Przemysłowe procesy
fermentacyjne
Rodzaje bioprocesów
Biosynteza
Biotransformacja
Biohydroliza
Fermentacja
Bioługowanie
Biodegradacja
Blokowy schemat technologiczny procesu biosyntezy mikrobiologicznej
Sposoby prowadzenia procesów biotechnologicznych
A – proces okresowy; B – proces okresowy z zasilaniem; C – proces ciągły w układzie homogenicznym;
D – proces ciągły homogeniczny z częściową recyrkulacją ; E – proces ciągły dwustopniowy; F – proces
ciągły heterogeniczny w reaktorze z przepływem tłokowym; G – proces ciągły heterogeniczny z częściową
recyrkulacją; H – proces ciągły dwustopniowy w układzie mieszanym; I – proces z odprowadzeniem
produktu metodą dializy; J – proces okresowy w kolumnie ze złożem biokatalizatora, z recyrkulacją cieczy;
K – proces ciągły w kolumnie ze złożem biokatalizatora; L – proces jak w K, z częściową recyrkulacją
PROCESY CIĄGŁE
Zalety:
1. Wyeliminowanie wpływu czasu hodowli na zmiany warunków w pożywce
i fizjologię drobnoustrojów
2. Możliwość prowadzenia hodowli dowolnie długo w ustalonych, optymalnych warunkach
3. Możliwość regulacji stanu fizjologicznego komórek przez dobór zasilania
i składu podłoża zasilającego hodowlę
4. Jednorodność fizyczna i chemiczna hodowli
5. Możliwość automatyzacji procesu
6. Większa szybkość i wydajność wielu procesów
7. Możliwość maksymalnego wykorzystania aparatury i jej równomiernego obciążenia
Wady:
1. Możliwość degeneracji szczepów lub pojawienia się niekorzystnych mutacji i opanowania
hodowli przez populacje komórek o pogorszonych właściwościach produkcyjnych
2. Trudności w utrzymaniu warunków aseptycznych procesu w bioreaktorze przez dłuższy
czas
3. Niekorzystny sposób rozwoju niektórych drobnoustrojów, tworzących układy
wielokomórkowe, skupiska w postaci kłaczków i kuleczek, obrastanie przewodów
4. Niekorzystna relacja pomiędzy wzrostem drobnoustrojów, a tworzeniem niektórych
produktów metabolizmu syntezowanych przez komórki nie rosnące
Podstawowe typy bioreaktorów do tlenowych procesów wgłębnych
A – bioreaktor z mieszadłem tarczowo-turbinowym i bełkotką; B – bioreaktor z mieszadłem aeratorem;
C – bioreaktor strumienicowy z pompą zewnętrzną i eżektorowym zasysaniem powietrza; D – bioreaktor
kolumnowy z bełkotką; E – bioreaktor kolumnowy z inżektorowym doprowadzeniem powietrza i rurą
cyrkulacyjną; F – bioreaktor z mieszadłem śmigłowym, dyszą doprowadzającą powietrze i rurą cyrkulacyjną;
G – bioreaktor z hydrostatyczną cyrkulacją zewnętrzną
BIOREAKTORY
Bioreaktory przemysłowe
Bioreaktor laboratoryjny
(1) korpus; (2) płaszcz; (3) izolacja; (4) zamocowanie;
(5) króciec do podawania inokulum; (6) króćce czujników
pH, temperatury i poziomu tlenu; (7) mieszadło;
(8) bełkotka; (9) uszczelka mechaniczna; (10) sprzęgło;
(11) napęd; (12) króciec odbioru produktu; (13) króćce
doprowadzenia czynnika chłodzącego do płaszcza;
(14) króciec do poboru próbki z podłączeniem do
przewodu dostarczającego parę; (15) wziernik boczny;
(16) króćce przewodów podawania czynników
regulujących pH oraz środków antypieniących;
(17) króciec wlotu powietrza; (18) pokrywa;
(19) króciec dopływu pożywki; (20) dysza wylotowa
gazów; (21) inne podłączenia; (22) mechaniczny
rozbijacz piany; (23) wziernik w pokrywie i podłączenie
do przewodu odprowadzającego parę; (24) dysza
z zaworem bezpieczeństwa.
Bioreaktor
Rodzaje mieszadeł stosowanych w biofermentorach
Rozwiązania techniczne bioreaktora typu air-lift
Schematy wybranych bioreaktorów do procesów z biokatalizatorami
immobilizowanymi
A – kolumna ze złożem upakowanym; B – kolumna ze złożem zraszanym; C – kolumna ze złożem fluidalnym;
D – bioreaktor z mieszadłem mechanicznym; E – bioreaktor z wkładami unieruchomionego biokatalizatora;
F – bioreaktor z krzyżowym przepływem fazy ciekłej i gazowej; G – bioreaktor rurowy z wkładami (włóknami)
z materiału półprzepuszczalnego
Urządzenia do mechanicznego rozbijania piany
A – dysk szybkoobrotowy (1 – wylot powietrza, 2 – doprowadzenie chemicznego środka
przeciwpianowego); B – mieszadło łapowe pomiędzy dwoma dyskami; C – fundafom CHEMAP
(1 – zasysanie piany, 2 – wylot powietrza, 3 – wyrzut cieczy); D –cyklon (1 – pompa, 2 - wylot
powietrza)
Krew bydlęca
Beef blood
Hydrolizat kazeiny
Casein hydrolysate
Mączka z nasion bawełny
Cottonseed meal
Mączka z kiełków kukurydzianych
Corn germ meal
Wodny namok kukurydziany
Corn steep liquor
Mączka rybna
Fish meal
Mączka z siemienia lnianego
Limseed meal
Mączka mięsno-kostna
Meat and bone meal
Mączka z orzeszków ziemnych Peanut meal
Mączka z nasion rzepaku
Rape seed meal
Mączka sojowa
Soybean meal
Stałe składniki serwatki
Whey solids
Ekstrakt
drożdżowy
Yeast extract
Źródła azotu stosowane w pożywkach fermentacyjnych
Olej z nasion bawełny
Cottonseed oil
Olej ze smalcu
Lard oil
Olej palmowy
Palm oil
Olej z ziarna palmowego
Palm kernel oil
Olej z orzeszków ziemnych
Peanut oil
Olej rzepakowy
Rape oil
Olej sojowy
Soy oil
Łój
Tallow
Źródła węgla stosowane w pożywkach fermentacyjnych
Melasy z buraków lub trzciny cukrowej Beet or cane molasses
Glukoza
Glucose
Kwas cytrynowy
Citric acid
Syrop kukurydziany
Corn liquor
Dekstryny
Dextrins
Etanol
Ethanol
Glicerol
Glycerol
Syrop maltozowy
Maltose liquor
Skrobia
Starch
Laktoza
Lactose
Lipidowe składniki pożywek fermentacyjnych
Metody wyjaławiania podłoża
A – okresowa; B- ciągła przeponowa, wymienniki płytowe; C – ciągła bezprzeponowa
1- inżektor parowy, 2 – rura sterylizacyjna, 3 – komora „próżniowa”
Schemat postępowania podczas przygotowania
materiału posiewowego do procesu
biosyntezy
Schemat etapów procesu fermentacyjnego
OBRÓBKA POPRODUKCYJNA – DOWNSTREAM PROCESSING
1. oddzielenie elementów nierozpuszczalnych od cieczy
2. zatężenie roztworu
3. oczyszczanie
4. formułowanie
Wirówki wykorzystywane
w przemysłowych procesach
biotechnologicznych
a) kalander rurowy; b, c) wirówka talerzowa; d) wirówka ślimakowa
OBRÓBKA POPRODUKCYJNA – DOWNSTREAM PROCESSING
Przemysłowe metody dezintegracji komórek
1. Poddawanie działaniu wysokiego ciśnienia
2. Ucieranie (młyny kulowe)
3. Mikrofluidyzacja
A. Metody mechaniczne
B. Metody niemechaniczne
1. Suszenie/zawieszanie w roztworze
2. Szok osmotyczny
3. Szok termiczny
4. Traktowanie rozpuszczalnikami organicznymi lub surfaktantami
5. Zastosowanie enzymów litycznych
Przemysłowe metody zagęszczania roztworów
1. Odparowywanie, w tym: odparowywanie ze spływającą warstwą,
odparowywanie płytowe
2. Ekstrakcja ciecz/ciecz
- prosta
- dysocjatywna
- reakcyjna
3. Wytrącanie
- frakcjonowanie siarczanem amonu
- wytrącanie powinowactwa
- immunoprecypitacja
3. Adsorpcja
- na węglu aktywnym
- na żywicach jonowymiennych
- na adsorbentach hydrofobowych
metoda złoża fluidalnego w kolumnie – proces ciągły
Diagram fazowy pojedynczej substancji
P
c
– ciśnienie krytyczne; T
c
– temperatura krytyczna
Ekstrakcja płynem w stanie nadkrytycznym
OBRÓBKA POPRODUKCYJNA – DOWNSTREAM PROCESSING
Odparowywanie membranowe - pervaporation
Przemysłowe techniki chromatograficzne
Stosowane głównie dla oczyszczania białek i DNA
Techniki:
- Chromatografia rozmiarów wykluczających (Sephadex, Sepharose)
- Chromatografia jonowymienna (DEAE-, Q-, CM-, S)
- Chromatografia hydrofobowa (Phenyl-Sepharose)
- Chromatografia adsorpcyjna (hydroksyapatyt)
- Chromatografia powinowactwa
Metody formułowania produktu
- krystalizacja
- suszenie
- liofilizacja
Liofilizatory
Suszarka z wymuszonym obiegiem
powietrza