3582326709

Laboratorium 4.

Izolacja czystych kultur

Escherichia Coli - pojedyncze kolonie są lekko wypukłe na środku i ciemniejsze, mają gładkie brzegi, barwa kremowa/ecru, kolonie błyszczące; (37°C).

Serratia marcescens (pałeczka cudowna / pałeczka krwawa) - wytwarza czerwony barwnik (prodigiozyna) pod wpływem rozproszonego światła (17-19°C, optimum 28"C), pojedyncza kolonia wygląda jak kropla krwi, rozwija się na prawdziwym, suszonym mięsie, suszonych szynkach, wędzonych, suszonych rybach (ale tylko na tradycyjnych, nie sklepowych); cuda typu „Matka Boska płacze krwawymi łzami" - bakterie te mają idealne warunki do życia w kaplicach, kościołach (temperatura + rozproszone światło) i dlatego potrafią się tam świetnie rozwinąć;

Rozizolowanie bakterii:

1.    posiew redukcyjny hodowli mieszanej E. Coli i S. Marcescens (1 płytka)

2.    metoda szeregu rozcieńczeń (2 płytki, 6 sterylnych probówek)

płyn fizj;    9ml    9ml    9,9ml    9ml    9ml    9ml

bakterie:    lml    lml    0,lml    Inni    lml    lml

				t_4	__
10'^1	10'^2	10'^3	UT*	10'^5	10'

Do 6 sterylnych probówek wlewa się sterylnie podane ilości płynu fizjologicznego. Do 1 probówki wlać 1 ml bakterii z hodowli wyjściowej. Otrzymujemy tam lOkrotne rozcieńczenie (zapis: 10'¹). Bardzo starannie wymieszać. Do 2 probówki pobrać 1 ml bakterii z probówki 1. Otrzymujemy w stosunku do hodowli wyjściowej rozcieńczenie lOOkrotne. Wymieszać. Do probówki 3 pobrać 0,1 ml (lOOpl) z probówki 2, Otrzymujemy rozcieńczenie 10000 krotne. Wymieszać. Do 4 lml z 3. Do 5 lml z 4. Do 6 lml z 5. Z dwóch ostatnich probówek pobieramy po 100 |il bakterii i wykonujemy posiew głaszczką szklaną. Na płytce należy zapisać rozcieńczenie.