79

oonownie przez kilkanaście minut bez chłodnicy. Po ochłodzeniu roztwór przenieść do kolby miarowej na 500 ml i uzupełnić wodą do kreski. Całość przelać do ciemnej butelki i przechowywać w lodów^rce.

2.    2-molowy wodorotlenek sodowy.

3.    0,2-mmolowy roztwór standardowy kreatyniny (22,6 mg kreatyniny rozpuścić w 1 1 0,1-molow'ego kwasu solnego).

4.    Pikrynian sodowy: 50 objętości roztworu nasyconego (12 g/1) kwasu pikrynowego zmieszać z 10 objętościami 2,5-molowego wodorotlenku sodowego.

5.    Stężony kwas azotowy.

6.    Odczynnik Heinesa: 2 g siarczanu miedziowego (CuS0₄ • 5 H₂0) rozpuścić w 15 ml wody, dodać 15 ml glicerolu i 150 ml 5-proc. roztworu wodorotlenku potasowego.

7.    10-proc. nitroprusydek sodowy.

8.    30-proc, roztwór wodorotlenku sodowego.

9.    Kwas octowy' lodowaty.

Szkło i inne pomoce

Na jednego studenta przypada: statyw' z 20 probówkami, jedna kolbka stożkowa na 50 ml, pipety' chemiczne: 5 na i ml, 2 na 2 ml i 1 na 5 ml, po jednej pipecie serologicznej na: 1, 2,5 i na 10 ml.

Wykonanie

1.    Wykrywanie kwasu moczov;ego. Do probówki odmierzyć 2 ml dziesięciokrotnie rozcieńczonego moczu, dodać Op ml kwasu fosforowolframowego (1) i 1 ml 2-molowego wedorotlenku sodowego (2). Wymieszać i obserwować pojawiające się zabarwienie.

2.    Oznaczanie poziomu kreatyniny metodą Folina. Wykonanie krzyw'ej w' z o r c o w ej .Do pięciu probówek pobrać następujące objętości roztworu standardowego kreatyniny (5 ): 0,3; 0,6; 0,9; 1J2 i 1,8 ml. Wszystkie probów^rki dopełnić wodą do objętości 5 ml i starannie wymieszać. Do innej probówki odmierzyć 5 ml wody (próba kontrolna). Następnie do wszystkich probów^rek dodać po 2,5 ml pikrynianu sodowego (4), wymieszać i po 10 min mierzyć absorbancję prób badanych wobec próby kontrolnej przy długości fali 520 nm. Wykreślić na papierze milimetrowym krzywą wzorcową zależności absorbancji od stężenia kreatyniny.

Oznaczanie kreatyniny w' badanym moczu. Otrzymany w kolbie miarowej na 50 ml mocz rozcieńczyć wodą do kreski i dobrze wymieszać. Do 2 probówek pobrać po 1 ml roztworu z kolby i po 4 ml w'odv. Do trzeciej probów'ki pobrać 5 ml wody (próba kontrolna). Następnie do wszystkich probówek dodać po 2,5 ml pikrynianu sodowego {4), wymieszać i odstawić na 10 min, po czym mierzyć absorbancję prób badanych w'obec próby kontrolnej przy długości fali 520 nm. w fotometrze. Na podstawce zmierzonej wartości absorbancji odczytać ilość kreatyniny w badanej próbie z krzywej wzorcowej.

3.    Wykrywanie białka w moczu. Do probówki odmierzyć 1 ml moczu i podwsrstwić go wlewając po ściance 1 ml kwasu azotowego (5 ) — ostrożnie! Obserwować pojawienie się pierścienia wytrąconego białka na granicy' moczu i kwasu. Im wiece! białka jest w moczu, tym pierścień jest wyraźniejszy i szybciej się pcjaw'ia

ÓS