2210689633

z którymi też będą łączyć się barwniki, w tych warunkach również wykazują ujemne naładowanie. Dlatego właśnie do barwienia bakterii używa się barwników zasadowych. Barwniki kwaśne stosowane są do barwienia tła - otoczenia, w którym znajdują bakterie. Barwienie komórek bakteryjnych określamy barwieniem pozytywnym. Barwienie tła, otoczenia, w którym znajdują się komórki, określamy barwieniem negatywnym.

Metoda Grama

Barwienie metodą Grama jest podstawowym barwieniem różnicującym stosowanym w mikrobiologii, dzielącym bakterie na dwie grupy: gramdodatnie i gramujemne.

W metodzie tej wykorzystuje się kolejno następujące odczynniki:

•    barwnik podstawowy - fenolowy roztwór fioletu krystalicznego (gencjana);

•    zaprawę w postaci roztworu jodu w jodku potasu (płyn Lugola);

•    odbarwiacz - alkohol etylowy;

•    barwnik kontrastowy - alkoholowo-wodny roztwór fuksyny zasadowej (fuksyna 1:10).

Wykonanie barwienia

-    na utrwalony preparat należy nalać świeżo przesączony przez bibułę roztwór gencjany na 2 minuty;

-    preparat spłukać wodą;

-    nalać płyn Lugola na 1 minutę;

-    spłukać wodą;

-    odbarwiać alkoholem przez 15-20 sekund;

-    spłukać wodą;

-    dobarwić przez zalanie na 20 sekund roztworem fuksyny;

-    spłukać wodą;

-    osuszyć lekko odciskając w bibule.

Wynik barwienia:

Bakterie gramdodatnie -fioletowogranatowe, gramujemne - różowe.

O wyniku barwienia w metodzie Grama decyduje grubość warstwy peptydoglikanu ściany komórkowej. Warstwa peptydoglikanu bakterii