DOCHODZENIE

DOCHODZENIE

EPIZOOTIOLOGICZNE

EPIZOOTIOLOGICZNE

Maciej Frankowski

Maciej Frankowski

Łukasz Wolny

Łukasz Wolny

Grupa 5b

Grupa 5b

CEL DOCHODZENIA

CEL DOCHODZENIA

EPIZOOTIOLOGICZNEGO:

EPIZOOTIOLOGICZNEGO:



Ustalenie źródła zarazka, nosicielstwa, dróg

Ustalenie źródła zarazka, nosicielstwa, dróg

szerzenia się choroby celem określenia

szerzenia się choroby celem określenia

dalszego postępowania.

dalszego postępowania.



Wykonawca: Urzędowy Lekarz Weterynarii,

Wykonawca: Urzędowy Lekarz Weterynarii,

którego celem jest ustalenie jak

którego celem jest ustalenie jak

największej ilości danych….

największej ilości danych….

ELEMENTY DOCHODZENIA

ELEMENTY DOCHODZENIA



Wywiad epizootiologiczny

Wywiad epizootiologiczny



Badanie kliniczne

Badanie kliniczne



Badanie sekcyjne

Badanie sekcyjne



Badanie histopatologiczne

Badanie histopatologiczne



Badanie biologiczne

Badanie biologiczne



Badanie alergiczne

Badanie alergiczne



Badanie serologiczne

Badanie serologiczne

WYWIAD

WYWIAD



Liczba, gatunek i wiek chorych zwierząt

Liczba, gatunek i wiek chorych zwierząt



Ustalenie czasu wystąpienia i charakteru

Ustalenie czasu wystąpienia i charakteru

objawów chorobowych

objawów chorobowych



Rozprzestrzenianie się choroby w stadzie

Rozprzestrzenianie się choroby w stadzie



Stan odpornościowy stada, ewentualnie

Stan odpornościowy stada, ewentualnie

stosowane leki – supresja

stosowane leki – supresja



Kontakt zwierząt chorych z innymi

Kontakt zwierząt chorych z innymi



Rodzaj, jakość i pochodzenie paszy

Rodzaj, jakość i pochodzenie paszy



Stan sanitarny pastwisk, wodopojów

Stan sanitarny pastwisk, wodopojów



Obecność owadów, gryzoni

Obecność owadów, gryzoni



Obrót zwierząt – przerzuty, transporty

Obrót zwierząt – przerzuty, transporty

ROZPOZNANIE ŚRODOWISKA

ROZPOZNANIE ŚRODOWISKA

ROZSZERZONY WYWIAD

ROZSZERZONY WYWIAD

EPIZOOTIOLOGICZNY

EPIZOOTIOLOGICZNY



Adres zamieszkania, telefon/fax, modem

Adres zamieszkania, telefon/fax, modem



Numer gospodarstwa – nadany przez agencję

Numer gospodarstwa – nadany przez agencję

restrukturyzacji i modernizacji rolnictwa (ARiMR) –

restrukturyzacji i modernizacji rolnictwa (ARiMR) –

jest on zakodowany także w UE -

jest on zakodowany także w UE -

do numeru gospodarstwa przypisane są numery

do numeru gospodarstwa przypisane są numery

zwierząt z wyjątkiem drobiu

zwierząt z wyjątkiem drobiu



Miejscowość, najbliższe miasto

Miejscowość, najbliższe miasto



Mapka – zaznaczenie co jest wokół gospodarstwa

Mapka – zaznaczenie co jest wokół gospodarstwa



ZCHZZ – zwalczanie chorób zakaźnych zwierząt.

ZCHZZ – zwalczanie chorób zakaźnych zwierząt.

System komputerowy

System komputerowy



System identyfikacji i rejestracji zwierząt. Dane, do

System identyfikacji i rejestracji zwierząt. Dane, do

których ma dostęp każdy powiatowy inspektorat

których ma dostęp każdy powiatowy inspektorat



Dane dotyczące właściciela / kierownictwa

Dane dotyczące właściciela / kierownictwa

gospodarstwa:

gospodarstwa:

-

Określić czy mamy do czynienia z

Określić czy mamy do czynienia z

właścicielem czy zarządcą gospodarstwa

właścicielem czy zarządcą gospodarstwa



Kierunek produkcji: trzoda chlewna, opasy,

Kierunek produkcji: trzoda chlewna, opasy,

krowy mleczne, kury nioski

krowy mleczne, kury nioski

-

Gospodarstwo towarowe, hodowlane,

Gospodarstwo towarowe, hodowlane,

hodowla jako hobby

hodowla jako hobby



Styczność z innymi gospodarstwami

Styczność z innymi gospodarstwami



Wielkość produkcji i jej przeznaczenie

Wielkość produkcji i jej przeznaczenie



Dane dotyczące higieny i ochrony zwierząt

Dane dotyczące higieny i ochrony zwierząt

- bioasekuracja, zabezpieczenia obiektu,

- bioasekuracja, zabezpieczenia obiektu,

dostęp osób „trzecich”, „all in all out”

dostęp osób „trzecich”, „all in all out”



Dane dotyczące czyszczenia i dezynfekcji

Dane dotyczące czyszczenia i dezynfekcji



Dane dotyczące składowania i utylizacji

Dane dotyczące składowania i utylizacji

części ciał zwierząt

części ciał zwierząt



Dane dotyczące karmienia

Dane dotyczące karmienia

-

mleko, siara, odpady żywieniowe lub

mleko, siara, odpady żywieniowe lub

kuchenne z własnego domu, środki paszowe

kuchenne z własnego domu, środki paszowe

pochodzenia zwierzęcego

pochodzenia zwierzęcego

-

szczegóły odnośnie skarmiania odpadami

szczegóły odnośnie skarmiania odpadami

żywieniowymi lub kuchennymi: obróbka

żywieniowymi lub kuchennymi: obróbka

termiczna

termiczna



Informacje o rozrodzie

Informacje o rozrodzie

-

krycie, unasiennianie, czy zwierzęta były

krycie, unasiennianie, czy zwierzęta były

pożyczane do rozrodu

pożyczane do rozrodu

BADANIE KLINICZNE

BADANIE KLINICZNE



Obecność objawów patognomicznych

Obecność objawów patognomicznych



Przebieg: nadostry, ostry, przewlekły

Przebieg: nadostry, ostry, przewlekły



Obserwacja kliniczna

Obserwacja kliniczna



Opis przebiegu i symptomów choroby włącznie ze

Opis przebiegu i symptomów choroby włącznie ze

stratami w stadzie

stratami w stadzie

-

Data i miejsce wystąpienia objawów klinicznych

Data i miejsce wystąpienia objawów klinicznych

-

Rodzaj zwierząt, które zachorowały

Rodzaj zwierząt, które zachorowały

-

Objawy kliniczne na terenie gospodarstwa

Objawy kliniczne na terenie gospodarstwa



Opis przebiegu klinicznego ze szczególnym

Opis przebiegu klinicznego ze szczególnym

uwzględnieniem rozwoju symptomów

uwzględnieniem rozwoju symptomów



Liczba zachorowań klinicznych i strat zwierząt w

Liczba zachorowań klinicznych i strat zwierząt w

momencie urzędowego stwierdzenia

momencie urzędowego stwierdzenia



Zachorowania i\lub straty wśród zakupionych lub

Zachorowania i\lub straty wśród zakupionych lub

nowo przyjętych zwierząt 14 dni wstecz

nowo przyjętych zwierząt 14 dni wstecz



Pozostałe zachorowania w całym stadzie w ciągu 30

Pozostałe zachorowania w całym stadzie w ciągu 30

dni

dni



Ustalić szczegółowo sprzedaż zwierząt w

Ustalić szczegółowo sprzedaż zwierząt w

ciągu ostatnich 30 dni

ciągu ostatnich 30 dni



Ustalić jaki był ruch wewnętrzny w danym

Ustalić jaki był ruch wewnętrzny w danym

gospodarstwie: kontakt ze zwierzętami z

gospodarstwie: kontakt ze zwierzętami z

innych gospodarstw w ciągu 30 dni

innych gospodarstw w ciągu 30 dni



Prześledzić ruch osób:

Prześledzić ruch osób:



dane o osobach które miłych dostęp w

dane o osobach które miłych dostęp w

ciągu 30 dni, pobyt za granicą, aukcje,

ciągu 30 dni, pobyt za granicą, aukcje,

targi…

targi…



Osoby, które miały dostęp do budynków w

Osoby, które miały dostęp do budynków w

ciągu 30 dni

ciągu 30 dni



Gospodarstwa , które odwiedzono przed

Gospodarstwa , które odwiedzono przed

wejściem do obory lub zagrody

wejściem do obory lub zagrody



Gospodarstwa odwiedzone po wyjściu z

Gospodarstwa odwiedzone po wyjściu z

obory lub zagrody

obory lub zagrody



Dane na temat ruchu pojazdów

Dane na temat ruchu pojazdów



Gospodarstwa lub instytucje, które

Gospodarstwa lub instytucje, które

odwiedzono przed wjazdem na teren zagrody

odwiedzono przed wjazdem na teren zagrody

lub gospodarstwa

lub gospodarstwa



Wywóz zwłok przez zakład utylizacji w ciągu

Wywóz zwłok przez zakład utylizacji w ciągu

ostatnich 30 dni

ostatnich 30 dni



Dane na temat użytkowania, sprawności i

Dane na temat użytkowania, sprawności i

czystości pojazdów

czystości pojazdów



Kontakty z innymi stadami po przez

Kontakty z innymi stadami po przez

zainfekowane materiały, urządzenia itd.

zainfekowane materiały, urządzenia itd.



Podsumowanie

Podsumowanie



Czas inkubacji

Czas inkubacji



Przyczyny choroby

Przyczyny choroby



Rozprzestrzenianie choroby przez pojazdy

Rozprzestrzenianie choroby przez pojazdy



Rozprzestrzenianie choroby przez osoby

Rozprzestrzenianie choroby przez osoby



Rozprzestrzenianie choroby przez inne czynniki

Rozprzestrzenianie choroby przez inne czynniki

Protokół dochodzenia

Protokół dochodzenia

epizootycznego i badań

epizootycznego i badań

zwierząt

zwierząt



Na okoliczność wykonania badań urzędowych,

Na okoliczność wykonania badań urzędowych,

zarówno badań kontrolnych jak i badań

zarówno badań kontrolnych jak i badań

wykonanych w związku ze zwalczaniem

wykonanych w związku ze zwalczaniem

choroby, należy sporządzić każdorazowo

choroby, należy sporządzić każdorazowo

protokół z prowadzonych czynności.

protokół z prowadzonych czynności.



Protokół sporządza się zgodnie z przepisami

Protokół sporządza się zgodnie z przepisami

ustawy z dnia 14 czerwca 1960 r.

ustawy z dnia 14 czerwca 1960 r.



Kodeks postępowania administracyjnego (Dz.

Kodeks postępowania administracyjnego (Dz.

U. z 2000 r. Nr 98, poz. 1071 z pózn. zm.).

U. z 2000 r. Nr 98, poz. 1071 z pózn. zm.).



Protokół sporządza się tak, aby z niego

Protokół sporządza się tak, aby z niego

wynikało:

wynikało:



kiedy przeprowadzono czynności

kiedy przeprowadzono czynności

•

•

kto dokonał czynności,

kto dokonał czynności,



rodzaj czynności, w tym opis i rodzaj

rodzaj czynności, w tym opis i rodzaj

wykonanego badania,

wykonanego badania,

•

•

miejsce wykonania czynności,

miejsce wykonania czynności,

•

•

kto i w jakim charakterze był przy tych

kto i w jakim charakterze był przy tych

czynnościach obecny, w tym

czynnościach obecny, w tym

identyfikacja osoby w obecności której

identyfikacja osoby w obecności której

prowadzone są czynności (imię i

prowadzone są czynności (imię i

nazwisko, adres zamieszkania),

nazwisko, adres zamieszkania),



co i w jaki sposób w wyniku czynności

co i w jaki sposób w wyniku czynności

ustalono,

ustalono,

•

•

jakie uwagi zgłosiły obecne osoby,

jakie uwagi zgłosiły obecne osoby,

•

•

ewentualnie dodatkowe elementy –

ewentualnie dodatkowe elementy –

decyduje urzędowy lekarz weterynarii

decyduje urzędowy lekarz weterynarii

sporzadząjacy protokół.

sporzadząjacy protokół.



Protokół podpisuje osoba

Protokół podpisuje osoba

sporządzająca protokół oraz wszystkie

sporządzająca protokół oraz wszystkie

inne osoby obecne, biorące udział w

inne osoby obecne, biorące udział w

czynności urzędowej.

czynności urzędowej.



Odmowę lub brak podpisu

Odmowę lub brak podpisu

którejkolwiek osoby należy omówić w

którejkolwiek osoby należy omówić w

protokole.

protokole.



Do czasu wydania rozporządzenia Minisrta

Do czasu wydania rozporządzenia Minisrta

Rolnictwa i Rozwoju Wsi z art. 61 pkt 1 lit. i

Rolnictwa i Rozwoju Wsi z art. 61 pkt 1 lit. i

ustawy z dnia 11 marca 2004r. o ochronie

ustawy z dnia 11 marca 2004r. o ochronie

zdrowia zwierząt oraz zwalczania chorób

zdrowia zwierząt oraz zwalczania chorób

zakaźnych zwierząt na potrzeby dochodzenia

zakaźnych zwierząt na potrzeby dochodzenia

epizootycznego, sekcji oceny aktualnej

epizootycznego, sekcji oceny aktualnej

sytuacji epizootycznej w ognisku choroby

sytuacji epizootycznej w ognisku choroby

stosuje wzory dokumentów z rozporządzenia

stosuje wzory dokumentów z rozporządzenia

Ministra Rolnictwa i Rozwoju Wsi z dnia 22

Ministra Rolnictwa i Rozwoju Wsi z dnia 22

stycznia 2003r. w sprawie postępowania przy

stycznia 2003r. w sprawie postępowania przy

zwalczaniu chorób zakaźnych zwierząt,

zwalczaniu chorób zakaźnych zwierząt,

uwzględniając w tych wzorach stan prawny

uwzględniając w tych wzorach stan prawny

wynikający z wymienionej wyżej ustawy.

wynikający z wymienionej wyżej ustawy.

PROTOKÓŁ

PROTOKÓŁ

DOCHODZENIA EPIZOOTYCZNEGO I BADAŃ ZWIERZĄT

DOCHODZENIA EPIZOOTYCZNEGO I BADAŃ ZWIERZĄT

Przeprowadzonego w dniu ............ 20... r. przez Powiatowego

Przeprowadzonego w dniu ............ 20... r. przez Powiatowego

Lekarza Weterynarii ...........................................

Lekarza Weterynarii ...........................................

                           

                           

(imię i nazwisko)

(imię i nazwisko)

w ................................, gmina ....................,

w ................................, gmina ....................,

   

   

(wymienić miejscowość)

(wymienić miejscowość)

poczta ..........................., powiat ....................

poczta ..........................., powiat ....................

w wyniku zgłoszenia nr ................... z dnia .... 20... r.

w wyniku zgłoszenia nr ................... z dnia .... 20... r.

                     

                     

(lp. księgi zgłoszeń)

(lp. księgi zgłoszeń)

o podejrzeniu .................................................

o podejrzeniu .................................................

                         

                         

(wymienić chorobę)

(wymienić chorobę)

w gospodarstwie ............................................. .

w gospodarstwie ............................................. .

                 

                 

(imię i nazwisko lub nazwa posiadacza oraz

(imię i nazwisko lub nazwa posiadacza oraz

                               

                               

dokładny adres)

dokładny adres)

W miejscowości znajduje się ogółem gospodarstw ...............,

W miejscowości znajduje się ogółem gospodarstw ...............,

gospodarstw posiadających zwierzęta z gatunku podatnego ......,

gospodarstw posiadających zwierzęta z gatunku podatnego ......,

w tym ............ gospodarstw zapowietrzonych chorobą

w tym ............ gospodarstw zapowietrzonych chorobą

...............................................................

...............................................................

                   

                   

(wymienić chorobę)

(wymienić chorobę)

POBIERANIE MATERIAŁU DO

POBIERANIE MATERIAŁU DO

BADAŃ LABORATORYJNYCH

BADAŃ LABORATORYJNYCH

MATERIAŁ POBIERANY PRZYŻYCIOWO

MATERIAŁ POBIERANY PRZYŻYCIOWO

Krew

Krew



próby z antykoagulantem – morfologia

próby z antykoagulantem – morfologia

heparyna 10-20

heparyna 10-20





l na 1 ml krwi

l na 1 ml krwi

cytrynian/wersenian sodu

cytrynian/wersenian sodu

izolacja komórek krwi

izolacja komórek krwi



próby bez antykoagulantów

próby bez antykoagulantów

badanie serologiczne (hemoliza!!!), bakteriologiczne i

badanie serologiczne (hemoliza!!!), bakteriologiczne i

wirusologiczne

wirusologiczne

Mleko

Mleko



badania bakteriologiczne, morfologiczne (TOK), badanie

badania bakteriologiczne, morfologiczne (TOK), badanie

serologiczne

serologiczne



Płyn mózgowo – rdzeniowy, płyny wysiękowe,

Płyn mózgowo – rdzeniowy, płyny wysiękowe,

przesiękowe

przesiękowe



Nasienie, mocz, kał

Nasienie, mocz, kał



Wydzieliny surowicze, śluzowe, ropne

Wydzieliny surowicze, śluzowe, ropne



wymazy, rozmazy, zeskrobiny

wymazy, rozmazy, zeskrobiny

UWAGI:

UWAGI:

Probówki/płytki/szkiełka – suche, sterylne,

Probówki/płytki/szkiełka – suche, sterylne,

oznakowane

oznakowane

Materiał do badań wirusologicznych –

Materiał do badań wirusologicznych –

pobrany sterylnie

pobrany sterylnie

Płyny utrzymujące (media) z dodatkiem

Płyny utrzymujące (media) z dodatkiem

antybiotyków

antybiotyków



MATERIAŁ POBRANY POŚMIERTNIE – UBÓJ

MATERIAŁ POBRANY POŚMIERTNIE – UBÓJ

DIAGNOSTYCZNY

DIAGNOSTYCZNY



Małe zwierzęta – całe zwłoki lub narządy

Małe zwierzęta – całe zwłoki lub narządy



Duże zwierzęta – narządy – zawsze pobrane z czasie

Duże zwierzęta – narządy – zawsze pobrane z czasie

sekcji (wycinki, preparaty odciskowe, wysięk –

sekcji (wycinki, preparaty odciskowe, wysięk –

zanieczyszczenia!)

zanieczyszczenia!)



Do badań wirusologicznych – termos z lodem

Do badań wirusologicznych – termos z lodem



Do badań serologicznych – 10% formalina (kreda)

Do badań serologicznych – 10% formalina (kreda)



INNE MATERIAŁY

INNE MATERIAŁY



Pasza, woda, ściółka, gryzonie, stawonogi, ptaki

Pasza, woda, ściółka, gryzonie, stawonogi, ptaki



OPAKOWANIE

OPAKOWANIE



Probówki, buteleczki, pojemniki, woreczki

Probówki, buteleczki, pojemniki, woreczki



PISMO PRZEWODNIE

PISMO PRZEWODNIE



Adres wysyłającego, adres właściciela, kierunek

Adres wysyłającego, adres właściciela, kierunek

badanie, dane z wywiadu, opis kliniczny i sekcyjny

badanie, dane z wywiadu, opis kliniczny i sekcyjny

METODY BEZPOŚREDNIEGO

METODY BEZPOŚREDNIEGO

WYKRYWANIA ZARAZKA

WYKRYWANIA ZARAZKA



BADANIE BAKTERIOLOGICZNE I

BADANIE BAKTERIOLOGICZNE I

MYKOLOGICZNE

MYKOLOGICZNE



BADANIE WIRUSOLOGICZNE

BADANIE WIRUSOLOGICZNE



BADANIE BIOLOGICZNO –

BADANIE BIOLOGICZNO –

MOLEKULARNE

MOLEKULARNE

BADANIE BAKTERIOLOGICZNE I

BADANIE BAKTERIOLOGICZNE I

MYKOLOGICZNE

MYKOLOGICZNE

Badanie mikroskopowe

Badanie mikroskopowe

- wykonanie rozmazu (ropa, tkanki, wykrztusiny)

- wykonanie rozmazu (ropa, tkanki, wykrztusiny)

- wymazu z odbytu, gardła, worka spojówkowego

- wymazu z odbytu, gardła, worka spojówkowego

i

i

innych błon śluzowych, skóry

innych błon śluzowych, skóry

- preparatu odciskowego z narządów

- preparatu odciskowego z narządów

wewnętrznych,

wewnętrznych,

- zawiesina (mleko, krew, mocz – wirowanie

- zawiesina (mleko, krew, mocz – wirowanie

materiału, badanie osadu)

materiału, badanie osadu)

- rozcieranie narządów wewnętrznych, tkanek,

- rozcieranie narządów wewnętrznych, tkanek,

całych zwierząt (pszczoły)

całych zwierząt (pszczoły)

- utrwalenie (wysuszenie, ogrzanie,

- utrwalenie (wysuszenie, ogrzanie,

aceton); cele

aceton); cele

utrwalenia: przytwierdzenie materiału

utrwalenia: przytwierdzenie materiału

(bakterii)do podłoża, zabicie żywych

(bakterii)do podłoża, zabicie żywych

komórek (materiał zakaźny),

komórek (materiał zakaźny),

odsłonięcie aktywnych miejsc do

odsłonięcie aktywnych miejsc do

barwienia na komórkach bakterii

barwienia na komórkach bakterii

-

barwienie metodą Gramma, Ziehl-

barwienie metodą Gramma, Ziehl-

Nielsena, Lofflera (metachrom.),

Nielsena, Lofflera (metachrom.),

Neissera (ziarenka), Fleminga

Neissera (ziarenka), Fleminga

(otoczki), Mellera

(otoczki), Mellera

Barwienie pozytywne

Barwienie pozytywne

: barwniki kwaśne

: barwniki kwaśne

(eozyna, kwaśna fuksyna), barwniki zasadowe

(eozyna, kwaśna fuksyna), barwniki zasadowe

(fiolet krystaliczny, zieleń malachitowa,

(fiolet krystaliczny, zieleń malachitowa,

fuksyna zasadowa, błękit metylowy)

fuksyna zasadowa, błękit metylowy)

Barwienie negatywne

Barwienie negatywne

: barwienie tła (rzęski,

: barwienie tła (rzęski,

otoczki)

otoczki)

Barwienie pozytywne przyżyciowe

Barwienie pozytywne przyżyciowe

: proste

: proste

(jeden barwnik np. błękit metylowy, czerwień

(jeden barwnik np. błękit metylowy, czerwień

obojętna), złożone (więcej barwników

obojętna), złożone (więcej barwników

stosowanych po kolei lub w mieszaninie),

stosowanych po kolei lub w mieszaninie),

metachromazja (jeden barwnik – różne barwy

metachromazja (jeden barwnik – różne barwy

komórek w preparacie np. Corynebacterium)

komórek w preparacie np. Corynebacterium)

Stosowanie bejcy

Stosowanie bejcy

(utrwalenie połączenia

(utrwalenie połączenia

barwnika z komórką, mamy bejce proste i

barwnika z komórką, mamy bejce proste i

złożone)

złożone)

Badanie hodowlane

Badanie hodowlane

Podłożami lub pożywkami nazywamy płynne

Podłożami lub pożywkami nazywamy płynne

(bulion, mleko),

(bulion, mleko),

półpłynne (bulion + agar) lub stałe (żelatynowe,

półpłynne (bulion + agar) lub stałe (żelatynowe,

agarowe

agarowe

ścięta surowica, jajowe) mieszaniny różnych

ścięta surowica, jajowe) mieszaniny różnych

związków

związków

chemicznych, na których rozmnażają się bakterie

chemicznych, na których rozmnażają się bakterie

lub grzyby

lub grzyby

Wyróżniamy podłoża:

Wyróżniamy podłoża:



ze względu na zawartość: syntetyczne,

ze względu na zawartość: syntetyczne,

półsyntetyczne, naturalne (surowica, płyny

półsyntetyczne, naturalne (surowica, płyny

ustrojowe

ustrojowe



ze względu na konsystencję: stałe, półpłynne,

ze względu na konsystencję: stałe, półpłynne,

płynne

płynne



ze względu na ilość i jakość składników

ze względu na ilość i jakość składników

odżywczych:

odżywczych:

proste

proste

lub podstawowe

lub podstawowe

– bulion zwykły, bulion

– bulion zwykły, bulion

odżywczy, agar odżywczy, żelatyna odżywcza;

odżywczy, agar odżywczy, żelatyna odżywcza;

wzbogacone

wzbogacone

– agar z krwią – bakterie

– agar z krwią – bakterie

hemolityczne, agar cukrowy, agar drożdżowy

hemolityczne, agar cukrowy, agar drożdżowy

dla

dla

Paenibacillus larvae, surowica, żółtko;

Paenibacillus larvae, surowica, żółtko;

wybiórczo – namnażające

wybiórczo – namnażające

– Mc Concey,

– Mc Concey,

Chapman, Saburauda – zawierające składniki

Chapman, Saburauda – zawierające składniki

wzmagające (żółć) lub hamujące wzrost bakterii

wzmagające (żółć) lub hamujące wzrost bakterii

(zieleń brylantowa), Chapman (NaCl), Saburaud

(zieleń brylantowa), Chapman (NaCl), Saburaud

(aktidion lub chloramfenikol);

(aktidion lub chloramfenikol);

wybiórczo –

wybiórczo –

różnicujące z szeregiem cukrowym

różnicujące z szeregiem cukrowym

(podłoże

(podłoże

odżywcze, substrat cukry, wskaźnik pH, gazy-

odżywcze, substrat cukry, wskaźnik pH, gazy-

CO2);

CO2);

specjalne

specjalne

– agar czekoladowy, Wrzoska

– agar czekoladowy, Wrzoska

Fazy rozmnażanie się bakterii

Fazy rozmnażanie się bakterii



- faza spoczynkowa – stała liczba

- faza spoczynkowa – stała liczba

komórek

komórek

- faza intensywnych podziałów –

- faza intensywnych podziałów –

np. E.coli 20 min, Myc.bovis 90 min.

np. E.coli 20 min, Myc.bovis 90 min.

- faza niezmienna = równowagi –

- faza niezmienna = równowagi –

po wyczerpaniu się zasobów

po wyczerpaniu się zasobów

odżywczych

odżywczych

- faza spadkowa – starzenie się

- faza spadkowa – starzenie się

Kolonia bakteryjna – skupiska

Kolonia bakteryjna – skupiska

mld.bakterii,

mld.bakterii,

jeden klon

jeden klon

Cechy kolonii: kształt, wielkość,

Cechy kolonii: kształt, wielkość,

wzniesienie, przeźroczystość,

wzniesienie, przeźroczystość,

zawieszalność, brzegi, wzrost, zapach

zawieszalność, brzegi, wzrost, zapach

Ruch bakterii: kropla wisząca, ciemne

Ruch bakterii: kropla wisząca, ciemne

pole

pole

Badanie metabolizmu: specjalne pożywki –

Badanie metabolizmu: specjalne pożywki –

zmiana

zmiana

pH, fermentacja cukrów, tworzenie gazów,

pH, fermentacja cukrów, tworzenie gazów,

właściwości proteolityczne, SH2,

właściwości proteolityczne, SH2,

wytwarzanie

wytwarzanie

indolu, hemoliza

indolu, hemoliza





,

,





,

,





Antybiogram – metoda dyfuzyjno-

Antybiogram – metoda dyfuzyjno-

krążkowa (1 ml tj. 108 18-24 godz. hodowli

krążkowa (1 ml tj. 108 18-24 godz. hodowli

bulionowej na podłoże Muellera-Hintona –

bulionowej na podłoże Muellera-Hintona –

określamy wrażliwość (+, ++, +++)

określamy wrażliwość (+, ++, +++)

BADANIE WIRUSOLOGICZNE

BADANIE WIRUSOLOGICZNE



Mikroskopia – mikroskop elektronowy lub

Mikroskopia – mikroskop elektronowy lub

skaningowy (rozpoznawanie kształtu: kulisty,

skaningowy (rozpoznawanie kształtu: kulisty,

kubiczny, cylindryczny, cegiełkowy)

kubiczny, cylindryczny, cegiełkowy)



Hodowlana – izolacja wirusa: zarodki kurze,

Hodowlana – izolacja wirusa: zarodki kurze,

pierwotne hodowle komórkowe, ciągłe hodowle

pierwotne hodowle komórkowe, ciągłe hodowle

komórkowe CPE, diploidalne hodowle

komórkowe CPE, diploidalne hodowle

komórkowe – z płodów do produkcji

komórkowe – z płodów do produkcji

szczepionek, zawiesiny komórek, hodowle

szczepionek, zawiesiny komórek, hodowle

narządowe

narządowe



Metody immunokoniugacyjne: IF bezpośrednia,

Metody immunokoniugacyjne: IF bezpośrednia,

test ELISA

test ELISA

Metody serologiczne

Metody serologiczne

Odczyn immunofluorescencji bezpośredniej

Odczyn immunofluorescencji bezpośredniej

( DIF )

( DIF )



odczyn pozwalający na wykazanie antygenu w

odczyn pozwalający na wykazanie antygenu w

badanym materiale

badanym materiale



na szkiełko z materiałem badanym nawarstwia

na szkiełko z materiałem badanym nawarstwia

się swoistą surowicę znakowaną fluoresceiną

się swoistą surowicę znakowaną fluoresceiną



Po inkubacji i odpłukaniu niezwiązanych

Po inkubacji i odpłukaniu niezwiązanych

przeciwciał jasno zielono-żółta fluorescencja

przeciwciał jasno zielono-żółta fluorescencja

wskazuje na obecność szukanego antygenu =

wskazuje na obecność szukanego antygenu =

wynik dodatni

wynik dodatni

Materiałem do badania są rozmazy

Materiałem do badania są rozmazy

lub skrawki tkanki pobranej od

lub skrawki tkanki pobranej od

chorego zwierzęcia

chorego zwierzęcia

Metody biologii

Metody biologii

molekularnej

molekularnej



Polimerazowa reakcja łańcuchowa ( PCR )

Polimerazowa reakcja łańcuchowa ( PCR )

- Test o wysokiej czułości, szybki i bardzo

- Test o wysokiej czułości, szybki i bardzo

specyficzny, opiera się na znajomości

specyficzny, opiera się na znajomości

sekwencji nukleotydów w wirusowym

sekwencji nukleotydów w wirusowym

DNA i RNA, bakterii i grzybów

DNA i RNA, bakterii i grzybów

- Do jego przeprowadzenia wymagana jest

- Do jego przeprowadzenia wymagana jest

jednoniciowa matryca DNA , startery

jednoniciowa matryca DNA , startery

( primery )

( primery )



polega na amplifikacji jednej kopii

polega na amplifikacji jednej kopii

fragmentu DNA

fragmentu DNA



Konserwatywne fragmenty matrycy

Konserwatywne fragmenty matrycy

są miejscem przyłączenia primerów,

są miejscem przyłączenia primerów,

które uruchamiają polimeryzację

które uruchamiają polimeryzację



Polimeryzację przeprowadza enzym

Polimeryzację przeprowadza enzym

polimeraza dosyntetyzowując

polimeraza dosyntetyzowując

fragment DNA pojedynczej nici z

fragment DNA pojedynczej nici z

miksu nukleotydów w środowisku

miksu nukleotydów w środowisku

bufora i obecności jonów magnezu

bufora i obecności jonów magnezu



Elektroforeza i wizualizacja w UV

Elektroforeza i wizualizacja w UV



Metoda ta jest stosowana do szybkiego

Metoda ta jest stosowana do szybkiego

wykrywania drobnoustrojów, których

wykrywania drobnoustrojów, których

hodowla in vitro jest trudna lub

hodowla in vitro jest trudna lub

długotrwała, pozwala na zidentyfikowanie

długotrwała, pozwala na zidentyfikowanie

czynnika etiologicznego choroby jeszcze

czynnika etiologicznego choroby jeszcze

przed pojawieniem się swoistej

przed pojawieniem się swoistej

odpowiedzi immunologicznej i

odpowiedzi immunologicznej i

stwierdzenia jej odczynami

stwierdzenia jej odczynami

serologicznymi, umożliwia wykrycie

serologicznymi, umożliwia wykrycie

materiału genetycznego zarazka w

materiału genetycznego zarazka w

materiale biologicznym jak i w czystych

materiale biologicznym jak i w czystych

hodowlach, nawet wtedy gdy próbka jest

hodowlach, nawet wtedy gdy próbka jest

bardzo mała lub w stanie rozkładu

bardzo mała lub w stanie rozkładu



PCR służy do wykrywania materiału

PCR służy do wykrywania materiału

genetycznego zarazków w narządach

genetycznego zarazków w narządach

wewnętrznych, skórze, krwi…

wewnętrznych, skórze, krwi…

RT PCR

RT PCR



Służy do wykrywania genomu RNA

Służy do wykrywania genomu RNA

wirusów

wirusów



Do uzyskania cDNA służącego jako

Do uzyskania cDNA służącego jako

matryca do właściwej reakcji PCR

matryca do właściwej reakcji PCR

polimeryzacja poprzedzona jest

polimeryzacja poprzedzona jest

etapem odwrotnej transkrypcji

etapem odwrotnej transkrypcji