Wykonanie: Mazurkiewicz Marek

Zajęcia 13 11-01-2011

Temat: Oznaczanie aktywności lipazy trzustkowej

1. cel: poznanie alkacymetrycznej metody oznaczania aktywności lipazy trzustkowej z użyciem śmietanki jako naturalnej emulsji lipidu oraz badanie szybkości katalizowanej reakcji zależnie od czasu jej trwania.

2. zasada metody: Oznaczenie polega na pomiarze ilości uwolnionych kwasów tłuszczowych z lipidów mleka pod działaniem lipazy trzustkowej w temp. 37°C i początkowym pH 7.7, którego wartość z upływem czasu ulega niewielkiemu obniżeniu (do pH 7.0) w wyniku uwalniania kwasów tłuszczowych. Ilość uwolnionych kwasów tłuszczowych oznacza się przez miareczkowanie mieszaniny inkubacyjnej mianowanym roztworem wodorotlenku potasowego wobec fenoloftaleiny. W opisanej metodzie, dopiero po 60 minutach inkubacji uzyskuje się proporcjonalność między ilością wyciągu trzustkowego a szybkością reakcji.

3. obserwacje i obliczenia:

   
   K – objętość roztworu zużyta na zmiareczkowanie prób kontrolnych

   P – objętość roztworu zużyta na zmiareczkowanie prób po 60min inkubacji

   Ponieważ podkreślone wyniki wydają się bardziej prawdopodobne użyto ich do dalszych obliczeń

   9,9-4,45=5,45

   z zeszytu (kolba nr1): 2,5ml

   
   czyli:

   

4. wnioski: Aktywność lipazy trzustkowej wynosi 1211 µmola /1g * 1minuta