W przypadku płytek TLC wstawia się je do komór, na dnie których znajduje 0,5 cm warstwa rozpuszczalnika. W chromatografii cion kowarstwowej stosuje się metodę wstępującą. Po osiągnięciu przo/ rozpuszczalnik poziomu około 1 cm poniżej górnego skraju wyjmu je się płytkę, zaznaczając delikatnie drogę rozpuszczalnika i sus/y W przypadku substancji bezbarwnych wywołuje się plamki, ro/py łając odpowiedni odczynnik lub tak jak jest to stosowane w pi/y padku lipidów, umieszcza się w komorze z jodem i obrysowuje do likatnie ołówkiem pojawiające się plamy.
Najistotniejszym czynnikiem wpływającym na wyniki w TLC )«>•' dobór adsorbenta i rozpuszczalnika. Dobierając rozpuszczalnik li/«l< • kierować się jego polarnością, której najlepszym wyrazem |hm względna przenikalność elektryczna. Najlepsze działanie wykn/uh zwykle mieszaniny 2 lub 3 rozpuszczalników.
Kwas mrówkowy jako jedyny z kwasów jednokarboknylłj
wych ulega utlenieniu do C02 i H20.
O
II
5 H-C-OH + 2 KMn04+ 3 H2S04 -» 2MnS04 + 5C02+ 8H20 + K ')(i,
Do 2 ml roztworu kwasu mrówkowego dodać 5 ml 1mol/l lhhf-ogrzać i na gorąco dodawać po kropli 0,1% KMn04. Następni** * barwienie KMn04.
I. Odróżnienie tłuszczów ciekłych i stałych w reakcji / KMn04 i Br2
Tłuszcze płynne różnią się od tłuszczów stałych ilością nie-nnsyconych kwasów tłuszczowych zdolnych do przyłączania atomów chlorowca do dwóch sąsiadujących ze sobą węgli
Br Br
Br2 I I
(;H3-(CH2)7-CH=CH-(CH2)7-COOH —>• CH3-(CH2)7-C-C-(CH2)7-COOH
I I H H
Kwas oleinowy Kwas 9,10 dibromostearynowy
i mjodne środki utleniające wprowadzają do związku nienasycone-,|m c./ąsteczkę tlenu. Na przykład KMn04 utlenia wiązanie podwój-tii do ugrupowania glikolowego wg reakcji:
HI, (CH2)7-CH=CH-(CH2)7-COOH + 2KMn04 + 4HzO ->
H H I I
u ,| | ,-(CH2)7-C—C-(CH2)7-COOH + 2Mn02 + 2KOH I I OH OH
Do dwóch probówek odmierzyć po około 1 ml oleju jadalne-l)i Do pierwszej dodać kilkanaście kropel 0,1 mol/l KMn04 , a do Ht«>i|in| około 1 ml wody bromowej, zawartość wymieszać. Po kilku nuilitch można zaobserwować odbarwienie roztworów. Powtó-m( doświadczenie z margaryną.
131