widzenia współoddziaływania z materią, promieniowanie elektromagnetyczne można rozpatiywać jako strumień energii złożony z oddzielnych cząstek energii promienistej.
Pomiaty w obszarze UV/VIS prowadzi się najczęściej dla substancji ciekłych lub rozpuszczonych, rzadziej w fazie gazowej czy stałej. Największe znaczenie na pomiar przepuszczalności układu.
Natężenie promieniowania padającego, /o, ulega osłabieniu przy przejściu prze ośrodek absorbujący do wartości /.To zmniejszenie natężenia zachodzi przede wszystkim w wyniku absorpcji, ale częściowo także na skutek odbicia promieniowania od ścianek naczynka (kuwety), zawierającego próbkę badanej substancji w stanie ciekłym czy gazowym, lub też od powierzchni próbek stałycli, rozproszenia na pojedynczych cząsteczkach czy też ich skupiskach. Część wpływów zakłócających eliminuje się prowadząc odpowiednie pomiary porównawcze względem odnośnika (kuweta zawierająca rozpuszczalnik lub ślepą próbę).
Stosunek I/l0 nazwano transmitancją T. Charakteryzuje ona przepuszczalność ośrodka. Logarytm dziesiętny odwrotności, a więc log(I/Io) określono mianem, absorbancji A:
T
'o
^ = logy =logy
Stosunek natężeń promieniowania padającego i przechodzącego przez ośrodek absorbujący ilościowo można określić na podstawie doświadczalnego pomiaru absorbancji lub transmitacji.
Zjawisko absorpcji i prawa nim rządzące można rozpatiywać z rozmaitego punku widzenia.
Prawo Bouguera-1 amberta odnosi się do przypadku przechodzenia promieniowania przez homogeniczny, jednoskładnikowy ośrodek absorbujący. Stwierdza ono, że ilość promieniowania pochłoniętego przez ten ośrodek nie zależy od natężenia wiązki padającej Io, tylko od grubości warstwy absorbującej b. Można to wyrazić następującą zależnością:
I
lub
J = /o -10 *
Z powyższych zależności wynika, że natężenie równoległej wiązki promieniowania elektromagnetycznego maleje wykładniczo w miarę przechodzenia przez warstwę absorbującego środowiska.
Zależność można przedstawić w formie logarytmicznej:
log — = -kb => log — = kb 'o J
Podstawiając powyższe równanie do równania na A wynika
A = kb
.gdzie zgodnie ze wzorem prawo Bouguera-Lamberta można sformułować następująco: absorbancja A jednorodnego środowiska absorbującego jest proporcjonalna do grubości warstwy absorbującej.
Występujący w równaniach współczynnik k, nazwany współczynnikiem absorpcji, jest charakterystyczny dla jednorodnej cieczy lub ciała stałego w danej temperaturze i zachowuje stałą wartość dla danej długości fali, danego środowiska i warunków pomiarowych.
2