3830763956

Zadania badawcze:

a)    Ocena odpowiedzi immunologicznej szczurów szczepionych cDNA kodującym proteinazę cysteinową Fasciola hepatica (FhPcW2) (nowe zadanie)

Poddano ocenie potencjał szczepionkowy konstruktu cDNAFhPcW2/pCMV w ograniczaniu inwazji F. hepatica, a także podjęto próbę oceny odpowiedzi immunologicznej wzbudzanej u szczurów szczepu Sprague-Dowley szczepionych dwukrotnie w odstępach czterotygodniowych cDNA kodującym proteinazę cysteinową F. hepatica (FhPcW2) w wektorze pCMV łub pustym wektorem pCMV, a następnie zarażonych metacerkariami tej przywry. W dniu zarażenia, 2,4,6 i 8 tygodniu po zarażeniu (tpz) pobierana była od zwierząt krew. Wykorzystując metodę cytometrii przepływowej analizowano odsetek limfocytów, z wyszczególnieniem limfocytów CD4+ i CD8+, monocytów, neutrofili i eozynofili we krwi obwodowej zwierząt obu płci w trakcie trwania eksperymentu. Skuteczność szczepionki oceniana była w 8 tpz na podstawie porównania liczby przywr w wątrobie i przewodach żółciowych u zwierząt szczepionych i kontroli zarażenia. U samic stwierdzono 11,11% redukcji osiedlania się przywr w wątrobie i w przewodach żółciowych, podczas gdy u immunizowanych samców przebieg inwazji zaostrza się, gdyż z ich wątrób izolowano o 60,71% więcej przywr niż od osobników stanowiących kontrolę zarażenia. Analiza wyników sugeruje, że zdolność samic do zwalczania inwazji jest większa, a także że wytwarzają one w następstwie szczepienia silniejszą odpowiedź Th 1-zależną niż samce. Natomiast rozwijająca się u samców odpowiedź immunologiczna nie sprzyja usuwaniu F. hepatica (wykonawcy: A. Wesołowska, K. Januszkiewicz, A. Zawistowska-Deniziak, P. Wilkowski).

b)    Badanie lokalnej odpowiedzi immunologicznej szczurów zarażonych F. hepatica (kontynuacja)

Celem badań było określenie metodą ELISA odpowiedzi cytokin w hodowli komórek płynu otrzewnowego szczurów zarażonych F. hepatica we wczesnym etapie inwazji. W związku z długoterminowym zwolnieniem lekarskim, a następnie urlopem macierzyńskim dr Luizy Jedliny zadanie zrealizowano częściowo a wstępne wyniki zostały opublikowane w Experimental Parasitology (2011, 128, 3) str. 291-297 (wykonawca: L. Jedlina).

10. Klonowanie i ekspresja białek Fasciola hepatica (kontynuacja)

Kierownik: prof. dr hab. Halina Wędrychowicz