3071580079

Tabela 4. Roztwory stosowane do wizualizacji substancji na płytkach TLC

Związek chemiczny	Układ wywołujący
Aldehydy alifatyczne	Chlorowodorek hydrazonu 3-metylo-2-benzotiazolinonu
Alkaloidy	Heksachloroplatynian potasu, ninhydryna
Antybiotyki	Ninhydryna
Aminokwasy	Ninhydryna
Węglowodany	Roztwór kwasu siarkowego w metanolu
Lipidy	Chlorek antymonu(III), błękit tymolowy, ninhydryna, rodamina B
Kwasy karboksylowe	Zieleń bromokrezolowa
Fenole	Chloranil, kwas fosfomolibdenowy
Terpeny	Kwas fosfomolibdenowy

Wykonanie analizy TLC

Badane substancje (10-20 mg) rozpuszcza się w niewielkiej ilości rozpuszczalnika ok. 0.5 ml. Substancja powinna być dobrze rozpuszczalna w zastosowanym rozpuszczalniku, najczęściej stosuje się roztwory w metanolu, acetonie, chloroformie. W przypadku substancji bardzo polarnych np. aminokwasy do roztworu można dodać 1 kroplę wody. Przygotowuje się płytkę chromatograficzną o wymiarach zależnych od ilości substancji jakie zamierza się nałożyć na płytkę. Na przygotowanej płytce zaznacza się przy użyciu zwykłego ołówka punkty, na które następnie nanosi się roztwory substancji badanych, przy pomocy szklanej kapilary, w odległości ok. 0.5 cm od bocznej krawędzi płytki oraz ok. 0.5 cm od dolnej krawędzi. Roztwór nanosi się lekko dotykając powierzchni płytki końcem kapilary(czynność można powtórzyć kilkakrotnie). Dobrze naniesiona substancja tworzy na płytce tzw. „plamkę” o średnicy ok. 2 mm. Po nałożeniu wszystkich substancji płytkę suszy się, a następnie ostrożnie zanurza się dolną krawędzią w roztworze rozwijającym, znajdującym się w komorze chromatograficznej, tak by nie zanurzyć plamek. Komora powinna być umieszczona pod sprawnie działającym wyciągiem. Rolę komory chromatograficznej