Mikrobiologia ćw 13 17. 05. 2012

ROZPOZNANIE LABORATORYJNE BAKTERII GRAM – UJEMNYCH (ENTEROBACTERIACEAE)

Salmonella spp.

-ludzka (jeden rezerwuar)

* S. Typhi, S. Parathypi A, B, C

- serotypy zaadoptowane do godpodarza

* S. gallinarum (drób)

* S. dublin (bydło)

-nieadoptujące się:

* patogeny żywności (S. Typhi – murium, S. Entiritidis – zapalenie jelita cienkiego i grubego salmonellozy)

Nieadoptujące się nowe serotypy – importowana żywność

-S. chester grupa serologiczna B

- S. Thompson, s. mbandana, s. isangi, s. livingstone, s. hadow, s. djagu, s. infantis grupa seroligoczna C

- s. blegdam grupa serologiczna D

- S. uganda grupa serologiczna typu E

Rezerwuar:

1. Drób i produkty drobiowe

2. Mięso wołowe i wieprzowe – najczęstszy patogen w mięsie – badanie tusz zwierząt zgodnie z normą ISO

3. Ryby i krewetki

4. Niepasteryzowane mleko i produkty z takiego mleka

5. Owoce i warzywa (kiełki)

6. Człowiek i zwierzęta

7. Bierni przenosiciele – owady

Bakterie z rodziny salmonella są przyczyną ponad 80% zatruć wywołanych spożyciem zakażonego mięsa. Każdy produkt odzwierzęcy stanowi potencjalne źródło zakażenia.

Czas inkubacji do wywołania objawów choroby mierzony w godzinach (12, 18 – 36 h) MID 10² – 10⁶ komórek.

Zakażenia postacie:

1. Żołądkowow – jelitowa (najczęściej) gastroenetrocalitis

2. Narządowa – przekorczenie bariery jelitowej – postacie pozajelitowe

1. Układ pokarmowy –zapalenie dróg żółciowych, wyrostak robaczkowego, otrzewnej, trzustki

2. Ukłąd oddcechowy, nerwowy, krążenia, moczowo – płciowy, kostno – stawowy; ropniei zmiany skórne

3. Uogólnione – septyczna, durowa.

Nosicielstwo:

- przejściowe (pochorobwe) – kilka miesięcy

- trwałe

* żółciowe – w patrologiach p. żółciowego

* jelitowa – w polipwatości i uchyłkowatości jelita

* moczowa – przy wadach wrodzonych układu moczowego

Czerwonka bakteryjna (Shigella)

- krwawa biegunka – dyzentrai

- czynnik etiologiczny Shigella spp.

-zmiany chorowbowe w jelicie grubym i prostym

- adaptacja do pasożytnictwa wewnątrzkomórkowego

-S. dysentria (grupa A 13 typów

- S. flexneri grupa B 6 typów 15 podtypów)

- S. baydii grupa C 20 typow)

-S. sannei (grupa D, 1 typ)

To pałeczki wrażliwe na działanie temperatury, inaktywacja w temp. 70 C czas 10 -15 min)

Są wrażliwe na światło słoneczne i środki antyseptyczne. Czas inkubacji wynosi od 124 do 72 h, rzadko 7 dni. Czas trwania 48 – 120 h, MID 10 -100 komórek (b niska dawka infekcyjna )!

Rezerwuarem są ludzie. Nie jest związana ze szczególnym typem żywnośic ale możemy ją izolować z sałatek ziemniaczanych i jajecznych, surowych owoców i warzyw, produktów mlecznych. Może znajdować się na ścianach i klamkach, w toaletach, muchy są biernymi przenosicielami.

E. Coli

Niebezpieczne są tylko niektóre typy serologincze. Wywołują ostre biegunki niemowląt, schorzenia żołądkowo – jelitowe u dorosłych. Czas inkubacji wynosi od 12 do 72 h. MID 106 – 107 komórek.

EPEC – enteropatogenna E. coli – biegunkiinfekcyjne u niemowląt

EPIE – enteroinwazyjna – objawy podobne do czerwonki

EHEC – enterokrwotoczna – krwotoczne zapalenie jelita grubego

ETEC – eneterotokscczna – biegunki choleropodobne

EAggEC – enteroagregacyjna – wodniste biegunki głównie u dzieci

Żródła: mięso, jaja, surowe sałatki, mleko (nadaje mu zapach paszy), twaróg…

Yersinia spp.

Y. pestis – pałeczka dżumy

Y. pseudotuberculosis – kiedyś pałeczka radencjazy

Y. enterocalitica – paleczka jersiniazy

Może powodować ostre nieżyty żołądkow – jelitowe, zakażenia pozajelitowe, postacie pseudowyrostkowe.

Yersinia, salmonella i Shigella – bezwzględne patogenne drobnoustroje dla człowieka !

Izolowane od zwierząt np. świń, ze środowiska (woda); środki spożywcze – mleko, mięso wiperzowe i wołowe, drób, ryby, małże, kraby

Łatwo przetrzymuje mrożenie, namnaża się w temperaturze -1 C przy pH 4,6 – 9,0optymalne wynosi 7,2 do 7,4. Czas inkubacji 1 – 6 h, czas trwania od 6 do 12 h. ZJAWISKO NOSICIELSTWA W KALE.

POZOSTAŁE PAŁECZKI:

1. Cronobacter sakazaki – kiedyś enterobacter sakazaki

Jest rozpowszechniona w przyrodzie, Bakteria oportunistyczna. Schorzenia wywołane przez tą bakterię cechuje wysoki wskaźnik śmiertelnośic. Zwiększona oporność na wysokie temperatury w porównaniu z innymi enterobacteriaceae. Występuje w serach, tofu, mięsie mielonym, wędzonym, herbacie. MID nie określone do tej pory! Infekcje dotyczą głównie noworodków. Odżywki dla niemowląt a objawy zapalenia opon mózgowych (jako wtórne zanieczyszczenie butelek do mleka)

1. Proteus

Mogą powodować serowatośc mleka, bombaż konserw szynkowych.

1. Serratia

Spotykana w warzywach korzeniowych. Powoduje czerwienienie mięsa, ryb – S. rosea, S. selinaria. Czerwona barwa mleka – S. marcescens.

DIAGNOSTYKA

W załączniku

Podłoża:

Najważniejsze podłoże XLD

Wzrost w postaci:

Czerwonych kolonii – pałeczki nie rozkąłdają cukrów, Kolonie fermentujące – żółte. Szczepy wytwarzające siarkowodór powodują zaczernienie.

Salmonella – czerwone z czarnym środkiem

Shigella – czerwone

Escherichia, Citrobacter, Enterobacter, Klebsiella - żółte.

Wykrywanie Yersinia też w załączniku

CIN – agar z cefsulodyną, irgasarem, nowobiocyną.

Jednym ze skąłdników podłoża jest mannitol, pałeczki Y. rozkładają go z wytworzeniem kwasu.

Kolonie po 24 godzinach w 25 C rosną w postaci małych ( 1-2 mm) kolonii. Po 48 h są nieco większe, różowo – fioletowe z wyraźną przejrzystą otoczką, środek kolonii zwykle lekko zapadnięty a brzeg postrzępiony. Rosnące w masie czasem zażółcają podłoże.

SZEREG PODSTAWOWY (IDENTYFIKACJA BIOCHEMICZNA)

Woda peptonowa z tryptofanem

Podłoże christensena rozkład mocznika przez ureazę

Podłoże kligera – rozkład laktozy, glukozy i wytworzenie siarkowodoru i gazu

Laktoza 10% pod parafiną – rozkąłd laktozy

Dla Salmonella

1. Indolo (-)

2. Ureazo (-)

3. Laktozo (+/-), glukozo (+), H2S (+)

4. Laktozo (+) i niektóre (-)

Struktura antygenowa: antygen somatyczny O; rzęskowy H, powierzchniowy Vi – występują u S. Typhi i Parathypi C. Wykonujemy oznaczanie najpierw z surowcami grupowo – swoistymi, potem w obrębie grupy z typowo – swoistymi.

Potwierdzenie serologiczne dla Shigella spp z surowcami mono i poliwalentnymi.