112951

2.    Przygotować układy dwufazowe według schematu:

3.

4. OZNACZENIE AKTYWNOŚCI a - AMYLAZY Z DNS:

UWAGA - dotyczy prób do oznaczenia aktywności amvlazv:

Nr. układu	Rozc. F. górnej	Rozc. F. dolnej
1 (pil 6)	5 (200ul fazy/SOOul II20)	2 (SOOul fazy/SOOul 11,0)
2 (pH 7,5)	10 (lOOuI fazy/900ul 11*0)	—
3 (pil 9)	20 (SOul fazy/9S0ul II20)

Wykonanie oznaczenia:

Do 6 średnich probówek rozpipetować po 5ml roztworu skrobi rozpuszczalnej -oznaczyć nr układu i fazę (np.lG, ID, 2G......) - substrat dla enzymu

Do 12 średnich probówek rozpipetować po lml odczynnika DNS - oznaczyć nr układu i fazę (np.lG, IG, ID, ID, 2G......) - odczynnik zatrzymujący reakcję

Wstawić probówki ze skrobią do łaźni wodnej (60°C, jednocześnie podpalić gaz pod garnkiem z wodą) i dodawać kolejno po 500ul każdej z faz w odstępach 1 minutowych - po dodaniu pierwszej włączyć stoper. Po upływie 10 min. rozpocząć pobieranie prób - w odstępach 1 minutowych pobierać dwa razy po lml prób do

2