63

63

63

1-3 minuty, następ-I czasu barwienia - em et} lowym, aż

z 3! sekund,

•_ - ; s: lach 18-24-- _ — - ałego kompleksu ■_:i się na fiole-

jek)warstwowych błon l£l się i konwencjonalne su widoczne jako bez-^_e:rza po podgrzaniu mrozi ega ich odbarwiali _^:e się barwienie kon-

^: -.mina Bacillaceae — różne przetrwalników

—    preparat dobarwić 0,5-procentowym roztworem safraniny w czasie 30 sekund,

—    po zakończonym barwieniu, preparat spłukać wodą i osuszyć.

Przetrwalniki barwią się na zielono, a komórki wegetatywne na czerwono.

'•letoda Schaeffera-Fultona jest jednąz kilku metod barwienia przetrwalników.

Do znanych metod barwienia złożonego należą metody barwienia bakterii, zawierających w swych ścianach duże ilości tłuszczu i wosków. Bakterie te, zabarwione na gorąco barwnikiem, nie odbarwiają się pod działaniem alkoholu : silnych kwasów mineralnych. Noszą one nazwę bakterii alkoholo-kwaso--opomych. Dla tej grupy najczęściej jest polecana metoda barwienia prątków Ilehl-Neelsena, w której podstawowym barwnikiem jest fuksyna karbolowa.

Wiele innych metod barwienia, głównie złożonego, pozwala na obserwacje : Kreślonych struktur komórkowych, takich jak: ściana komórkowa, nukleoid, substancje zapasowe, rzęski, otoczki. Odrębną grupę stanowią metody wykrywania substancji zapasowych.

Barwienie otoczek

Wykrywanie obecności otoczek wymaga specjalnych metod. Należy tu wymienić barwienie negatywne, które polega na wybarwianiu tła, przy czym stoczki pozostają nie zabarwione.

Na szkiełko przedmiotowe nanosi się kroplę zawiesiny drobnoustrojów i kroplę nigrozyny lub tuszu. Używając drugiego szkiełka przedmiotowego, wykonuje się rozmaz i suszy na powietrzu. Preparat po wyschnięciu jest gotowy do : glądania. Na ciemnym tle są widoczne jasne komórki z otoczkami.

Inną metodą jest barwienie różnicujące według Anthony’ego w modyfika-r i Tylera. Rozmaz komórek, po wysuszeniu na powietrzu i utrwaleniu, barwi ssę 4-7 minut fioletem krystalicznym według Anthony’ego-Tyiera. Barwnik mewa się i preparat zmywa roztworem siarczanu miedzi. Otoczki przyjmują rurwę niebieskofioletową, a komórki są ciemnoniebieskie.

Wykrywanie kropelek tłuszczu

Rozmaz bakterii po utrwaleniu zalać 0,3-procentowym roztworem sudanu czarnego (B) na czas 5-15 minut. W razie potrzeby należy barwnik uzupełnić szkiełku. Po zlaniu barwnika preparat wysuszyć bibułą i mikroskopować z zżyciem immersji. Krople tłuszczu są granatowoczarne.