2012-03-11 

1 

1 

WYKRYWANIE 



-LAKTAMAZ     

O ROZSZERZONYM SPEKTRUM 

SUBSTRATOWYM (ES



L) 

METODY FENOTYPOWE STOSOWANE  

W OZNACZANIU ES



L 

 

WG. CLSI                            

(

ang. Clinical and Laboratory Standard Institute)

  

METODA DWÓCH KRĄŻKÓW 

(DDST) 

ETEST 

PODŁOŻA CHROMOGENNE 

(chromID ESBL) 

SYSTEMY AUTOMATYCZNE          

(VITEK 2 , PHOENIX) 

2 

3 

OZNACZANIE ES



L  

WG CLSI 

(

Klebsiella pneumoniae

, 

K. oxytoca,  

Escherichia coli, 

and 

Proteus mirabilis

) 

4 

TEST PRZEGLĄDOWY WSTĘPNY 

Klebsiella pneumoniae

  ATCC 700603, Szczep ESBL+; 

strefa 



 22 mm 

(17 mm) 

strefa 



 27 



 27 mm 

strefa 



 25 

2012-03-11 

2 

5 

Ceftazydym 30 



g 

9 mm 

Ceftazydym+kwas 

klawulanowy 30/10



g 

25 mm 

Cefotaksym 30 



g 

20 mm 

Cefotaksym+kwas 

klawulanowy 30/10



g 

35 mm 

TEST POTWIERDZAJĄCY 

POZYTYWNY DLA  ES



L 

>= 5mm 

>= 5mm 

6 

Ceftazydym 30 



g 

9 mm 

Ceftazydym+kwas 

klawulanowy 30/10



g 

12 mm 

Cefotaksym 30 



g 

15 mm 

Cefotaksym+kwas 

klawulanowy 30/10



g 

17 mm 

< 5mm 

TEST POTWIERDZAJĄCY 

NEGATYWNY DLA  ES



L 

7 

OZNACZANIE ES



L  

METODĄ  

DWÓCH KRĄŻKÓW  

8 

METODA DWÓCH KRĄŻKÓW  

WYNIK POZYTYWNY DLA  ES



L 

(

Klebsiella pneumoniae 639/1) 

2012-03-11 

3 

9 

METODA DWÓCH KRĄŻKÓW  

WYNIK POZYTYWNY DLA  ES



L 

(

Serratia marcescens p850) 

10 

METODA DWÓCH KRĄŻKÓW  

WYNIK POZYTYWNY DLA  ES



L 

(

Klebsiella pneumoniae ATTC 700603) 

11 

METODA DWÓCH KRĄŻKÓW  

WYNIK POZYTYWNY DLA  ES



L 

(

E. coli 696/2) 

12 

WYKRYWANIE ESBL  

W OBECNOŚCI  

CEFALOSPORYNAZY AmpC  

2012-03-11 

4 

13 

METODA DWÓCH KRĄŻKÓW + FEP (derepresja AmpC) 

WYNIK POZYTYWNY DLA  ES



L 

(

Enterobacter cloaceae MIKROBANK 10.011) 

14 

W przypadku E. coli 

AmpC+, w rutynowej diagnostyce, nie można powiedzieć, czy 

jest to nadekspresja naturalnej, czy wytwarzanie nabytej AmpC 

E. coli

 

ESBL+

 

AmpC+ 

METODA  DWÓCH  KRĄŻKÓW  (DDST) WARIANT  PODSTAWOWY 

METODA  DWÓCH  KRĄŻKÓW  (DDST)                     

Z DODATKIEM  CEFEPIMU 

METODA  DWÓCH  KRĄŻKÓW  (DDST)   NA PODŁOŻU  Z 

KLOKSACYLINĄ 

15 

OZNACZANIE ES



L  

METODĄ  

ETEST  

16 

ETEST ES



L - 

WYNIK POZYTYWNY 

MIC CT/CTL =1.5/0.047 = 32 

2012-03-11 

5 

17 

ETEST ES



L - 

WYNIK POZYTYWNY 

MIC TZ/TZL = 32/0.38=84 

18 

ETEST ES



L - 

WYNIK POZYTYWNY 

OKRĄGŁA STREFA „FANTOMOWA” 

PONIŻEJ CT WSKAZUJE NA OBECNOŚĆ 

ES



L 

ETEST ES



L - 

WYNIK POZYTYWNY 

DEFORMACJA STREFY WOKÓŁ TZ 

WSKAZUJE NA OBECNOŚĆ ES



L 

19 

20 

chromID ESBL 

2012-03-11 

6 

21 

chromID ESBL 

E. coli 

TEM-3 



 -gal (-) 

E. coli 

CTX-M-14 



 -gal (+) 

Jordi Vila, ESCMID Postgraduate  Education CourseAnkara,  Turkey 10-11 March 2009 

22 

chromID ESBL 

E. cloacae 

CTX-M-1  

K. pneumoniae 

SHV-5 

Jordi Vila, ESCMID Postgraduate  Education CourseAnkara,  Turkey 10-11 March 2009 

23 

MBL 

(ANG. METALO-



-LACTAMASES) 

 

24 

TEST ZBLIŻENIOWY 

imipenem 10 



g 

ceftazydym 30 



g 

2 cm 

2 cm 

CAZ 

IMI 

10 



l 

MEM 

EDTA 

meropenem 10 



g  

2

 c

m

 

EDTA (10 µl 0,5 M EDTA o pH 7,3-7,4) 

2012-03-11 

7 

25 

IPM 

EDTA 

Gian Maria Rossolini  2008 

26 

TEST KOMBINOWANY 

IMIPENEM 10 



g                            

I IMIPENEM 10 



g + 5 µl 0,5 M 

EDTA o pH 7,3-7,4 

MEROPENEM  10 



g                            

I MEROPENEM 10 



g + 5 µl 0,5 M 

EDTA o pH 7,3-7,4 

27 

imipenem 10 



g 

IMI 

EDTA 

IMI 

MEM 

EDTA 

MEM 

meropenem 10 



g 

imipenem 10 



g     

+ 5 µl EDTA 

meropenem 10 



g    

 + 5 µl EDTA 

TEST KOMBINOWANY 

28 

IPM 

IPM+EDTA 

Gian Maria Rossolini  2008 

2012-03-11 

8 

29 

KPC 

(

Klebsiella pneumoniae carbapenemase)

 

 

30 

ZDOLNE DO HYDROLIZY 

WSZYTKICH 



-LAKTAMÓW 

KPC  

(

K. pneumoniae  carbapenemase)

 

31 

imipenem 10 



g 

IMI 

IMI 

MEM 

MEM 

meropenem 10 



g 

imipenem  10 



g     

+ 20 



l KWASU 

FENYLOBORONOWEGO 

meropenem  10 



g    

 20 



l KWASU 

FENYLOBORONOWEGO 

TEST KOMBINOWANY 

32 

TEST KOMBINOWANY 

K. pneumoniae  KPC-2. (A) Ertapenem 10 (B) 

ertapenem + KFB; (C) meropenem 10 g; (D) 

meropenem KFB 

Ertapenem 10 



g 

meropenem 10 



g 

ertapenem10 



g     

+ 20 



l KWASU 

FENYLOBORONOWEGO 

meropenem  10 



g    

 20 



l KWASU 

FENYLOBORONOWEGO 

Yohei Doi 2008 

>=5mm