DOCHODZENIE

DOCHODZENIE

EPIZOOTYCZNE

EPIZOOTYCZNE

I POBIERANIE

I POBIERANIE

MATERIAŁU DO

MATERIAŁU DO

BADAŃ

BADAŃ

LABORATORYJNYCH

LABORATORYJNYCH

Mateusz Leciejewski gr. 6A

Mateusz Leciejewski gr. 6A

Ustawa z dnia 7 stycznia

Ustawa z dnia 7 stycznia

2005 r.

2005 r.

o zmianie ustawy o ochronie zdrowia

o zmianie ustawy o ochronie zdrowia

zwierząt oraz zwalczaniu chorób

zwierząt oraz zwalczaniu chorób

zakaźnych zwierząt

zakaźnych zwierząt

(ustawa z dnia 11 marca 2004 r.)

(ustawa z dnia 11 marca 2004 r.)

Załącznik nr 2

Załącznik nr 2

Wykaz chorób zakaźnych zwierząt

Wykaz chorób zakaźnych zwierząt

podlegających obowiązkowi zwalczania.

podlegających obowiązkowi zwalczania.

1) pryszczyca (Foot and mouth disease - FMD);
2) pęcherzykowe zapalenie jamy ustnej (Vesicular stomatitis);
3) choroba pęcherzykowa świń (Swine vesicular disease - SVD);
4) księgosusz (Rinderpest);
5) pomór małych przeżuwaczy (Peste des petits ruminants - PPR);
6) zaraza płucna bydła (Contagious bovine pleuropneumonia - CBPP);
7) choroba guzowatej skóry bydła (Lumpy skin disease - LSD);
8) gorączka doliny Rift (Rift valley fever);
9) choroba niebieskiego języka (Bluetongue);
10) ospa owiec i ospa kóz (Sheep pox and goat pox);
11) afrykański pomór koni (African horse sickness);
12) afrykański pomór świń (African swine fever - ASF);
13) klasyczny pomór świń (Clasical swine fever - CSF, Hog

cholera);

14) wysoce zjadliwa grypa ptaków d. pomór drobiu (Highly pathogenic

avian influenza- HPAI d. Fowl plague);

15) rzekomy pomór drobiu (Newcastle disease - ND);

16) wścieklizna (Rabies);
17) wąglik (Anthrax);
18) gruźlica bydła (Bovine tuberculosis);
19) bruceloza u bydła, kóz, owiec i świń (B. abortus, B. melitensis, B. ovis, B.

suis);

20) enzootyczna białaczka bydła (Enzootic bovine leucosis - EBL);
21) gąbczasta encefalopatia bydła (Bovine spongiform encephalopathy - BSE);
22) zgnilec amerykański pszczół (American foulbrood);
23) trzęsawka owiec (Scrapie);
24) zakaźna martwica układu krwiotwórczego ryb łososiowatych (Infectious

haematopoietic necrosis - IHN);

25) zakaźna anemia łososi (Infectious salmon anaemia - ISA);
26) wirusowa posocznica krwotoczna (Viral haemorrhagic septicaemia - VHS);
27) krwotoczna choroba zwierzyny płowej (Epizootic haemorrhagic disease of

deer
- EHD);

28) Bonamioza;
29) martelioza.

Załącznik nr 3

Załącznik nr 3

Wykaz chorób zakaźnych zwierząt

Wykaz chorób zakaźnych zwierząt

podlegających obowiązkowi rejestracji.

podlegających obowiązkowi rejestracji.

1) paratuberkuloza (Paratuberculosis);
2) listerioza (Listeriosis);
3) toksoplazmoza (Toxoplasmosis);
4) tularemia (Tularaemia);
5) wirusowe zapalenia mózgu i rdzenia koni (Equine

encephalomyelitis);

6) nosacizna (Glanders);
7) niedokrwistość zakaźna koni (Equine infectious anaemia);
8) zakaźne zapalenie macicy u klaczy (Contagious equine metritis);
9) wirusowe zapalenie tętnic koni (Equine viral arteritis);
10) zaraza stadnicza (Dourine);
11) zakaźne zapalenie nosa i tchawicy/otręt bydła (Infectious bovine

rhinotracheitis/
infetious pustular vulvovaginitis IBR/IPV);

12) choroba mętwikowa bydła (Bovine genital campylobacterosis);
13) zaraza rzęsistkowa bydła (Trichomonosis);

14) gorączka Q (Q fever);
15) salmonelozy bydła i świń (Salmonellosis of cattle and pigs);
16) wirusowe zapalenie żołądka i jelit świń (Transmissible gastroenteritis -

TGE);

17) włośnica (Trichinellosis);
18) choroba Aujeszkyego u świń (Aujeszky's disease in pigs);
19) enterowirusowe zapalenie mózgu i rdzenia świń d. choroba cieszyńska i

talfańska
( Porcine enteroviral encephalomyelitis);

20) zakaźna bezmleczność u owiec i kóz (Contagious agalactia);
21) choroba maedi-visna (Maedi-visna disease);
22) gruczolakowatość płuc u owiec i kóz (Ovine pulmonary adenomatosis);
23) wirusowe zapalenia stawów i mózgu kóz (Caprine arthritis/encephalitis -

CAE);

24) serowaciejące zapalenie węzłów chłonnych (Caseus lymphadenitis - CLA);
25) salmonelozy drobiu (S. Gallinarum, S. Pullorum, S. Enteritidis, S.

Typhimurium,S. Arizonae) / Avian salmonellosis (S. Gallinarum, S.

Pullorum, S. Arizonae);

26) chlamydioza ptaków (Avian chlamydiosis);

27) zakaźne zapalenie torby Fabrycjusza (choroba Gumboro)

/Infectious bursal disease;

28) choroba Mareka (Marek's disease);
29) choroba Derzsy'ego (Derzsy's disease);
30) mykoplazmozy drobiu (Mycoplasma gallisepticum, M. synoviae, M.

meleagridis)
/ Avian mycoplasmosis (M. gallisepticum, M. synoviae, M.

meleagridis);

31) wirusowe zapalenie jelit u norek (Mink viral enteritis);
32) choroba Aleucka (Aleutian disease);
33) myksomatoza (Myxomatosis);
34) krwotoczna choroba królików ( Rabbit haemorrhagic disease );
35) wiosenna wiremia karpi (Spring viraemia of carp);
36) bakteryjna choroba nerek ryb łososiowatych (Renibacteriosis);
37) zgnilec europejski (European foulbrood);
38) waroza (Varroosis);
39) choroba roztoczowa (Acariosis of bees).

Obowiązki właściciela

Obowiązki właściciela

zwierzęcia chorego lub

zwierzęcia chorego lub

podejrzanego

podejrzanego

Art. 42.

Art. 42.

1. W przypadku podejrzenia wystąpienia

1. W przypadku podejrzenia wystąpienia

choroby zakaźnej zwierząt, a w szczególności

choroby zakaźnej zwierząt, a w szczególności

poronienia u bydła, świń, owiec i kóz,

poronienia u bydła, świń, owiec i kóz,

objawów neurologicznych u zwierząt,

objawów neurologicznych u zwierząt,

znacznej liczby nagłych padnięć, zmian o

znacznej liczby nagłych padnięć, zmian o

charakterze krost, pęcherzy, nadżerek lub

charakterze krost, pęcherzy, nadżerek lub

wybroczyn na skórze i błonach śluzowych

wybroczyn na skórze i błonach śluzowych

zwierząt kopytnych, oraz zwiększonego

zwierząt kopytnych, oraz zwiększonego

śnięcia ryb, skorupiaków lub mięczaków,

śnięcia ryb, skorupiaków lub mięczaków,

posiadacz zwierzęcia jest obowiązany do:

posiadacz zwierzęcia jest obowiązany do:

1) niezwłocznego zawiadomienia o tym

Organu Inspekcji Weterynaryjnej albo
najbliższego podmiotu świadczącego
usługi z zakresu medycyny
weterynaryjnej, albo wójta (burmistrza,
prezydenta miasta);

2) pozostawienia zwierząt w miejscu

ich przebywania i nie wprowadzania
tam innych zwierząt;

3) uniemożliwienia osobom postronnym

dostępu do pomieszczeń lub miejsc, w
których znajdują się zwierzęta podejrzane o
zakażenie lub chorobę, lub zwłoki zwierzęce;

4) wstrzymania się od wywożenia,

wynoszenia i zbywania produktów, w
szczególności mięsa, zwłok zwierzęcych,
środków żywienia zwierząt, wody, ściółki,
nawozów naturalnych w rozumieniu
przepisów o nawozach i nawożeniu i
innych przedmiotów znajdujących się w
miejscu, w którym wystąpiła choroba;

5) udostępnienia organom Inspekcji

5) udostępnienia organom Inspekcji

Weterynaryjnej zwierząt i zwłok

Weterynaryjnej zwierząt i zwłok

zwierzęcych do badań i zabiegów

zwierzęcych do badań i zabiegów

weterynaryjnych, a także udzielania

weterynaryjnych, a także udzielania

pomocy przy ich wykonywaniu;

pomocy przy ich wykonywaniu;

6) udzielania organom Inspekcji

6) udzielania organom Inspekcji

Weterynaryjnej oraz osobom

Weterynaryjnej oraz osobom

działającym w imieniu tych organów

działającym w imieniu tych organów

wyjaśnień i podawania informacji,

wyjaśnień i podawania informacji,

które mogą mieć znaczenie dla

które mogą mieć znaczenie dla

wykrycia choroby i źródeł zakażenia

wykrycia choroby i źródeł zakażenia

lub zapobiegania jej szerzeniu.

lub zapobiegania jej szerzeniu.

1a. Posiadacz zwierząt gospodarskich

1a. Posiadacz zwierząt gospodarskich

natychmiast informuje powiatowego

natychmiast informuje powiatowego

lekarza weterynarii o każdym

lekarza weterynarii o każdym

przypadku padnięcia bydła, owiec

przypadku padnięcia bydła, owiec

lub kóz.

lub kóz.

Dochodzenie epizootiologiczne

uwzględnia z jednej strony chorobę,

jej charakterystykę i metody

zapobiegania oraz zwalczania, z

drugiej strony –instytucje i osoby,

których udział w zwalczaniu chorób

zwierząt przewiduje obowiązujące

ustawodawstwo.

Cel dochodzenia

Cel dochodzenia

epizootiologicznego

epizootiologicznego

ust. 7 art. 42

ust. 7 art. 42

1)

1)

ustalenie okresu, w którym choroba zakaźna

ustalenie okresu, w którym choroba zakaźna

zwierząt mogła rozwijać się w gospodarstwie

zwierząt mogła rozwijać się w gospodarstwie

przed podejrzeniem lub stwierdzeniem jej

przed podejrzeniem lub stwierdzeniem jej

wystąpienia;

wystąpienia;

2)

2)

ustalenie źródła pochodzenia choroby zakaźnej

ustalenie źródła pochodzenia choroby zakaźnej

zwierząt wraz z ustaleniem innych gospodarstw,

zwierząt wraz z ustaleniem innych gospodarstw,

w których zwierzęta z gatunków wrażliwych

w których zwierzęta z gatunków wrażliwych

mogły zostać zakażone z tego źródła;

mogły zostać zakażone z tego źródła;

3)

3)

ustalenie dróg przemieszczania się wektorów:

ustalenie dróg przemieszczania się wektorów:

a) do gospodarstwa, w którym wystąpiło

a) do gospodarstwa, w którym wystąpiło

podejrzenie choroby zakaźnej zwierząt,

podejrzenie choroby zakaźnej zwierząt,

b) z gospodarstwa, w którym wystąpiło

b) z gospodarstwa, w którym wystąpiło

podejrzenie choroby zakaźnej

podejrzenie choroby zakaźnej

zwierząt.

zwierząt.

Elementy dochodzenia :

1. Wywiad epizootiologiczny;
2. Badania kliniczne zwierząt chorych;
3. Badanie anatomo- i

histiopatologiczne;

4. Badanie laboratoryjne.

1.Wywiad epizootiologiczny:



Wielkość populacji zwierząt, ich gatunek, wiek, płeć;



Liczba chorych zwierząt z podziałem na gatunki;



Szybkość rozprzestrzeniania się choroby;



Przebieg choroby i objawy;



Stan odporności populacji;



Sposób leczenia;



Ustalenie źródeł zakażenia i dróg szerzenia się;



Warunki żywienia, utrzymania i eksploatacji zwierząt;



Dane uzyskane z wywiadu należy skonfrontować z

innymi danymi, które uzyskano na podstawie

znajomości aktualnej sytuacji epidemiologicznej na

danym terenie oraz z sytuacją epidemiologiczną

poprzedzającą wystąpienie epidemii.

2. Badania kliniczne zwierząt

chorych

3. Badanie anatomo- i

histopatologiczne

4.Badanie laboratoryjne:



biologiczne



serologiczne



alergiczne



mikotoksykologiczne



toksykologiczne



mikrobiologiczne

Pobieranie materiału do

Pobieranie materiału do

badań laboratoryjnych

badań laboratoryjnych

Materiał pobierany przyżyciowo:

Materiał pobierany przyżyciowo:

1. Krew

1. Krew



Próby z antykoagulantem: heparyna,

Próby z antykoagulantem: heparyna,

cytrynian/ wersenian sodu, pozwala

cytrynian/ wersenian sodu, pozwala

na badanie morfologii i izolacje

na badanie morfologii i izolacje

komórek

komórek



Próby bez antykoagulantów –

Próby bez antykoagulantów –

surowica do badań serologicznych.

surowica do badań serologicznych.

2. Mleko

2. Mleko



Badania bakteriologiczne;

Badania bakteriologiczne;



Badania serologiczne.

Badania serologiczne.

3. Punkcje

3. Punkcje

Możemy pobrać:

Możemy pobrać:



Płyn mózgowo-rdzeniowy,

Płyn mózgowo-rdzeniowy,



Płyn wysiękowy, przesiekowy.

Płyn wysiękowy, przesiekowy.

4. Nasienie, mocz, kał

4. Nasienie, mocz, kał



Badania bakteriologiczne,

Badania bakteriologiczne,



Badania serologiczne,

Badania serologiczne,



Badania pasożytnicze,

Badania pasożytnicze,



Badania wirusologiczne.

Badania wirusologiczne.

5. Wydzieliny surowicze, śluzowe,

ropne



wymazy,



rozmazy,



zeskrobiny.

Materiał pobrany pośmiertnie:



małe zwierzęta- całe zwłoki lub narządy



duże zwierzęta- narządy zawsze pobrane w czasie sekcji



(wycinki, preparaty odciskowe ,wysięk)



do badań wirusologicznych- termos z lodem



do badań serologicznych- 10% formalina (kreda)

Inne materiały:



Pasza,



Ściółka,



Woda,



gryzonie, stawonogi, ptaki.

Próby do badań bakteriologicznych pobieramy w miarę

Próby do badań bakteriologicznych pobieramy w miarę

możliwości przed podaniem chemioterapeutyków – gdy

możliwości przed podaniem chemioterapeutyków – gdy

to niemożliwe do pisma przewodniego dołączamy opis

to niemożliwe do pisma przewodniego dołączamy opis

podjętych działań terapeutycznych.

podjętych działań terapeutycznych.

Należy zwrócić uwagę na sterylność przy pobieraniu

Należy zwrócić uwagę na sterylność przy pobieraniu

prób.

prób.

Sposób przesyłania materiału do

Sposób przesyłania materiału do

laboratorium

laboratorium

Opakowania:

Opakowania:



Probówki, ependorfy, strzykawki, pojemniki,

Probówki, ependorfy, strzykawki, pojemniki,

słoiki ,woreczki, płytki , szkiełko- suche ,

słoiki ,woreczki, płytki , szkiełko- suche ,

sterylne, oznakowane,

sterylne, oznakowane,



Materiał pobrany do badań wirusologicznych-

Materiał pobrany do badań wirusologicznych-

pobrany sterylnie, płyny z dodatkiem

pobrany sterylnie, płyny z dodatkiem

antybiotyków.

antybiotyków.

PISMO PRZEWODNIE



adres wysyłającego



adres właściciela



dane zwierzęcia



kierunek badania



dane z wywiadu



opis kliniczny i sekcyjny

METODY BEZPOŚREDNIEGO

METODY BEZPOŚREDNIEGO

WYKRYWANIA ZARAZKA

WYKRYWANIA ZARAZKA



BADANIE BAKTERIOLOGICZNE I

BADANIE BAKTERIOLOGICZNE I

MYKOLOGICZNE

MYKOLOGICZNE



BADANIE WIRUSOLOGICZNE

BADANIE WIRUSOLOGICZNE



BADANIE BIOLOGICZNO –

BADANIE BIOLOGICZNO –

MOLEKULARNE

MOLEKULARNE

BADANIE

BADANIE

BAKTERIOLOGICZNE I

BAKTERIOLOGICZNE I

MYKOLOGICZNE

MYKOLOGICZNE

Badanie mikroskopowe

Badanie mikroskopowe

- wykonanie rozmazu (ropa, tkanki, wykrztusiny)

- wykonanie rozmazu (ropa, tkanki, wykrztusiny)

- wymazu z odbytu, gardła, worka spojówkowego i

- wymazu z odbytu, gardła, worka spojówkowego i

innych błon śluzowych, skóry

innych błon śluzowych, skóry

- preparatu odciskowego z narządów

- preparatu odciskowego z narządów

wewnętrznych,

wewnętrznych,

- zawiesina (mleko, krew, mocz – wirowanie

- zawiesina (mleko, krew, mocz – wirowanie

materiału, badanie osadu)

materiału, badanie osadu)

- rozcieranie narządów wewnętrznych, tkanek,

- rozcieranie narządów wewnętrznych, tkanek,

całych zwierząt (pszczoły)

całych zwierząt (pszczoły)

utrwalenie (wysuszenie, ogrzanie, aceton);

utrwalenie (wysuszenie, ogrzanie, aceton);

cele

cele

utrwalenia: przytwierdzenie materiału

utrwalenia: przytwierdzenie materiału

(bakterii)do podłoża, zabicie żywych

(bakterii)do podłoża, zabicie żywych

komórek (materiał zakaźny), odsłonięcie

komórek (materiał zakaźny), odsłonięcie

aktywnych miejsc do barwienia na

aktywnych miejsc do barwienia na

komórkach bakterii

komórkach bakterii

-

barwienie metodą Gramma, Ziehl-

barwienie metodą Gramma, Ziehl-

Nielsena, Lofflera (metachrom.), Neissera

Nielsena, Lofflera (metachrom.), Neissera

(ziarenka), Fleminga (otoczki), Mellera

(ziarenka), Fleminga (otoczki), Mellera

Barwienie pozytywne

Barwienie pozytywne

: barwniki kwaśne (eozyna,

: barwniki kwaśne (eozyna,

kwaśna fuksyna), barwniki zasadowe (fiolet

kwaśna fuksyna), barwniki zasadowe (fiolet

krystaliczny, zieleń malachitowa, fuksyna

krystaliczny, zieleń malachitowa, fuksyna

zasadowa, błękit metylowy)

zasadowa, błękit metylowy)

Barwienie negatywne

Barwienie negatywne

: barwienie tła (rzęski, otoczki)

: barwienie tła (rzęski, otoczki)

Barwienie pozytywne przyżyciowe

Barwienie pozytywne przyżyciowe

: proste (jeden

: proste (jeden

barwnik np. błękit metylowy, czerwień obojętna),

barwnik np. błękit metylowy, czerwień obojętna),

złożone (więcej barwników stosowanych po kolei

złożone (więcej barwników stosowanych po kolei

lub w mieszaninie), metachromazja (jeden barwnik

lub w mieszaninie), metachromazja (jeden barwnik

– różne barwy komórek w preparacie np.

– różne barwy komórek w preparacie np.

Corynebacterium)

Corynebacterium)

Stosowanie bejcy

Stosowanie bejcy

(utrwalenie połączenia barwnika z

(utrwalenie połączenia barwnika z

komórką, mamy bejce proste i złożone)

komórką, mamy bejce proste i złożone)

Badanie hodowlane

Badanie hodowlane

Podłożami lub pożywkami nazywamy płynne (bulion,

Podłożami lub pożywkami nazywamy płynne (bulion,

mleko), półpłynne (bulion + agar) lub stałe

mleko), półpłynne (bulion + agar) lub stałe

(żelatynowe, agarowe, ścięta surowica, jajowe)

(żelatynowe, agarowe, ścięta surowica, jajowe)

mieszaniny różnych związków chemicznych, na

mieszaniny różnych związków chemicznych, na

których rozmnażają się bakterie lub grzyby

których rozmnażają się bakterie lub grzyby

Wyróżniamy podłoża:

Wyróżniamy podłoża:



ze względu na zawartość: syntetyczne,

ze względu na zawartość: syntetyczne,

półsyntetyczne, naturalne (surowica, płyny

półsyntetyczne, naturalne (surowica, płyny

ustrojowe

ustrojowe



ze względu na konsystencję: stałe, półpłynne, płynne

ze względu na konsystencję: stałe, półpłynne, płynne

ze względu na ilość i jakość składników odżywczych:

ze względu na ilość i jakość składników odżywczych:



proste lub podstawowe

proste lub podstawowe

– bulion zwykły, bulion odżywczy,

– bulion zwykły, bulion odżywczy,

agar odżywczy, żelatyna odżywcza;

agar odżywczy, żelatyna odżywcza;



wzbogacone

wzbogacone

– agar z krwią – bakterie hemolityczne,

– agar z krwią – bakterie hemolityczne,

agar cukrowy, agar drożdżowy dla Paenibacillus larvae,

agar cukrowy, agar drożdżowy dla Paenibacillus larvae,

surowica, żółtko;

surowica, żółtko;



wybiórczo – namnażające

wybiórczo – namnażające

– Mc Concey, Chapman,

– Mc Concey, Chapman,

Saburauda – zawierające składniki wzmagające (żółć)

Saburauda – zawierające składniki wzmagające (żółć)

lub hamujące wzrost bakterii (zieleń brylantowa),

lub hamujące wzrost bakterii (zieleń brylantowa),

Chapman (NaCl), Saburaud (aktidion lub

Chapman (NaCl), Saburaud (aktidion lub

chloramfenikol);

chloramfenikol);



wybiórczo – różnicujące z szeregiem cukrowym

wybiórczo – różnicujące z szeregiem cukrowym

(podłoże

(podłoże

odżywcze, substrat cukry, wskaźnik pH, gazy-CO2);

odżywcze, substrat cukry, wskaźnik pH, gazy-CO2);



specjalne

specjalne

– agar czekoladowy, Wrzoska

– agar czekoladowy, Wrzoska

BADANIE

BADANIE

WIRUSOLOGICZNE

WIRUSOLOGICZNE



Mikroskopia – mikroskop elektronowy lub

Mikroskopia – mikroskop elektronowy lub

skaningowy (rozpoznawanie kształtu:

skaningowy (rozpoznawanie kształtu:

kulisty, kubiczny, cylindryczny, cegiełkowy)

kulisty, kubiczny, cylindryczny, cegiełkowy)



Hodowlana – izolacja wirusa: zarodki

Hodowlana – izolacja wirusa: zarodki

kurze, pierwotne hodowle komórkowe,

kurze, pierwotne hodowle komórkowe,

ciągłe hodowle komórkowe CPE,

ciągłe hodowle komórkowe CPE,

diploidalne hodowle komórkowe – z płodów

diploidalne hodowle komórkowe – z płodów

do produkcji szczepionek, zawiesiny

do produkcji szczepionek, zawiesiny

komórek, hodowle narządowe

komórek, hodowle narządowe



Metody immunokoniugacyjne: IF

Metody immunokoniugacyjne: IF

bezpośrednia, test ELISA

bezpośrednia, test ELISA

Metody serologiczne

Metody serologiczne

Odczyn immunofluorescencji bezpośredniej

Odczyn immunofluorescencji bezpośredniej

( DIF )

( DIF )



odczyn pozwalający na wykazanie antygenu w

odczyn pozwalający na wykazanie antygenu w

badanym materiale

badanym materiale



na szkiełko z materiałem badanym nawarstwia

na szkiełko z materiałem badanym nawarstwia

się swoistą surowicę znakowaną fluoresceiną

się swoistą surowicę znakowaną fluoresceiną



Po inkubacji i odpłukaniu niezwiązanych

Po inkubacji i odpłukaniu niezwiązanych

przeciwciał jasno zielono-żółta fluorescencja

przeciwciał jasno zielono-żółta fluorescencja

wskazuje na obecność szukanego antygenu =

wskazuje na obecność szukanego antygenu =

wynik dodatni

wynik dodatni

Metody biologii

Metody biologii

molekularnej

molekularnej



Polimerazowa reakcja łańcuchowa

Polimerazowa reakcja łańcuchowa

( PCR )

( PCR )

- Test o wysokiej czułości, szybki i bardzo

- Test o wysokiej czułości, szybki i bardzo

specyficzny, opiera się na znajomości

specyficzny, opiera się na znajomości

sekwencji nukleotydów w wirusowym

sekwencji nukleotydów w wirusowym

DNA i RNA, bakterii i grzybów

DNA i RNA, bakterii i grzybów

- Do jego przeprowadzenia wymagana

- Do jego przeprowadzenia wymagana

jest jednoniciowa matryca DNA ,

jest jednoniciowa matryca DNA ,

startery ( primery )

startery ( primery )



polega na amplifikacji jednej kopii fragmentu

polega na amplifikacji jednej kopii fragmentu

DNA

DNA



Konserwatywne fragmenty matrycy są

Konserwatywne fragmenty matrycy są

miejscem przyłączenia primerów, które

miejscem przyłączenia primerów, które

uruchamiają polimeryzację

uruchamiają polimeryzację



Polimeryzację przeprowadza enzym

Polimeryzację przeprowadza enzym

polimeraza dosyntetyzowując fragment DNA

polimeraza dosyntetyzowując fragment DNA

pojedynczej nici z miksu nukleotydów w

pojedynczej nici z miksu nukleotydów w

środowisku bufora i obecności jonów magnezu

środowisku bufora i obecności jonów magnezu



Elektroforeza i wizualizacja w UV

Elektroforeza i wizualizacja w UV



Metoda ta jest stosowana do szybkiego

Metoda ta jest stosowana do szybkiego

wykrywania drobnoustrojów, których hodowla

wykrywania drobnoustrojów, których hodowla

in vitro jest trudna lub długotrwała, pozwala

in vitro jest trudna lub długotrwała, pozwala

na zidentyfikowanie czynnika etiologicznego

na zidentyfikowanie czynnika etiologicznego

choroby jeszcze przed pojawieniem się

choroby jeszcze przed pojawieniem się

swoistej odpowiedzi immunologicznej i

swoistej odpowiedzi immunologicznej i

stwierdzenia jej odczynami serologicznymi,

stwierdzenia jej odczynami serologicznymi,

umożliwia wykrycie materiału genetycznego

umożliwia wykrycie materiału genetycznego

zarazka w materiale biologicznym jak i w

zarazka w materiale biologicznym jak i w

czystych hodowlach, nawet wtedy gdy próbka

czystych hodowlach, nawet wtedy gdy próbka

jest bardzo mała lub w stanie rozkładu

jest bardzo mała lub w stanie rozkładu



PCR służy do wykrywania materiału

PCR służy do wykrywania materiału

genetycznego zarazków w narządach

genetycznego zarazków w narządach

wewnętrznych, skórze, krwi…

wewnętrznych, skórze, krwi…

RT PCR

RT PCR



Służy do wykrywania genomu RNA

Służy do wykrywania genomu RNA

wirusów

wirusów



Do uzyskania cDNA służącego jako

Do uzyskania cDNA służącego jako

matryca do właściwej reakcji PCR

matryca do właściwej reakcji PCR

polimeryzacja poprzedzona jest etapem

polimeryzacja poprzedzona jest etapem

odwrotnej transkrypcji

odwrotnej transkrypcji