakcjom wycieku z kolumny.

303