DSCF6753

114

Mikropipeta automatyczna pojemności 200 pl    1

Zlewki pojemności 30 ml    2 ^

Naczynka wagowe    2 ^

Moździerz

Łopatka

Lejek (mały)

Sączek

Waga analityczna

Płytka szklana pokryta żelem krzemionkowym Silica gel S60 (wymi_ar 10x20 cm)

Suszarka

Komora jodowa

Komora chromatograficzna

Wykonanie ćwiczenia

1.    Przygotowanie komory chromatograficznej.

-    przygotowanie fazy ruchomej: odmierzyć toluen, kwas octowy lodowaty, metanol w stosunku objętościowym 75:25:1. Roztwór dobrze wymieszać,

-    komorę przemyć 25 ml roztworu fazy ruchomej,

-    wyciąć z bibuły pasek o wymiarach 56 x 12 cm,

-    wyłożyć nią ściany komory chromatograficznej w taki sposób, aby jej końce wystawały poza nią,

-    ostrożnie wlać resztę fazy ruchomej do komory chromatograficznej,

-    przykryć komorę płytką szklaną zaginając na zewnątrz końce

bibuły,

-    pozostawić na godzinę w celu nasycenia komory (jest to czas na przygotowanie roztworów).

2.    Przygotowanie roztworów wzorcowych.

ROZTWÓR WZORCOWY 1 - roztwór kaptoprylu o stężeniu 10mg/ml: odważyć 0.10 g kaptoprylu i rozpuścić w 5 ml metanolu, przenieść do kolby miarowej pojemności 10 ml i uzupełnić metanolem do kreski.

ROZTWÓR WZORCOWY 2 — roztwór kaptoprylu o stężeniu 0.2 mg/ml: pobrać 200 pl roztworu wzorcowego 1 i przenieść go do kolbki miarowej pojemności 10 ml, a następnie uzupełnić metanolemdo kreski.

ROZTWÓR WZORCOWY 3 — roztwór kaptoprylu o stężeniu 0.05 mg/ml: pobrać 50 pl roztworu wzorcowego 1 i przenieść go do

kolby miarowej pojemności 10 ml, a następnie uzupełnić metanolem do kreski.

3. Przygotowanie roztworów badanych.

3.1.    Roztwór badany: CAPTOPRIL 25 mg, średnia masa tabletki 0.155 g.

-    odważyć ilość sproszkowanych tabletek odpowiadającą 100 mg substancji czynnej, to jest 0.618 g. Ilość tę należy wsypać do kolby miarowej pojemności 10 ml, dodać 5 ml metanolu i wytrząsać przez około 20 min. Dopełnić metanolem do kreski. Roztwór przesączyć i analizować przesącz.

3.2.    Roztwór badany: CAPTOPRIL 12.5 mg, średnia masa tabletki 0.101 g.

-    odważyć ilość sproszkowanych tabletek odpowiadającą 100 mg substancji czynnej, to jest 0.805 g, ilość tę należy wsypać do kolby miarowej pojemności 10 ml, dodać 5 ml metanolu i wytrząsać przez około 20 min. Dopełnić metanolem do kreski. Roztwór przesączyć i analizować przesącz.

4.    Przygotowanie płytki chromatograficznej:

-    zaznaczyć cienko ołówkiem linię startu na wysokości 2 cm od dołu płytki,

-od linii startu odmierzyć piętnastocentymetrową drogę

migracji,

-    zaznaczyć punkty, na które będzie się nanosić roztwory,

-    na linię startu, susząc płytkę suszarką, nanieść mikropipetką pojemności 25 pl roztwory wzorcowe i roztwór badany tak, aby plamki nie nachodziły na siebie,

-    zwrócić szczególną uwagę na to, aby nie uszkodzić warstwy adsorpcyjnej,

-    płytkę wysuszyć suszarką i umieścić w komorze chromatograficznej w celu rozwinięcia chromatogramu,

-    obserwować czoło rozpuszczalnika; kiedy pokona ono drogę 15 cm wyjąć płytkę z komory i wysuszyć w strumieniu ciepłego powietrza.

5.    Chromatogram wywołać w komorze jodowej do momentu pojawienia się widocznych plam. Po upływie tego czasu płytkę ostrożnie wyjąć z komory, otrzymane plamy, linię startu i linię końcową zakreślić ołówkiem. Wykonać kserokopię płytki.

6.    Opracowanie wyników.

-    wyznaczyć wartość współczynników Rf

Rt = A/B