Kinetyka reakcji enzymatycznych
Kinetyka reakcji enzymatycznych
Stan równowagi dynamicznej
Stan równowagi dynamicznej
[EA] = constans
[EA] = constans
Stężenie kompleksu Enzym-Substrat
EA
14
12
10
8
EA
6
4
2
0
0 2 4 6 8 10 12 14 16 18 20 22
14
czas
12
10
8
6
4
2
0
0 2 4 6 8 10 12 14 16 18 20 22
stężenie
Krzywa progresji
 pomiar szybkości początkowej reakcji 
v = dP/dt
Czas
Czas
Stężenie produktu
Stężenie produktu
Krzywa wysycenia enzymu substratem
 pomiar powinowactwa substratu do enzymu 
n
(Vmax - v0) × (KM + [A] ) = KM ×Vmax
0
Różniczkowe równania kinetyczne
Vmax = k + 2[E]0
k  1 + k + 2 k  1
KM = KM =
k + 1 k + 1
v0 = Vmax[A]0×([A]0+KM) 1
Równoważność KM i KS
Równoważność KM i KS
W większości reakcji enzymatycznych wartości KM i KS
nie różnią się istotnie
Wyznaczanie kinetycznych stałych reakcji
Wyznaczanie kinetycznych stałych reakcji
enzymatycznej  linearyzacja
enzymatycznej  linearyzacja
Krzywe Lineweavera-Burke a przy różnych
Krzywe Lineweavera-Burke a przy różnych
początkowych stężeniach produktu
początkowych stężeniach produktu
Równanie Hanesa
[P]
[A] -
A
K 1 K [P]
c M
= [A] + (1+ )
1 P
v0 V V K
1 M
Schematy reakcji enzymatycznych
Schematy reakcji enzymatycznych
w obecności inhibitorów
w obecności inhibitorów
Hamowanie reakcji enzymatycznych
Hamowanie reakcji enzymatycznych
A
1 1 [I ] K [I ] 1
0 M 0
= (1+ ) + ( )(1+ )
'
v V K V K [A]
0 max i 1 i 0
Hamowanie reakcji enzymatycznych
Hamowanie reakcji enzymatycznych
Struktura enzymów a rodzaj kinetyki
Struktura enzymów a rodzaj kinetyki
podstawowym pojęciem w kinetyce niehiperbolicznej jest
podstawowym pojęciem w kinetyce niehiperbolicznej jest
kooperacja; procesy kooperacyjne sÄ… podstawÄ… allosterii
kooperacja;
(allosteria jest pojęciem węższym)
Kinetyka niehiperboliczna
Kinetyka niehiperboliczna
Enzymy o kinetyce niehiperbolicznej występują częściej
niż enzymy o kinetyce hiperbolicznej
Transformacja Lineweavera-Burke a
a) Kinetyka hiperboliczna a) Kinetyka hiperboliczna
b) Kooperacja (+) b) Kooperacja (+)
c) Kooperacja ( ) c) Kooperacja ( )
100
90
80
70
60
50
40
30
20
10
0
0,0 1,0 2,0 3,0 4,0 5,0 6,0
n
(Vmax - v0) × (KM + [A] ) = KM ×Vmax
0
Kinetyka niehiperboliczna
Kinetyka niehiperboliczna
Transformacja Hilla
a) Kinetyka hiperboliczna
b) Kooperacja (+)
c) Kooperacja ( )
Kinetyka enzymów oligomerycznych
Kinetyka enzymów oligomerycznych
Właściwości katalityczne enzymów oligomerycznych,
w których występują efekty kooperacyjne, opisuje się
za pomocą dwóch modeli:
Sprzężonego (concerted) MWC zaproponowanego przez
Sprzężonego
Monoda, Wymana i Changeux,
Sekwencyjnego (sequential) AKNF zaproponowanego
Sekwencyjnego
przez Adaira (Koshlanda, Nemethy ego, Filmera)
Bezpośrednie pomiary stałych szybkości reakcji
Bezpośrednie pomiary stałych szybkości reakcji