- temperaturę
- pH
- siłę jonową 4) Lokalizacja
Konieczna jeśli jest to hodowla mikroorganizmów.
Jeżeli dany produkt znajduję się wewnątrz komórki mikroorganizmu, proces separacji poprzedzony jest rozerwaniem komórki.
ROZRYWANIE KOMÓREK
1) Metody mechaniczne
- zastosowanie fal ultradźwiękowych
- mielenie i wytrząsanie komórek
- nagła zmiana ciśnienia w układzie (do 100 atm.)
2) Metody łączone
- chemiczna lub biologiczna destrukcja ściany komórkowej
- fizyczne rozerwanie błony komórkowej
METODY ŁĄCZONE - DESTRUKCJA ŚCIANY KOMÓRKOWEJ
- zastosowanie środków chemicznych (detergentów, alkaliów, rozpuszczalników organicznych)
- wykorzystanie enzymów hydrolizujących wiązanie pomiędzy związkami tworzącymi ścianę komórkową (ułatwić to można poprzez zmutowanie ściany komórkowej, poprzez wzrost hodowli np. w obecności jonów Mg, antybiotyków penicyliny, cykloseryny)
Te środki chemiczne dodawane po zabiciu, nie mogą wpływać tylko na produkt.
Jony Mg muszą dobrze działać na hodowlę.
Związek dodawany do hodowli - mający na celu osłabić ścianę komórkową:
- DAD - kwas dwuaminopimelinowy
- G-N - acetyloglukozamina
- M-kwas-N-acetylomuraminowy
G-M-G
Aja - Glu - DAD - Ala
/
i
entapeptyd
Lys - Glu - DAD - Ala
g-m-g
Destrukcja ściany komórkowej poprzez:
- wiązanie pomiędzy M-G endoacetylomuramidazy
- wiązanie pomiędzy G-M anedoacetyloglukoamidazy i egzaacetyloglukoamidazy
- wiązanie pomiędzy M - Ala - amidazy acetylomuramylo-L-alaniny
- pomiędzy resztami aminokwasowymi pentapeptydu - peptydazy
Metody łączone - rozerwanie błony komórkowej
- nagłe obniżenie ciśnienia (naprężenie fizyczne)
- nagła zmiana temperatury (szok osmotyczny)
Ważna tabelka!łl
2